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富血小板血浆应用于颗粒脂肪移植的研究进展 由于脂肪组织来源丰富、移植后质地外观接近自然、操作简便、对机体创伤小、成本相对其他人工填充材料低廉等优势，自体颗粒脂肪注射移植被整形美容外科医师广泛地应用于组织填充和重建[1- 2]。但移植脂肪的存活率不确定， 移植后组织的吸收率 20%～70%，且可能出现囊肿、钙化等并发症[3-5]，极大地限制了其应用。为此，整形外科医师已经作出了很多努力来完善和标准化脂肪移植的手术操作流 程，或者通过辅助治疗，如：添加胰岛素、生长因子（如： 碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子、胰岛素样生长因子、瘦素等）、富血小板血浆，或与干细胞（脂肪来源干细胞或基质血管成分[6]、骨髓间充质干细胞、脐血来源间充质干细胞）混合移植、基因治疗或细胞治疗等，促进脂肪移植物的血运重建、脂肪组织再生、减少纤维化等，从而提高移植脂肪组织最终存活率。其中，将富血小板血浆应用于颗粒脂肪移植、促进移植脂肪存活，成为研究热点之一。 富血小板血浆（Platelet-rich Plasma，PRP）是由全血离心得到的含有高浓度血小板的血浆，富含来源于血小板的多种生长因子和黏附分子。PRP 来源于自体组织、制备简便，相对于其他辅助治疗，如：人工合成或提取的生长因子、干细胞辅助脂肪移植等更安全、可行、经济。临床和实验研究已报 道 PRP 对骨组织修复、创面修复、肌肉关节运动损伤修复有效。近年来，有临床医师将PRP 应用于脂肪移植，虽然一些临床报道有效，但证据仍够不充分，目前仅有少量实施在小动物身上的基础研究和前期临床研究。此外，尚无明确的分子机制研究报道。本文通过回顾目前已有的相关文献，探讨PRP 对脂肪移植物作用的可能分子机制。回顾目前已发表的对 PRP 应用脂肪移植的体外、动物和人体研究，为其临床应用和未来研究方向提供依据。 富血小板血浆的定义 富血小板血浆（PRP）是自体的、含有高于全血浓度的 血小板的少量血浆。成人全血的血小板计数是 150 000～350 000/μ l 。只有当 PRP 中的血小板计数达到 1，000，000/μ l 或者全血血小板数的 4～7 倍，才能取得临床效果[7]。血小板中含有两种颗粒：α 颗粒和高密度颗粒。每个血小板中大约有 50～80 个α 颗粒。目前已证实α 颗粒中至少含有 7 种能激活创面修复的生长因子，包括三种血小板衍生因子 （Platelet Derived Growth Factors，PDGF-AA，PDGF-BB 和PDGF-AB）、转生长因子-β （Transforming Growth Factors， TGF-β 1 和 TGF-β 2）、血管内皮细胞生长因子（Vascular Endothelial Growth Factor，VEGF）和表皮生长因子 （Epidermal Growth Factor，EGF）[8]。α 颗粒中还含有三种 细胞黏附蛋白：纤维蛋白原、纤维连接蛋白和玻连蛋白[9]。此外，还含有胰岛素样生长因子（Insulin-like Growth Factors， IGF-I，IGF-II）、成纤维细胞生长因子（Fibroblast Growth Factor，FGF）、内皮细胞生长因子（Endothelial Cell Growth Factor，ECGF）和血小板源性血管生长因子（Platelet Derived Angiogenesis Factor，PDAF）。高密度颗粒中也含有生物活性因子，包括组织胺、5-羟色胺、多巴胺、钙离子和腺甘酸等， 这些因子也参与创面修复，在创面修复的第一阶段--炎症反应期发挥重要作用。组织胺和 5-羟色胺能增加毛细血管的通透性，使得炎症细胞向损伤部位迁移并激活巨噬细胞[9]。 富血小板血浆的制备 最好在手术前采集全血制备 PRP，因为手术开始后术区会出现血小板聚集和触发凝血反应，降低外周循环中的血小 板数。PRP 制备的原理是根据全血中各成分的密度差异，经离心来分离得到浓聚血小板的血浆。通常采用二次离心抗凝 的全血来获得 PRP。第一次离心后，红细胞沉积在最下方， 与血浆分离，中间出现白色的薄层，含有大量血小板。取血 浆和中间层进行第二次离心后，血小板沉积，留取约 1/4 的血浆与血小板混合均匀后即得到 PRP[7-10]。目前，文献报道的离心力和离心时间各不相同。目前一致认可的是在第二 次离心时采用较高的离心力，以增加血小板数量和减少制备 时间。但高速离心会导致血小板破裂，引起制备过程中的生 长因子释放，最终降低所得 PRP 中血小板、生长因子的含量， 影响其生物活性。Dugrillon 等[11]通过研究离心力对生长因子含量的影响发现，随着离心力从 400g 到 1200g 的增加， PRP 中血小板的计数随之增