棕榈油脂肪粉包被蛋氨酸的瘤胃降解效果研究.docxVIP

棕榈油脂肪粉包被蛋氨酸的瘤胃降解效果研究 长期以来，人们认为肿瘤胃微生物能够合成反刍动物所需的全部氨基酸是必要的，所以它不需要补充饲料。研究表明, 即使瘤胃微生物蛋白质的合成达到最大程度, 进入小肠的氨基酸仍难以满足高产奶牛的需要, 从而影响奶牛的产奶性能和牛奶质量。因此, 必须增加小肠可吸收的蛋白质和氨基酸数量才能满足其营养需要。于是, 人们开始研究增加反刍动物日粮中氨基酸 (特别是保护性氨基酸) 的方法, 以提高反刍动物小肠中可吸收氨基酸 (特别是限制性氨基酸) 的数量。蛋氨酸作为反刍动物的一种限制性氨基酸, 对其保护方法一直以来都是研究热点之一。但目前的保护方法往往存在2方面的问题:1) 瘤胃稳定性不好, 氨基酸在瘤胃内大量被降解, 造成浪费。2) 虽然瘤胃稳定性好, 但存在过度保护的问题, 在真胃和小肠不能被充分降解和吸收。 这项试验用尼龙袋法和运动尼龙袋法分别测定不同比例棕榈油脂肪粉包被蛋氨酸在瘤胃的降解率和小肠的释放率。目的在于通过对比其降解规律探索出一种瘤胃稳定性好, 小肠吸收率高, 加工成本低的保护方法。这对于奶牛氨基酸营养理论体系的充实和完善是非常必要的, 同时也具有提高奶牛产奶量和奶质量, 降低生产成本和提高经济效益的实际意义。 1 材料和方法 1.1 包装材料 棕榈油脂肪粉 (脂肪酸组成见表1) , 其瘤胃降解率为0.68 %, 小肠吸收率为51.40 %。 1.2 保护性蛋氨酸i、保护性蛋氨酸iii,保护蛋氨酸iii,表达蛋白表达 向蛋氨酸中分别按30 %、40 %、50 %和60 %加入溶化后的棕榈油脂肪粉, 边加边搅拌, 在搅拌中迅速冷却, 得到粉末状保护性蛋氨酸I (RPMet-I) 、保护性蛋氨酸II (RPMet-II) 、保护性蛋氨酸III (RPMet-III) 和保护性蛋氨酸IV (RPMet-IV) 。 1.3.1 尼龙袋酒精袋法 试验选用400目的尼龙布, 裁成 (17 cm×13 cm) 长方形, 对折, 用双线缝合, 并用酒精灯将边烤焦, 以免脱丝, 制成长×宽为 (12 cm×8 cm) 的尼龙袋, 用油性笔标号。新袋用前放入瘤胃内72 h, 取出洗净, 然后低温烘干至恒质量, 备用。 1.3.2 尼龙袋2.5 选择孔径为400目的尼龙布, 裁成 (7 cm×6 cm) 的长方形, 对折, 然后用尼龙线或涤纶线缝双道, 制成 (6 cm×2.5 cm) 尼龙袋。袋边缘用酒精灯将边烤焦, 以免脱丝。处理方法同瘤胃尼龙袋。 1.4 试验动物和食物 1.4.1 试验动物 选择3头年龄约4岁, 体质量约450 kg的健康荷斯坦奶牛, 安装永久性瘤胃瘘管和十二指肠前端瘘管, 供试验使用。 1.4.2 试验日粮和营养水平 按每头奶牛每天采食量配制TMR全混合日粮, 试验日粮及营养水平见表2和表3。 1.5 测试方法 1.5.1 试验初样品的制备 试验时每个瘤胃尼龙袋装待测保护性蛋氨酸样品5 g, 每4袋 (分别装有不同的保护性蛋氨酸) 系在一根长50 cm半软的塑料管上, 一次放6根管, 共24个袋。于晨饲时放入瘤胃, 塑料管的另一端固定在瘤胃瘘管盖上。 取样时间:在瘤胃内放置2、6、12、24、36和48 h取出1个塑料管, 每种保护性蛋氨酸每个时间点4个重复, 取出后放入洗衣机内 (中速) 冲洗8 min, 中间换水1次。将尼龙袋从管上取下, 放入40 ℃烘箱内, 烘至恒质量 (约48 h) , 备测。 1.5.2 kcl-pcr法 将0.4 g保护性蛋氨酸样品装入十二指肠尼龙袋中, 热压封口机封口, 用人工真胃液 (250 mL 0.2 mol/L KCL与53 mL 0.2 mol/L HCL混合后, 用蒸馏水定容至1 000 mL) 在39 ℃处理3 h。投入十二指肠前端瘘管中, 从粪中收集, 放入洗衣机内 (中洗) 冲洗8 min, 中间换水1次。然后, 放入40 ℃烘箱内, 烘至恒质量, 备测。 1.5.3 样品中碘的提取 瘤胃和小肠处理后残渣中蛋氨酸含量采用吴维辉推荐的间接碘量法进行测定。称取约0.3 g (精确至0.000 1 g) 干燥样品于250 mL碘量瓶中, 加入100 mL水使之溶解, 加入2 g磷酸二氢钾、5 g磷酸氢二钾和2 g碘化钾, 充分摇匀溶解。准确加入50 mL 0.1 N碘溶液, 盖紧胶塞, 避光静置一段时间 (约10 min) 使蛋氨酸与碘充分反应。之后加入1 mL 0.5 %的淀粉指示剂, 用0.1 N硫代硫酸钠标准溶液 (用重铬酸钾标定) 滴定过量的碘。当反应液由兰色变为无色时反应到达终点, 同时作试剂空白试验。 计算公式: Met的含量=(V2?V1)×N×Cm×100%=(V2-V1)×Ν×Cm×100% 式中: V1—样品测定时消耗硫