免疫定性试验结果判读周育洋.pptx

免疫定性试验结果判读周育洋; 本课件免疫定性试验仅指临床通常使用的基于抗原-抗体反应原理的试验 抗原-抗体反应的特点： *特异性;抗原抗体反应类型;影响抗原-抗体反应的因素;原材料-决定性;影响因素---原材料;内源性干扰因素;类风湿因子（RF）干扰;类风湿因子干扰的排除;补体干扰;补体干扰的排除;自身抗体干扰;影响因素--反应模式;影响因素--信号放大系统;外源性干扰因素;标本溶血;标本被细菌污染;标本贮存时间过长;标本凝固不全;冰冻保存标本避免反复冻融;几个统计学概念;正态分布(Gaussian distribution);正态分布的基本统计学含义可用均数 （X）、标准差（s）和概率来说明。;重复性条件; 诊断敏感性（sensitivity of diagnosis）是指将实际患病者正确地判断为阳性（真 阳性）的百分率。 阳性预测值（positive predictive value,;诊断特异性（specificity of diagnosis） 是指将实际无病者正确地判断为阴性（真阴性）的百分率。 阴性预示值(negative predictive value,;诊断效率;临床免疫检测类型;定量分析：;定性分析;定性免疫检验方法较多，主要有沉淀试验、凝集试验、荧光免疫试验、酶免疫试验和金标法。 其中金标法虽然是灵敏、特异、快速、简便、准确率较高的体外诊断方法。但是仍存在不足之处，易出现假阳性和假阴性，尤其是国产的金标试剂，所以建议采用ELISA法。;定性免疫检测的用途;诊断试验 用来评价具有可疑给予特征（如一种感染的特殊类型）的人。 敏感性和特异性应该处于相对平衡状态。如果此特征对治疗或预后考虑很重要，那么敏感性要尽可能的高； 而且后续已有准确的确证试验，可以不需要高的特异性。 感染性疾病的大多数临床试验是用于诊断。;确证试验;定性免疫检验质量控制;已知的弱阳性质控:每次测定都应至少带一个已知的弱阳性对照，从而有助于判断临床标本的检测结果是否有效。 阴性质控:必需 每次测定都必须设空白对照、阴性对照、阳性对照和弱阳性对照。;CUT OFF 值的选择; （3）当不合适的治疗可能导致严重后果，需要高预测值。 （4）当疾病严重但是可治疗，并且假阴性或假阳性结果同样严重（如引起脑膜炎细菌抗原的分析）需要高符合率。 在确定这些因素的合适平衡点时，厂商或其它检测的研发者应该用来自三种人群的样本评估检测的性能：感染疾病的人，没有疾病的健康人和非讨论疾病患者的病人。厂商应该标明推荐的cut-off值是怎么定义的以及在什么样的人群应用。 理想状态，实验室应该在自己的服务人群中确定区间和cut-off值。;纯定性试验的质控要求; 根据显色或发光直接判定阴阳性的技术，如金标试纸，美国CDC在“CLIA’88豁免的HIV抗体快速检测的质量保证指南2007年版 ”中要求：除检测装置的内对照外，每检测日或分析批，应使用弱阳性和阴性外对照作为质控。无判定标准，一般理解为阴、阳性质控的检测结果分别为阴性和阳性即表明在控，相反则为失控。 根据滴度或稀释度判定阴阳性的技术，如凝集试验，使用弱阳性和阴性外对照质控，阳性质控结果在均值上下一个滴度或稀释度以及阴性质控结果为阴性即为在控，否则视为失控。;失控原因分析;失控处理;判读实例（1）;TP;现实意义;实验室诊断（病原体1）;实验室诊断（病原体2）;实验室诊断（病原体3）;实验室诊断（血清学）;实验室诊断（NTrAT）; NTrAT：抗原为心磷脂、胆固醇、卵磷脂按适当比例配制 的乙醇溶液;实验室诊断（TrAT）;TrAT：抗原为梅毒螺旋体Nichols株特异抗原 。 TPHA：Nichols株超声或SDS提取抗原，包被甲醛、鞣酸处理的SRBC,遇血清中抗体血凝。血清用Reiter株，牛、羊RBC，正常兔血清和兔睾丸提取物吸收。 TPPA：染成红色明胶颗粒包被抗原。试剂盒中未配吸收剂。 ELISA：纯化或重组T.pallidum抗原（15000 、17000、42000、47000）包被，间接法或双抗原夹心法。未配吸收剂。;（4）FTA-ABS: Nichols株制片，丙酮固定，待测血清用含 Reiter株吸收剂吸收。FITC-抗人IgG（ IgM）示踪。;梅毒血清学试验敏感性与特异性;;梅毒实验室检查难点;螺旋体的分类及致病性螺旋体种类;梅毒螺旋体结构;（3）胞质微丝：有外鞘及内核心，含大量蛋白质;（6）基因组（Nichols株1.131×106bp， 1998年）;血清学试验假阳性原因（一）;血清学试验假阳性原因（二）;;梅毒实验室诊断注意事项;吸收处理;梅毒的实验室诊断;梅毒的实验室诊断（新图解）;判读实例（2）; 对丙肝的认识时间不长（1989年），世界各地感染率相差很大，英国5/万，开罗却