二级出水条件下能源微藻混合培养生长特性及生物质产量研究.docxVIP

二级出水条件下能源微藻混合培养生长特性及生物质产量研究 随着能源危机的日益严重，微藻生物柴油被用作新型可支配能源（vasudev和briggs，2008）。同时, 微藻在污水深度脱氮除磷方面也具有明显的优势。Oswald等 (Oswald等, 1957;Gonzalez等, 1997;Mallick, 2002) 于1958年提出利用微藻处理污水的概念后, 作为污水三级处理的微藻深度脱氮除磷也得到了较快的发展。基于微藻能够同时应用于污水脱氮除磷和生物能源生产的事实, 胡洪营等 (胡洪营等, 2009;Hu等, 2010;Hu等, 2011) 提出了“污水深度脱氮除磷与微藻生物能源生产耦合工艺”。该工艺可净化水质并同时回收氮磷、获得高价值藻细胞生物质。然而, 要实现上述工艺从实验室研究到大规模应用, 能源微藻在城市污水二级出水中的生长速率较慢及生物质产率较低是限制性因素之一。 关于提高微藻生产效率的方法, 国内外开展了大量的研究, 根据对应工序的不同可分为藻种选择、藻类培养两类。藻种选择方法是通过技术手段获得高产率的微藻藻株, 主要技术包括开发快速筛选方法筛选大量藻种、研究生物质及油脂代谢机理和利用遗传学工具改性微藻 (Ferrell和Valerie, 2008) 但是有研究表明大量已选出的单一藻种培养不适于污水体系, 污水体系里的杂藻、原生动物等能够降低单一藻种的生产效率甚至使培养系统崩溃 (Cheng等, 2004;Hoffman等, 2008) 。藻类培养方法是通过改变培养条件提高微藻的生产效率, 温度、光照、营养盐等培养条件的改变虽然提高生产效率效果明显, 但控制培养条件成本高且易于产生二次污染, 不适合大规模应用于污水体系。 混合培养是在培养系统中, 对2种及2种以上的高产率微藻进行培养以获得生物质的技术。许多研究报道, 混合培养对微藻的生物质产量具有促进作用。对三角褐指藻Phaeodactylum tricornutum、杜氏盐藻Dunaliella salina和亚心形扁藻Platymanas subcordiformis 3种海洋经济微藻在灭菌人工培养基条件下两两混合培养, 在适合的接种比例下能够促进微藻生长、增加生物量 (黄伟伟, 2009) 。海洋原甲藻Phaeodactylum tricornutum Bohl与三角褐指藻Phaeodactylum tricornutum Bohlin进行混合培养时三角褐指藻的生长速率与生物质产量均高于单一藻种培养 (周成旭等, 2006) 。Johnsond等 (Johnson和Admassu, 2013) 的研究表明, 在人工培养基条件下, 4种微藻组成的混合藻种生物质产量高于部分单一藻种培养的微藻。混合微藻通过细胞接触 (Twirler, 2001) 、化感作用 (Floeder等, 2006) 和生长资源竞争 (Kuwata和Miyazaki, 2000) 等机制相互影响, 主要有促进、中性和抑制4种关系。影响机制受藻种的影响, 选择合适的微藻进行混合培养能够有效提高生物质产率。此外, 混合培养将适宜条件各异的高产率藻种混合, 可以扩大培养系统的培养条件控制范围, 从而降低培养系统的维护成本。大规模微藻混合培养系统抵御环境条件 (温度、捕食者等) 突变的能力也更强。因此, 微藻混合培养的研究对生物质生产具有重要的意义。目前关于微藻混合培养的研究多集中于水华微藻生长抑制及人工培养基条件下常见经济微藻生物质生产, 而关于污水条件下混合培养对能源微藻生长特性影响的研究未见报道。 本研究选取3株典型的高含油脂藻:栅藻LX1 (Scenedesmus sp.LX1) 、椭圆小球藻YJ1 (Chlorella ellipsoidea YJ1) 和雨生红球藻 (Haematococcus pluvislis) , 对比研究3株微藻单一藻种、两两混合藻种条件下的生长特性, 以筛选出能够有效促进城市污水二级出水条件下微藻生物质生产的混合藻种。 1 水样的预处理 生活污水二级出水 (以下简称“二级出水”) , 取自北京G污水处理厂的二沉池出水。水样先经过0.45μm的滤膜过滤 (滤后二级出水的水质为:p H=7.87, ρ (TN) =26.8 mg·L-1, ρ (TP) =0.03 mg·L-1) , 再经高温高压灭菌 (121℃, 20 min) 后用于藻类培养。 1.1.2 城市生活污水水质分析监测 栅藻LX1 (Li等, 2010a) 由李鑫等从低营养环境中分离获得, 在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号为No.3036。椭圆小球藻YJ1由杨佳 (Yang等, 2011) 分离自城市生活污水二级出水, 在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号为N