YY_T 1561-2017组织工程医疗器械产品动物源性支架材料残留α-Gal抗原检测.pdf

ICS_11.040.40YY中华人民共和国医药行业标准YY/T1561—2017组织工程医疗器械产品动物源性支架材料残留α-Gal抗原检测Tissue engineering medical device products-Remnant α-Gal antigen determination in scaffold materials utilizinganimal tissues and their derivatives2017-03-28发布2018-04-01实施国家食品药品监督管理总局发布 YY/T言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草，请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任，本标准由国家食品药品监督管理总局提出，本标准由全国外科植入物和矫形器械标准化技术委员会组织工程医疗器械产品分技术委员会(SAC/TC 110/SC 3)归口,本标准起草单位；中国食品药品检定研究院、中国人民解放军第四军医大学、冠吴生物科技股份有限公司。本标准主要起草人：徐丽明、邵安良、陆艳、赵红妮、金岩、张勇杰、汤银喜、张伟、柴、I YY/T物源性生物材料及含动物源性生物材料的医异种器官中残留的抗原是该类生物材料及器官移植中超急性免疫排斥反应及慢性免尽管动物源性生物材料在制备过程中经过了脱细胞和去除抗原的处理，仁免疫毒性反应的风险。Gal)是引起动物源性生物材料-3 Gal β 1-4 GleNAc-R,该抗原是率乳糖基1主要受a-1,3半乳基转移解（al，3-6α-Gal抗原的生材料目前，尚无动物源同时，试验体系中加人了Gal抗原阳性和明性参考品更试验的灵敏性和特异性得以监控竞争性ELISA抑制方法是一种常用的方法，其原理是：首先将标准曲线样品及试验样品的α-Gal抗原与M86抗体反应（消耗部分M86抗体）；然后用Gal-BSA作为固相抗原，通过ELISA方法检测第一次反应后上清液中的剩余M86抗体；进面可利用标准曲线计算待测物中的α-Gal抗原含量。由于第一次待测物中的a-Gal抗原与M86抗体的反应对后续的剩余M86抗体与固相Gal-BSA抗原的反应构成了换制效应，故称为ELISA抑制法。II YY/T 1561—2017组织工程医疗器械产品动物源性支架材料残留α-Gal抗原检测1范围本标准给出了组织工程医疗器板产品支架材料制备时使用的动物源性生物材料中残留c-Gal抗原的定量检测方法，本标准适用于制备组织工程医疗器械产品支架材料的各种动物来源的生物材料或其衍生物的α-Gal抗原检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T16886.20医疗器被生物学评价第20部分；医疗器械免疫毒理学试验原则与方法(GB/T 16886.20—2015, ISO/TS 10993-20;2006,IDT)YY/T0606.25组织工程医疗产品第25部分：动物源性生物材料DNA残留量测定法：荧光染色法3术语和定义GB/T16886.20和YY/T0606.25界定的术语和定义适用于本文件。试剂和仪器4.1试剂试剂包括：a)磷酸盐缓冲液(PBS,phosphate buffered saline,pH7.4);b)碳酸盐缓冲液(pH9.5)；c)市售α-Gal Epitope(Gal α1-3Gal β 1-4GleNAc-R)，mAb(M86),分装后20C保存;d)市售Galα1-3gal-BSA(3atomspacer，简称Gal-BSA)，落于去离子水中，分装后一20C保存备用；e)辣根酶标记的山羊抗小鼠二抗（IgM-HRP)；f)TMB(3,3,5,5-Tetramethylbenzidine)显色液;g)血清白蛋白：h)裂解液（市售品），其主要组成成分包括：50mmol/L三羟甲基氨基甲烷（Tris，pH7.4)，150mmol/L氧化钠(NaCI)，1%（体积分数）案乙二醇辛基苯基醚（TritonX-100），1%（质量浓度）脱氧胆酸盐（sodiumdeoxycholate），0.1%（质量浓度）十二烷基硫酸钠（SDS)，原钒酸钠（sodiumorthovanadate），氟化钠（sodiumfluoride），乙二胺四乙酸（EDTA），亮抑酵肽 YY/T 1561—2017(leupeptin）及苯甲基磺酰象(Phenylmethanesulfonylfluoride，PMSF)；洗减：0.05%（体积分数）的吐温-20/PBS；j)10%(体积分数)H,SO；k)Gal抗原阳性生物材料参考品；D)Ga