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山核桃油对四氯化碳诱导大鼠急性肝损伤的影响 山核桃是一种天然、无害的绿色植物。根据中国传统医学，山核桃具有润补、活血、润粘液、驱寒的功效。现代医学研究还表明，山核桃中的脂肪酸、养分和维生素e等养分具有氧化作用。此外，长期食用可以增加体内超氧化物诱导酶（sod）、过氧化氢酶（cat）和谷胱甘氨酸（gsh）的含量，从而降低体内的氧化水平。四氯化碳是一种直接肝脏毒性物质，广泛污染水源和空气。本实验采用四氯化碳测定大鼠急性肝损伤模型。 1 材料和方法 1.1 试剂与仪器 Wistar大鼠由延边大学实验动物中心提供.四氯化碳及乙醚均为中国上海试剂总厂产品;HE染液、SOD、CAT、丙二醛 (MDA) 测定试剂盒、考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒、多聚甲醛均为上海华美生物公司产品.仪器:酶联免疫检测仪 (RT2100C, 美国) 、eclipse50i显微镜及摄像机 (Nikon) 、Microfuge22R台式冷冻离心机 (Beckman Coulter) 、自动生物化学分析仪 (Beckman Coulter) 、真彩色病理显微图像分析系统 (CH30RF200) .山核桃油由延边大学药学院郑昌吉副教授提供. 1.2 试验组和对照组 取Wistar大鼠30只, 清洁级, 雄性, 体质量为 (200±30) g.随机分成5个, 即正常对照组、模型对照组、小剂量山核桃油组 (300mg/kg山核桃油+四氯化碳) 、大剂量山核桃油组 (600mg/kg山核桃油+四氯化碳) 和阳性对照 (水飞蓟素+四氯化碳组) , 每组各为6只.灌胃7d, 每日1次, 0.5mL/次.最后1d时, 正常对照组腹腔注射给予生理盐水, 其余各组腹腔注射给予四氯化碳1dmL/kg.24h后乙醚麻醉摘眼球取血, 取肝脏. 1.3 相关指标的测定 大鼠摘眼球取血2 mL, 37℃温浴10min, 3 000r/min离心10min, 取上清液500μL, 利用全自动生物化学分析仪测定丙氨酸氨基转移酶 (ALT) 及天冬氨酸氨基酸转移酶 (AST) 水平. 1.4 胞浆和：mda含量测定 用4℃生理盐水冲洗肝脏表面, 称取0.5g肝组织, 加入9mL生理盐水, 剪碎, 研磨, 制备5% (质量分数) 的肝匀浆, 以2 000r/min离心10min, 取上清液1mL, 4℃10 000r/min离心15min, 上清液为胞浆, 待测.考马斯亮蓝显色, 测定吸光度检测蛋白质含量.按照SOD, CAT, MDA试剂盒操作说明, 检测胞浆和线粒体中的SOD, CAT活性和MDA含量. 1.5 实验数据处理 采用SPSS 11.0统计软件进行数据分析.所得实验数据以均数±标准偏差 (ue0af±SD) 表示, 多组间比较进行单因素方差分析, 其任意两组间比较采用LSD法. 2 结果 2.1 对alt,ast的影响 见表1.与正常对照组比较, 模型对照组血清中ALT, AST水平显著增高 (P0.05) .与模型对照组比较, 小、大剂量山核桃油组ALT, AST明显降低 (P0.05) . 2.2 各组大鼠山核桃油胞浆中cat活性、mda活性的比较 见表2.与正常对照组比较, 模型对照组大鼠肝细胞胞浆和线粒体中的SOD, CAT活性降低 (P0.05) , MDA含量升高 (P0.05) .与模型对照组比较, 小、大剂量山核桃油组胞浆中SOD, CAT活性显著增高 (P0.05) , MDA含量显著降低 (P0.05) . 3 山核桃油对四氯化碳的影响 四氯化碳是直接肝毒素性物质, 大多见于职业性接触、误服等, 四氯化碳目前常被应用于建立动物肝损伤模型.四氯化碳导致肝损伤的详细机制尚不明确, 目前认为与四氯化碳自身和其自由基代谢产物有关.四氯化碳的直接肝毒素导致肝细胞膜完整性破坏, 可能由于细胞膜结构主要成分不饱和脂肪酸的过氧化, 膜蛋白变性所致;另外四氯化碳代谢产生的自由基或活性氧可激发过氧化和其他破坏效应.四氯化碳长期作用后可导致胶原纤维沉积, 可能是四氯化碳诱发肝纤维化的机制之一.SOD和CAT是机体内清除自由基的特异酶类, 它们活性的降低表明机体内自由基产生的增加.正常机体存在着一套健全的抗氧化系统, 其中及CAT起着重要的作用.它们在体内具有清除有害过氧化物、减轻和阻断脂质过氧化链锁反应等作用, 从而保护生物膜功能完整的重要作用.当自由基增加到一定程度时, 清除自由基的特异酶类如SOD, CAT等的活性就降低, 机体清除自由基的能力下降, 造成自由基在体内堆积, 脂质过氧化产物如MDA等增加, 最终导致机体的脂质过氧化而致损伤.MDA是目前公认能反映氧自由基产生及引发的脂质过氧化反应的间接指标, 它的含量变化不但可反映氧自由基生成的量及氧化反应强烈程度, 还可反映对组织损伤的