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光合细菌对小麦生长、产量及光合功能的影响
小麦作为中国的主要粮食,在经济发展中发挥着重要作用。提高我国小麦产量和品质是农业生产的重点。当前我国小麦生产处于爬坡期, 常规提高小麦产量手段的潜力已经基本挖掘。因此, 新的生物技术的出现和应用将成为进一步增产的希望所在。影响小麦产量的实质是光合作用, 小麦对日光能的最高利用效率为2.4%, 全生育期平均0.7%-1.2%。因此, 最大限度的群体光能截获与优化, 是产量进一步提高现实、有效的增产途径之一。可见, 提高小麦的光合效率, 增加小麦产量, 具有重要的理论和实际意义。
光合细菌 (Photosynthetic bacteria, PSB) 是微生物中一类可利用太阳能生长繁殖的特殊生物类群。作物喷施后, 通过诱导作物本身的防卫系统以及对作物叶面、根际微生态环境的调节, 从而提高叶绿素含量, 增强光合作用强度, 促进作物生长, 改善作物品质以及提高农作物抗病毒活性。已有文献报道PSB可促进水稻和玉米等粮食作物的产量相关性状发育, 使产量得到显著提高;喷施PSB也可改善新型烟草成分和品质。此外, PSB在蔬菜种植以及农残降解等方面也取得了良好的效果。可见, PSB的开发和应用对于农业可持续发展具有重要的意义。
PSB对农作物生长以及果实品质有显著的促进和改善作用, 但有效成分和相关调控机制等一些基础性问题几乎无人问津, 对于不同作物的作用机理和方式尚未形成一致的看法。农业上对PSB的应用研究在我国已经不同程度地开展起来, 应用于水稻、玉米、卷心菜、食用菌、韭菜及烟草等作物栽培上已经表现出良好的应用效果和前景。在小麦应用研究领域中, 胡青平等在实验室水平研究了PSB浸种对小麦萌发的影响, 发现稀释液提高了小麦萌发过程中可溶性蛋白和还原性糖含量 (P0.05) , 并对细胞膜具有一定的保护和修复作用, 从而促进其萌发, 但所用菌株未明确说明。马文丽和郭凌等报道球形红细菌可明显降低水培幼苗的重金属积累。此外, 王春虎等报道了不同浓度光合菌肥对小麦生长和产量的影响, 但施用菌种配方为芽孢杆菌、乳酸杆菌和根霉菌的混合菌。且相关报道大都在实验室进行, 改善小麦生长、产量及品质等生产水平的应用研究报道较少。PSB可促进小麦生长, 但究竟是何种成分起作用, 对小麦哪些生理性状有促进作用, 目前尚不明确。我国对PSB的研究有较长历史, 目前得到开发应用的主要有球形红细菌、沼泽红假单胞菌等几个种属。为了挖掘可用于小麦农业生产的PSB资源, 拓展PSB的应用范围, 丰富和完善PSB促进植物生长的机制和原理, 本文以应用较为广泛的球形红细菌 (Rhodobacter sphaeroides) 、沼泽红假单胞菌 (Rhodopseudomonaspalustris) 、红螺菌 (Rhodospirillium rubrum) 及沼泽红假单胞菌培养液的不同组分为材料, 大田小区和盆栽实验条件下对小麦施用, 测定小麦相关生理和光合指标, 研究其对小麦生长、产量及光合功能的影响, 为PSB的进一步应用奠定基础。
1 材料和方法
1.1 红螺菌及混合菌肥
3株PSB模式菌株:球形红细菌 (Rhodobacter sphaeroides) ATCC17023、沼泽红假单胞菌 (Rhodopseudomonas palustris) ATCC17001和红螺菌 (Rhodospirillium rubrum) ATCC11170和混合菌肥由山西大学光合细菌研究室提供。
培养基采用稍加改动的Ormerod培养基, 厌氧光照培养:E=2000 lx, Q=30°C, 培养7 d后, 菌液OD600大于1.5, 浓度可达109个/m L以上。
1.2 细菌培养和白砂糖培养基的制备
液体培养物经6 000 r/min离心10 min收集上清和菌体细胞;菌体洗涤后加入原体积无菌水, 于600 nm处测定菌液OD值, 血小板计数器统计细菌数。离心去掉菌体后, 上清为含有代谢物质的无细胞培养液, 无菌水稀释50倍, 4°C保存。静息细胞的制备:收集到的菌体采用生理盐水洗涤2次, 间隔3 h, 4°C保存备用。
喷施方法和相应浓度参照文献进行, 混合菌液50倍稀释, 细菌浓度约为4×108个/m L, 采用无菌水将静息细胞稀释至浓度为4×108个/m L;对照的空白培养基稀释50倍;喷施量均为150 m L/m2。
1.3 材料和实验方法
沼泽红假单胞菌液不同成分对不同生长时期小麦产量的影响采用盆栽小麦进行, 其余实验采用小区进行。盆栽试验播种时间为10月30日, 基肥在播种前施入, 每盆播种10粒, 出苗后定3株幼苗。5个实验处理分别为沼泽红假单胞菌静息细胞、无细胞培养液、沼泽红假单胞菌液、培养基稀释液以及不施用空白对照;静息细胞实
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