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浮液对曼氏迭宫绦虫卵的浮集效果 曼重复宫虫，又称蒙面短虫，是一种常见的猫和人类寄生虫。它属于半体生动物。它通常寄生在猫的肠。大量维生素b来自主体内，导致贫困感染，偶尔出现神经症状。这棵树很大。如果严重感染，它们会变成一个团，堵塞肠道，并穿过肠道。裂头蚴的危害远大于成虫,给人类的健康及宠物的养殖带来相当大的危害,本病是医学工作者重点防治的寄生虫病之一。以往对本病的诊断主要依赖于反复水洗沉淀法检查虫卵,此方法虽然简便易行,准确可靠,检出率高,但因镜检时杂质多且操作中耗时较长,给临床实践带来不便。漂浮法是利用比重比虫卵大的溶液,将粪便中比重小的虫卵浮集于液体表面。这种方法主要应用饱和盐水来漂浮比重较小的线虫卵、球虫卵囊、绦虫卵。但有时也采用比重更大的饱和溶液浮集猪的后圆线虫卵。现今尚未有关于漂浮液浮集假叶目绦虫的报道。本文旨在比较4种漂浮液对猫粪便中曼氏迭宫绦虫卵的浮集效果,并与沉淀法相比较,以探索一种更加快速、准确的吸虫卵浮集方法。 1 材料和方法 1.1 材料表面 1.1.1 阳性大便 人工喂养猫1只,发现排出绦虫节片,收集经过压片,染色镜检确认是曼氏迭宫绦虫节片,连续数天收集粪便,充分混匀后,置4 ℃冰箱中保存。 1.1.2 浮游液的物理和化学性质表1 1.1.3 漂浮试剂法 向250 mL锥形瓶中加入150 mL,60 ℃蒸馏水,加入漂浮试剂的晶体,振荡,使其溶解,直至不再溶解并有晶体析出。按此方法配制4种不同的漂浮液。 1.2 方法 1.2.1 -调静剂沉淀液制备 取5 g猫粪便,用蒸馏水稀释,经4层纱布过滤,滤液1 000 r/min离心10 min,弃去上清液,在沉淀物上加漂浮液,搅匀。再以2 000 r/min离心10 min,用直径为1 cm的铁丝环连续取30次浮膜中虫卵,并定容至5 mL,用吸管吸取0.05 mL,分别滴于数张载玻片上镜检,重复10次,且对浮集效果进行统计分析,每种漂浮液按以上方法重复4批。 1.2.2 沉渣沉渣检查 将上述溶液和沉淀物倒入沉淀器中,加水至满,以不溢出为度,静置30 min→将沉淀器中溶液倒掉1/4→再加满水静置30 min→将沉淀器中溶液倒掉1/3→再加满水静置30 min→将沉淀器中溶液倒掉1/2→再加满水静置30 min→倒掉上清液,保留沉渣,静置10 min～20 min,待虫卵沉积到杯的最低处,用带橡皮的滴管吸取杯内最底部的沉渣,薄薄地涂在载玻片上,用低倍显微镜检查虫卵,统计阳性检出率。 2 结果 2.14 漂浮液的浮集效果 4种漂浮液和沉淀法检出虫卵的结果见表2和表3。 硫酸镁的阳性粪便检出率为62.5%,硫代硫酸钠阳性粪便检出率为100%,硫酸锌的阳性粪便检出率为97.5%,氯化钠的阳性粪便检出率为35%,沉淀法的阳性粪便检出率为100%。所以我们以沉淀法为1计算各漂浮液的浮集效果。 硫酸镁:60.2/595.9×100%=10.1% 硫代硫酸钠:587.9/595.9×100%=98.7% 硫酸锌:179.8/595.9×100%=30.2% 氯化钠:19.675/595.9×100%=3% 2.2 锌、饱和盐水沉淀法与沉淀法的区别 结果见表4和表5。 表明硫酸镁、硫酸锌、饱和盐水与沉淀法有显著的差异,而硫代硫酸钠和沉淀法之间差异不显著,因此可以用硫代硫酸钠代替沉淀法。 3 浮集法的比较与选择 3.1 本实验主要应用4种漂浮法和沉淀法研究对曼氏迭宫绦虫卵的浮集效果,结果表明硫代硫酸钠漂浮法和沉淀法的样品阳性检出率达到100%,且硫代硫酸钠漂浮液中虫卵未见变形,清晰易辨;硫酸锌阳性检出率也达97.5%,但硫酸锌漂浮液的杂质较多,且虫卵易变。 3.2 绦虫卵的一般检查方法主要是用沉淀法。判断粪检方法优劣标准,主要看被检材料中检出虫卵数量及阳性检出率,根据以上数据分析,沉淀法无疑是最好的,但因沉淀法检测虫卵耗时长,给实际操作带来不便,经F检验和多重比较法中的对照比较法分析证明(FF0.01(4.15),∣d2∣2.73)硫代硫酸钠检出的虫卵数和阳性检出率是4种漂浮液中最高的,且与沉淀法检出结果差异不显著。表明用硫代硫酸钠漂浮法代替沉淀法分离曼氏迭宫绦虫卵是一种理想的方法。 3.3 孙宝贵等的12种漂浮液对虫卵及球虫卵囊浮集效果的比较试验中也选用了硫代硫酸钠,硫酸镁,硫酸锌,氯化钠这4种漂浮液检查鸡粪中球虫卵囊,结果是以70%硫代硫酸钠(比重为1.22)浮集球虫效果最佳,硫酸镁效果次之,氯化钠效果最差。在本试验中,以硫代硫酸钠浮集效果最好,其次为硫酸锌,饱和盐水的效果最差,且检出率很低,待检时间稍长就有结晶现象出现。与孙宝贵等(1998)的结果基本一致。 3.4 硫代硫酸钠漂浮液比重较大,其显微镜下视野中杂质较多,建议在过滤时加用尼龙筛,以减少杂质含量,可应用适量清洁剂,