岭南排石口服液研制与刺桐碱含量测定的研究.docxVIP

? ? 岭南排石口服液研制与刺桐碱含量测定的研究 ? ? 刘群娣，万 颂，苏馨科，欧阳霄妮，黄俊明，李冬利，郑小吉 （1. 广东江门中医药职业学院南药学院，广东 江门 529000 ；2. 广州市花都区人民医院泌尿外科，广东 广州510800 ；3. 五邑大学生物科技与大健康学院，广东 江门 529000） 岭南排石口服液是以全国老中医药专家学术继承工作指导老师、广东省第二批名中医师承项目指导导师余伯亮主任中医师家传经验方“岭南排石汤”为原方，并由广东首届职教名师、广东江门中医药职业学院郑小吉主任中药师采用现代科学工艺研制而成，用于临床多发结石症的治疗。岭南排石口服液以牛大力、布渣叶、广东土牛膝等为原料，其中牛大力为君药。牛大力为豆科植物美丽崖豆藤Millettia speciosa Champ. 的干燥根，是岭南常用的“药食同源”药材，其味甘、性平，具有补虚润肺、补骨、强筋活络的功效。刺桐碱、高丽槐素是岭南排石口服液中主要的药效成分[1-2]，且常被用作评价牛大力质量优劣的指标[3]。本文介绍了岭南排石口服液的制备工艺，并以色谱图中的主要色谱峰、牛大力的主要药效成分刺桐碱为指标性成分，建立岭南排石口服液中刺桐碱含量测定的简便方法，用以对岭南排石口服液进行质量控制。 1 仪器与试药 ACQUITY UPLC H-Class PLUS 型高效液相色谱仪，配Empower 色谱工作站（购自上海Waters 科技有限公司）；ML204T 型电子分析天平（购自上海METTLER TOLEDO 仪器有限公司）。牛大力、布渣叶、广东土牛膝等药材均购自国药控股国大药房江门连锁有限公司，并经广东江门中医药职业学院郑小吉教授鉴定为正品。岭南排石口服液（批号：2021091701，2021091702，2021091703 ；规格：50 mL）；对照品刺桐碱（批号：P20A10U95634，含量：98%），购自上海源叶生物科技有限公司；甲酸为分析纯，乙腈、甲醇为色谱纯，水为超纯水。 2 方法与结果 2.1 溶液的制备 2.1.1 对照品溶液的制备 取干燥至恒重的刺桐碱对照品约1 mg，精密称定后用50% 的甲醇溶解，制得质量浓度为62.50 μg/mL 的对照品溶液。精密吸取上述溶液，用50% 的甲醇进行逐级稀释，即得到不同质量浓度的对照品溶液。 2.1.2 供试品溶液的制备 取岭南排石口服液5 m L，置于50 mL 的容量瓶中，加50% 的甲醇定容至刻度，摇匀后经微孔滤膜过滤，即制得供试品溶液。 2.2 色谱条件 色谱柱：ACQUITYUPLCBEHC18（2.1mm×100mm，1.7μm）；流动相：0.1%甲酸水（A）-乙腈（B），梯度洗脱；检测波长：278nm；流速：0.300mL/min；进样体积：1μL；柱温：30℃。梯度洗脱流动相比例见表1。 表1 梯度洗脱流动相比例 2.3 专属性试验 取对照品溶液、供试品溶液进样分析，以50%的甲醇溶液为阴性对照溶液，结果见图1。供试品溶液（图1-C）与对照品溶液（图1-A）的色图谱中保留时间为2.8min 处有相同色谱峰，且紫外吸收光谱图一致，而阴性对照溶液（图1-B）在此处无色谱峰。表明该检测方法的专属性好。 图1 对照品溶液（A）、阴性对照溶液（B）及岭南排石口服液供试品（C）的典型色谱图 2.4 线性与范围考察 取不同质量浓度的对照品溶液，按上述色谱条件进样，记录峰面积。以峰面积积分值对对照品溶液的进样量进行回归分析，以浓度（μg/mL）为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得到回归方程：y= 4393x+3680.7（r=0.9999）。结果表明，刺桐碱的进样浓度在0.10 ～62.5 μg/mL 之间时，与峰面积的值呈现良好的线性关系。 2.5 精密度试验 取对照品溶液，按“2.2”项下的色谱条件连续进样6 次，记录峰面积。峰面积的相对标准偏差（RSD）均为0.07%（n=6），均小于2%，表明该检测方法的精密度良好。 2.6 稳定性试验 取同一份供试品溶液，在室温下分别放置0h、2h、4h、8h、12h、24h 后，进样分析，记录峰面积。峰面积的RSD 为0.39%，表明供试品溶液在24 h 内稳定性良好。 2.7 重复性试验 取同一批岭南排石口服液（批号：2021091701），按“2.1.2”项下的方法制备供试品溶液，并平行分为6 份，按“2.2”项下的色谱条件进样分析，记录峰面积。结果显示RSD 为1.30%（n=6），表明该检测方法的重复性良好。 2.8 加样回收率试验 取已知含量的岭南排石口服液（ 批号：2021091701）约0.05mL，平行分为6 份，分别加入上述对照品溶液适量，按“2.1.2”项下的方法制备供试品溶液，并按“2.2”项下的色谱条件进样