NYT 1287-2007油菜籽中叶绿素含量的测定 光度法.pdf

ICS 65.020.01B 05NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1287—2007油菜籽中叶绿素含量的测定光度法Rapeseed-Determination of Chlorophyll ContentSpectrometric Method2007-07-01实施2007-04-17 发布中华人民共和国农业部S发布 NY/T 1287--2007言前本标准等同采用ISO 10519:1997(E)《油菜籽中叶绿素的测定一光度法》。本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位：农业部油料及制品质量监督检验测试中心。本标准主要起草人：张文、汪雪芳、丁小霞、杨湄、李培武、李光明。I NY/T 1287—2007光度法油菜籽中叶绿素含量的测定1 范围本标准规定了采用光度法测定油菜籽中叶绿素含量的方法。本标准适用于油菜籽中叶绿素含量的测定,不适用于菜籽油中叶绿素含量的测定。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。GB 5491　粮食、油料检验　扦样、分样法GB/T14489.1油料水分及挥发物含量测定法3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1叶绿素含量chlorophyll content在665nm前后吸收波长检测出的叶绿素A的含量。4　原理样品中叶绿素经用规定的试剂提取后，用光度法测定提取液中叶绿素含量。5 试剂除非另有说明，均使用分析纯试剂。5.1提取剂:100mL无水乙醇加人300 mL异辛烷或正庚烷或无水石油醚(沸点90℃～120℃）。6仪器设备6.1 天平,感量±0.001g。6.2粉碎机、机械磨或咖啡磨等。6.3研磨瓶(见图 1),密封性能良好的 50 mL不锈钢试管,内盛有 3个直径 16 mm 的不锈钢球,能够在水平摇床上以240次/min的速度安全振摇。6.4中速滤纸,V型折叠。6.5分光光度计,具有扫描功能,能测定波长在600 nm～750 nm之间的吸收值,波长精度2nmo6.6比色皿,1 cm～3cmo6.7 吸管,30 mL。6.8具塞试管,20 mL。7扦样按照GB5491扦取油菜籽样品。1 NY/T 1287—2007氯丁橡胶或氟硅酮塞不锈钢珠Φ16mm钢套e124mm图 1 研磨瓶8试样的制备将油菜籽样品用粉碎机粉碎,过0.42mm筛。当样品水分含量超过10%时,在45℃条件下干燥12 h,使其水分含量降低到10%以下。9分析步骤9.1称样称取2g(精确到0.001g)样品于研磨瓶中(6.3)。9.2提取9.2.1移取30 mL提取剂(5.1)至研磨瓶中,加人 3个钢球,密封,水平摇床上振荡提取 1 h,温度15℃～30℃,振荡频率:240次/min。9.2.2提取完毕后,取下研磨瓶，静置10min,用中速滤纸(6.4)过滤至具塞试管(6.8)中,迅速盖好盖子。9.3测定用提取剂(5.1)作空白,将提取液倒人比色Ⅲ中,放人分光光度计中分别测定665 nm、705 nm和625 nm吸收值。10结果计算10.1叶绿素含量以质量分数 计,单位以毫克每千克(mg/kg)表示,按公式(1)计算。A校正×V(1) =mxl式中:A705 + A625.A校正= A665 2665nm处的吸收值；A665705nm处的吸收值；A705~625nm处的吸收值；A625k 常数,等于13;一光程长，比色Ⅲ厚度的数值,单位为厘米(cm);l:?-试样质量的数值,单位为克(g);m -V-加人的提取剂的体积的数值,单位为毫升(mL)。2 NY/T 1287—20072换算成油菜籽干基样品中的叶绿素含量，按公式(2)计算：10.2k × A校正× V100(2)w(干基)二意鲁Xmxl100 - W1式中:A校正、k、l、m、V同公式(1);一样品中水分及挥发物含量。W1-11精密度测定结果用算术平均值表示，保留到小数点后两位。两次平行测定结果的相对相差小于10%。3 中华人民共和国农业行业标准油菜籽中叶绿素含量的测定光度法NY/T 1287—2007***中国农业出版社出版（北京市朝阳区麦子店街18号楼）（邮政编码：100026网址: )中国农业出版社印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经销***开本 880mm× 1230mm 1/16印张0.5字数5千字2007年6月第1版2007年6月北京第1次印刷书号：16109·1213印数：1～500册版权专有侵权必究举报电话：（010Y/ T 1287-2007