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烤烟漂浮育苗技术生产菌根化烟苗和壮苗的研究 集体枝细菌（以下简称pmi）可以形成许多种子、植物、蕨类植物和苔藓植物。大量的试验表明,不同的AM真菌与宿主植物的亲和性不同,感染率也不一样。基质的营养条件能显著影响AM真菌浸染植物根系,一般情况下,低养分条件时植物根系AM真菌浸染率较高,菌根效应比较明显; 在养分丰富的环境中,AM真菌的浸染率降低,菌根效应减小。AM真菌感染宿主植物之后,改变根际微生物生态系统,抑制部分病原微生物的生长繁殖; 分泌的生长活性物质,如生长素、赤霉素、玉米素等,调控生长发育; 外延菌丝可扩大吸收养分和水分的空间; 菌丝代谢产生的有机酸如琥珀酸、苹果酸等具有活化土壤养分的作用。优良的AM真菌与寄主植物形成共生体之后,能够改善宿主植物的氮、磷、钾、钙、镁、铜、锌、锰等营养,促进生长发育,增强植物抗旱、抗病等能力,并提高其移栽成活率,在现代农业生产中具有一定的应用前景。 培育壮苗是烤烟生产的关键环节之一。接种AM真菌之后,烟苗叶绿素含量、硝酸还原酶活性、SOD活性、几丁质酶活性均显著高于不接种的烟苗。通过与实际生产中培育的烟苗相比较后发现,接种AM真菌的烟苗的生物量,氮、磷、钾和叶绿素含量等均达到健壮烟苗的水平。目前,我国有80%以上的烟苗采用集中式漂浮育苗技术培育,烟草漂浮育苗是将种子直播于基质中,再把装满基质的育苗浮盘漂浮于营养液上培育烟苗的一种集约化育苗技术,烤烟集中式漂浮育苗为菌根技术的应用提供了可能性。但是,烤烟漂浮育苗所采用的营养液养分浓度高,施肥量大,废弃营养液产生的环境污染严重; 此外,烟苗也容易徒长,木质化程度低,而剪叶控制徒长又容易造成机械伤害和感病。虽然烤烟菌根化育苗培育的烟苗养分利用率高、苗壮、抗逆能力强,但烤烟漂浮育苗的基质处于水分饱和状态,养分含量高,接种AM真菌的侵染率低,不利于菌根苗的形成,也难于发挥菌根效应。所以,在烤烟漂浮育苗条件下,创造适合的养分环境,提高AM真菌的侵染率是生产菌根化烟苗,发挥菌根效应,减少育苗用肥和培育壮苗的关键。为此,本试验设置不同施肥量条件下接种AM真菌,研究了它们对烟苗的侵染、生长和营养状况的影响,探索在烤烟漂浮育苗技术的基础上,生产菌根化烟苗和培育壮苗的可能性。 1 材料和方法 1.1 试验材料 1.1.1 ames菌种的制备 根内球囊霉(Glomus intraradicesSmith and Schenck,BEG Number 193,简称BEG193)和幼套球囊霉(Glomuse etunicatumBecker and Gerdemann,BEG Number 168,简称BEG168)各一株,由中国农业大学资源环境学院植物营养实验室提供。在河沙∶中性紫色土=3∶1的培养基质中,混合种植白三叶草和玉米扩繁AM真菌,接种物是扩繁后含孢子、菌丝、三叶草和玉米侵染根段的根际土。上述供试菌株是从多株AM真菌中,在前期试验研究的基础上筛选确定的,具有较好的促进烟苗生长的效果 1.1.2 烟台列 K326(Nicotiana tabacumL.),由贵州省烟草科学研究所提供。 1.1.3 地质情况 烟草漂浮育苗专用基质(草炭∶珍珠岩∶蛭石=3∶1∶1),内含有机质480 g/kg,有效氮156 mg/kg,速效磷13.2 mg/kg,速效钾10.6 mg/kg,pH 5.60。使用前蒸汽灭菌(30 min,121℃)。 1.1.4 苗圃肥料 烤烟育苗专用肥,含氮15%、磷10%、钾18%,由贵州省烟草公司遵义烟草分公司监制。 1.2 浮苗和漂浮苗处理 在播种期分别接种AM真菌BEG168和BEG193,不接种者为对照。其方法是先将基质灭菌(121℃,1h),装入烤烟漂浮育苗的专用浮盘(长×宽=38cm×20cm,即19穴×10穴,每盘共190穴)孔隙内,每孔隙5 g; 然后放入0.5 g接种物,对照则加入等量灭菌接种物,再用2 g左右的基质覆盖。在烤烟漂浮育苗过程中,分别采用常规施肥(NF)、1/2常规施肥(1/2NF)、1/4常规施肥(1/4NF)、1/4常规施肥+1次追肥(出苗后第40 d追肥,5 g/盘,1/4NF+DF)。常规施肥的方法是在播种期(10 g/盘)和间苗期(20 g/盘)将肥料溶解于水深8 cm、水面和育苗盘相等的盛有营养液的池中。每个处理种植烟苗32株。 每穴播种3粒烤烟种子,出苗后留1株健壮苗。在培养期间,育苗池水位维持在8±0.5 cm。培养期光照强度为14000～15000 Lx,光照时间13 h/d。昼夜温度20～31℃,湿度70%～80%。 1.3 am真菌初始感染率和磷酸酶活性测定 在出苗后55～60 d(7叶期),每处理取8株烟苗,将根剪成1.5 cm根段,混匀后取3个重复样,用0.01%酸性品红乳酸甘油染色