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野生欧李实生类型和嫁接类型钙素含量的研究 奥罗斯赫维尼是中国独特的野生果树资源。这种水果富含糖、蛋白质和维生素c。同时，它还含有大量孩子需要的氨基酸，尤其是水果中的钙和铁含量高，深受消费者欢迎。因此,研究揭示野生欧李果实中钙素营养及果实采后钙素营养生理变化,对其开发利用具有重要意义。研究表明:果实缺钙或钙与其他元素之间失衡是果实生理病害发生的主要原因,而欧李果实生理病害少可能与果实钙含量高有关,因为果实组织中如果维持较高的钙水平,可以保持果实硬度,降低呼吸速率,抑制乙烯的产生,延长果实储藏寿命,提高果实的商品价值。笔者研究发现:欧李果实钙累积主要发生在幼果细胞分裂期和果实细胞膨大期2个阶段,细胞分裂期以果胶钙形态积累为主,而细胞膨大期以水溶性钙形态积累为主,尤其是与树体内水溶性钙和果胶钙含量变化密切相关。龚云池等研究比较了鸭梨Pyrus bertschneideri和雪花梨Pyrus bretschneideri,陈丽漩等研究了荔枝Litchi chinensis果实储藏过程中的不同形态钙含量变化规律,欧李成熟果实中不同形态钙的含量组成及其采后钙素生理变化规律尚未见报道。为此,以实生和嫁接类型欧李为试材,通过研究欧李采收期和储藏期果实中不同形态钙质量分数组成及变化,探明欧李果实钙素形成及转化规律,以期揭示欧李钙素营养吸收特性,为开发利用野生欧李资源,提高人类钙素营养及健康水平提供基础理论资料。 1 材料和方法 1.1 实生材料及嫁接类型 欧李实验材料分为2种类型。一是实生类型:包括小叶小果型,叶片淡绿,果实质量5 g左右;大叶大果型,叶片浓绿,果实质量10 g左右,树龄为10年生。实生材料均来源于燕山山脉野生欧李群体,并定植于河北科技师范学院园艺科技学院试验站野生欧李资源圃内。圃地土壤肥力中等,树体自然生长,丛生,株高为70~80 cm。二是嫁接类型:包括高位嫁接型(接口距地面80 cm)和低位嫁接型(接口距地面30 cm)。采用实生类型中的大叶大果型接穗嫁接在毛桃Prunus persica砧木上,树龄为8年生。2种类型欧李均在3月上旬芽体萌动,4月中旬开花,8月上中旬果实成熟。 1.2 样品的提取与测定 在果实生理成熟期,分别选取2种类型中包括小叶小果型、大叶大果型、高位嫁接型和低位嫁接型的植株各3株,作为各时期钙组分提取的样本株,单株3次重复;在每株不同方位的结果基生枝中上部位采集不同类型成熟度一致,大小均匀,无机械损伤和无病虫害的果实样品各45个;果实采后放置在室温(25±1)℃条件下自然储藏,采后当日(8月13日)从每株采集的果实样品中随机选取15个果实清洗干净,匀浆处理后提取不同形态钙组分,并于1周(8月21日)和2周(8月29日)后分别提取测定1次,共提取测定钙3次。 不同形态钙的提取参照小西茂毅等的方法,并加以改进。精确称取经组织捣碎机匀浆后的欧李果实样品10.00 g,分别采用无离子水、1 mol·L-1氯化钠、20 g·kg-1乙酸、50 g·kg-1盐酸浸提剂逐级提取的方法,分别提取水溶性钙(活性钙)、氯化钠溶性钙(果胶钙)、醋酸溶性钙(磷酸钙)和盐酸溶性钙(草酸钙)。将浸提液样品转移至离心管中,25℃恒温水浴提取1 h,后用高速冷冻离心机离心10 min;吸取上清液转移至100 m L容量瓶中,加入相应提取液洗涤沉淀物,如此反复提取3~4次;之后用相应的浸提液定容,同时加入释放剂氯化锶溶液(质量浓度为1 g·L-1)排除干扰影响;剩余残渣中主要成分是硅酸钙(简称为剩余钙),采用HNO3-HCl O4(5∶1)混合酸消化样品待测。 样品中不同形态钙质量分数采用3200型原子吸收分光光度计(上海分析仪器厂)测定,测定波长为422.7nm,钙质量分数(mg·kg-1)=待测液测得质量浓度(mg·L-1)×定容体积(V)/样品质量(W)。数据处理采用SPSS统计分析软件。 2 结果与分析 2.1 不同果型果实中的钙的提取 由表1可见:欧李实生类型果实中不同形态钙质量分数因果型大小存在差异,小果型果实中水溶钙、磷酸钙和草酸钙的质量分数极显著高于大果型果实中相应的钙形态组成(P0.01),而大果型果实中的果胶钙质量分数极显著高于小果型果实中果胶钙的质量分数(P0.01);大小果型果实中的活性钙组分(水溶钙和果胶钙)分别占大小果型钙组分总量的69.11%和63.79%;大小果型果实中不同形态钙提取率分别占总钙量的98.43%和98.76%。研究表明:欧李小果型果实中钙质量分数显著高于大果型果实中的钙质量分数(P0.05),大小果型不同形态钙质量分数大小为水溶钙果胶钙磷酸钙草酸钙剩余钙。 2.2 嫁接类型果实中各指标质量分数的变化 由表1可见:欧李嫁接类型果实中不同形态钙质量分数因接穗嫁接高低存在差异。低位嫁接类型果