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木本观赏植物组织培养研究进展 植物组织培养是指对植物器官（根、茎、叶、花、果实、种子等）进行人工制备的培养基，并给予适当的培养条件，以完成完整植物的过程。广义的组织培养包括器官培养、组织培养、胚胎培养、细胞培养、原生质体培养、花药培养等;狭义的组织培养是指植物离体组织再生快繁技术即微型繁殖 (Micro-propagation) 或试管繁殖技术。 1 种针叶树种的诱导染色体胚发生和再生技术 植物组织培养的理论依据是植物细胞的全能性。1902年, 德国植物学家Gottlieb Haberlandt提出了离体细胞培养的概念, 并首次将分离的完全分化的细胞进行了组织培养试验。之后Skoog和Miller提出了激素控制器官形成的概念, 使植物组织培养再生体系建立的研究达到了一个新水平。目前植物组织培养的应用和研究主要涉及到花卉、药用植物、农林蔬菜等方面。木本植物由于普遍存在生长周期较长, 体细胞中含有较多的多酚类物质易导致植物材料褐化, 短期经济效益较低, 科研难度较大等现象, 其组织培养研究相对较少。但经过长期探索, 木本植物的组织培养技术也取得了一定成就。1934年法国学者Gautheret进行的裸子植物组织培养研究, 被认为是木本植物组织培养研究的开始。 目前, 杨柳科、蔷薇科、木犀科、桑科、松科、杉科、鼠李科、大戟科、紫茉莉科、棕榈科中的约近100种木本观赏植物能够实现组培快繁, 并有10余种已进行大面积推广, 如杉木 (Cunninghamia lanceolata) 、柳叶桉 (Eucalyptus saligna) 等。另外, 约有20种针叶树的外植体诱导体细胞胚成功, 如红松 (Pinus koraiensis) 、油松 (P.tabulaeformis) 及云南松 (P.yunnanesis) 等, 在20余种阔叶树种的组织培养中观察到体细胞胚胎发生或获得再生植株, 如花楸树 (Sorbus pohuashanensis) 已在实验室条件下完成了从未成熟和成熟合子胚中诱导出体细胞胚, 并再生出体胚苗;柑橘 (Citrus reticulata) 胚性细胞系的建立和体细胞胚发生技术已较成熟。在胚乳培养方面, 已能够诱导出愈伤组织、胚状体或已经能够分化出根, 但只有10多种木本观赏植物获得了胚乳植株, 如中华猕猴桃 (Actinidia chinensis) 、罗田甜柿 (Diospyros kaki‘Luotian-tianshi’) 等。能够成功进行原生质体分离培养的树种达40多种, 其中桑树 (Morus alba) 、苹果 (Malus pumlia) 、毛白杨 (Populus tomentosa) 、白榆 (Ulmus pumila) 、二球悬铃木 (Platanus hispanica) 等10多种树木已通过这种途径建立了再生体系。 应用组织培养技术建立植物再生体系, 能够极大地促进木本观赏植物品种改良和分子育种的发展。选择合适的再生途径对建立高效的木本观赏植物再生体系十分重要, 根据再生过程经历的途径不同, 木本观赏植物的离体再生途径大致可分为顶芽或腋芽途径、不定芽途径、胚状体途径、原球茎途径。顶芽或腋芽途径是木本植物组培快繁应用最广泛的方法, 珙桐 (Davidia involucrata) 、银杏 (Ginkgo biloba) 、胡桃 (Juglans regia) 、云南山茶 (Camellia reticulata) 、桑树等很多木本观赏植物都成功使用了该方法;在不定芽途径中常用的外植体有茎尖、茎段 (鳞茎、块茎、匍匐茎) 、花芽、叶、叶柄、根、花茎、萼片、花瓣、花托等, 在木本观赏植物中, 报道使用这种方式繁殖成功的也较多, 如翅果油树 (Elaeagnus mollis) 、杜仲 (Eucommia ulmoides) 等;使用胚状体途径试验成功过的有苏铁 (Cycas revoluta) 等;目前, 原球茎途径正处于试验研究阶段, 尚未见使用这种方式成功快繁木本植物的报道。 在木本观赏植物再生体系建立过程中, 使用顶芽或腋芽途径的多数经过3个阶段即可完成植株再生, 依次为愈伤组织的启动、增殖与生根阶段, 如广玉兰 (Magnolia grandiflora) 、麻竹 (Dendrocalamus latiflorus) 等;有些需经过4个阶段, 即启动、增殖、壮苗、生根, 如变叶木 (Codiaeum variegatum) 、合欢 (Albizia julibrissin) 等;少数将启动培养和增殖培养合二为一经过2个阶段即可完成, 如腊梅 (Chimonanthus praecox) 等。使用不定芽途径或胚状体途径的一般经过4个阶段培养完成植株再生, 如华北落叶松 (Larix pr