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- 2023-09-05 发布于广东
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肌源性干细胞体外筛选与增殖
0 肌源性干细胞
肌肉起源性干预是从骨骨骼肌腱分离的多能干燥物,具有多分枝潜力和自我更新能力。在没有诱导因素的情况下,可将其定向分为肌细胞和肌组织。在特定的诱导条件下,它也可以传播到具有特定形状特征和功能的其他成体细胞类型。
现有关于肌源性干细胞的研究多在幼龄小鼠中进行,因幼龄动物生长发育迅速,肌源性干细胞含量相对较高,分离培养相对容易;针对大鼠和人类尤其是成熟个体的研究较少,而疾病的治疗多是针对成体进行。
实验在健康纯系成年SD大鼠中进行,利用密度梯度离心及贴壁分离法对肌源性干细胞进行分离纯化,探讨建立稳定、高效地分离和培养肌源性干细胞的方法,以得到纯度较高的肌源性干细胞。
1 细胞培养和生长
设计:细胞学体外观察。
时间及地点:于2004-05/2006-06在解放军第三军医大学完成。
材料:4~6周龄雌性SD大鼠16只,体质量200~250 g,由解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所实验动物中心提供,动物质量合格证号:SCXK(渝实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。
主要试剂:
实验方法:
培养基的配制:生长培养基为含体积分数20%胎牛血清、体积分数10%马血清、0.5%鸡胚提取液、1%青/链霉素的DMEM。分化培养基为含体积分数2%胎牛血清、1%青/链霉素的DMEM。
骨骼肌细胞的消化分离:大鼠以1%戊巴比妥钠腹腔
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