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苍术效力研究
白术是科植物的鞭毛。(c.)或北科百慕大草(c.)koidz。干燥的根系,温暖、痛苦、脾胃和肝。具有润水健脾、驱风解寒的功效。所附的《中国药典》含有生白术和炒白术的饮料品种。苍术为生熟异用的中药, 传统理论认为麸炒苍术长于健脾, 多用于脾虚导致的疾病的治疗。本课题是国家中医药管理局行业专项项目“十九种生熟异用中药饮片临床规范使用研究”的子课题, 主要研究苍术饮片的生熟异用机理和临床规范使用。本实验重点研究苍术麸炒前后健脾作用的差异, 通过比较生熟苍术对大黄致脾虚大鼠血清中血清淀粉酶、D-木糖含量、血清胃泌素和血管活性肠肽含量的影响, 明确苍术麸炒前后健脾作用的差异, 为解释苍术的麸炒机理, 并为苍术生熟饮片在临床上的合理应用提供依据。
1 材料表面
1.1 动物
1.2 使用:、白术水生煎剂浓度0
1.3 试剂
1.4 仪器
2 方法
2.1 动物实验组
2.2 模型生产苦寒腹泻法
2.3 给药方法
2.4 血清gas-内中小型血清学
脾虚模型组:造模15 d后目内眦取血1.5ml/只, 分别装在3个EP管中, 每管0.5ml, 一管室温自然凝固10~20min, 3 000r/min, 离心20min, 收集上清, 待测血清VIP。二管转速≤2 000r/min, 离心4min, 收集血清, 置-20℃冰箱保存, 待测血清GAS。三管静置20min, 3 500r/min, 离心10min, 待测血清AMS。
其它3组:末次给药后内眦取血1.5ml/只, 分别装在3个EP管中, 每管0.5ml, 一管室温自然凝固10~20min, 3 000r/min, 离心20min, 收集上清, 待测血清VIP。二管转速≤2 000r/min, 离心4min, 收集血清, 置-20℃冰箱保存, 待测血清GAS。三管静置20min, 3 500r/min, 离心10min, 待测血清AMS。然后灌服3%D-木糖试剂3.0ml/200g, 1h后目内眦取血, 3500r/min离心10min制备血清, 待测血清D-木糖。
2.5 观察项目和方法
2.5.1 一般情况下的观察
2.5.2 血清d-木糖、gas和点多通道管吸营养成分的检测
血清淀粉酶的测定:底物缓冲液在37℃水浴箱中水浴5 min。取两只试管, I管为测定管, Ⅱ管为空白管, 一管加0.5ml底物缓冲液和血清0.0 1ml, 摇匀, 二管加0.5ml底物缓冲液, 两管均放入37℃水浴, 准确反应7.5min后, 一管加0.5ml碘应用液和3.0ml蒸馏水, 二管加0.5ml碘应用液和3.01ml蒸馏水, 混匀, 660nm波长, 1cm光径, 蒸馏水调零, 测各管吸光度, 并按下式进行计算。AMSu/dl= (空白管吸光度-测定管吸光度) /空白管吸光度×0.4×0.5/10×30 min/7.5 min×100/0.01。
血清D-木糖含量的测定:用3%D-木糖溶液给大鼠灌胃, 按0.07~0.21g/d的量给予大鼠3%D-木糖溶液灌服, 1h后目内眦取血, 离心制备血清, 按D-木糖试剂盒说明书所述, 采用比色分析法测定各组大鼠血清D-木糖含量。
GAS和VIP的含量测定:大鼠末次给药后禁食12h, 目内眦取血1ml, 分别置于两支试管中, Ⅰ管0.5 ml, 离心4min, 转数≤2 000 r/min, 分离血清, 置-20℃冰箱保存, 待测血清GAS;Ⅱ管0.5 ml, 室温血液自然凝固10~20 min, 离心20 min左右 (2 000~3 000 r/min) 。仔细收集上清, 保存过程中如出现沉淀, 应再次离心。操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。
3 结果
3.1 一般情况下的观察
3.2 生品和制品对血清淀粉酶、d-木糖和血清胃泌素含量的影响
从表1中可以看出, 与模型组比较, 血清淀粉酶、D-木糖和血清胃泌素的含量均高于模型组, 血管活性肠肽的含量低于生品组, 且P0.05, 有显著性差异, 说明苍术生品和炮制品均能提高血清淀粉酶、D-木糖和血清胃泌素的含量, 降低血管活性肠肽的含量, 显示出一定的健脾作用;制品和生品比较, 在改善脾虚大鼠血清淀粉酶和D-木糖含量两项上, 制品明显优于生品, 有显著性差异;在改善脾虚大鼠血清胃泌素和血管活性肠肽含量上, 二者无显著性差异。
4 对大鼠血清淀粉酶活性的影响
目前造脾虚模型的方法各异, 主要有苦寒泻下法, 饮食失节法, 疲倦过度法, 利血平法和情志失和法等。大黄苦寒泻下法是最早问世且目前采用较多的造模方法。根据李时珍对大黄“其性苦寒, 能伤元气耗阴血”及李果大忌苦寒之药损伤脾胃的论述, 利用大黄耗伤元气, 损伤脾胃以致虚。据研究报道, 用大黄造模实验动物出现纳差、便溏、形
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