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不同炮制工艺对生姜中6-姜酚含量的影响 生姜是姜科生姜的干燥根系。冬天收获，清除须根和沉积物，干燥或冷却至低温干空。自古就被医学家视为药食同源的保健品。 炮姜则是将干姜炮制成表面棕黑色或棕褐色,内部棕黄色,质轻泡,性味由干姜的辛热改变为苦涩辛温,其作用主要化瘀止血,用于治疗虚寒性的吐血、便血、崩漏及产后血虚里寒、腹痛瘀滞等证。姜中的活性成分有抗肿瘤、抗病毒、抗菌和止吐等活性,有明显的抗氧化及清除自由基(HO·和O2·)作用。其主要功效成分以6-姜酚含量最高。本实验用高效液相色谱法测定干姜中6-姜酚含量,研究干姜经不同炮制方法:炒黄、炒炭(清炒、闷煅)、麸炒、砂炒后对其中6-姜酚含量的影响,定量分析了4种炮制方法中干姜药材的主要成分含量的变化,为干姜炮制工艺及炮制品的利用和提供依据。 1 材料表面 1.1 仪器、试剂与网络 Waters高效液相色谱仪(2695),DF-15台式连续投料粉碎机(温岭市林大机械有限公司),电子分析天平Sartorius(北京赛多利斯仪器系统有限公司),KD21C-BI型微波炉(广东美的微波炉制造有限公司)。干姜药材产自河北(购于兵团药店),批号 090901,经生药学鉴定为姜Zingiber officinaleRost.的根茎,筛选备用。 1.2 %是测定项目 6-姜酚对照品(本实验室自制,纯度98.5%)。乙腈,甲醇为色谱纯购自J.T. Baker Co. Ltd(USA),其他甲醇、石油醚、乙醚试剂均为分析纯。 2 方法和结果 2.1 干炮产品的制备 2.1.1 热锅温度的确定 取净干姜片约100 g,大小均匀,按《中国药典》(2010年版)附录ⅡD方法,将干姜片置热锅内,用文火加热(160～170 ℃),不断翻炒至干姜片颜色加深,并逸出香气,取出平铺在搪瓷盘上放凉,备用。 2.1.2 炒碳炒碳储存 2.1.2. 热锅温度 取净干姜片约100 g,按《中国药典》(2010年版)附录ⅡD方法,置热锅内,用武火或中火加热(220～300 ℃),不断翻炒至干姜表面焦黑色,内部棕褐色,喷淋少许清水,灭尽火星,略炒,取出平铺在搪瓷盘上晾干,备用。 2.1.2. 制备瓷器盘 取净干姜片约100 g,按《中国药典》(2010年版)附录ⅡD方法,置锅内,上盖一个口径较小的瓷碗,两器皿接合处用筛好的砂子封闭,碗上压重物,扣碗底部贴一白纸条或放几粒大米,用文武火加热,煅至白纸条或大米呈来黄色为度,离火,待凉后取出平铺在搪瓷盘上,筛去碎屑备用。 2.1.3 麦麸的制备 取净干姜片约100 g,按《中国药典》(2010年版)附录ⅡD方法,取适量麦麸(能掩盖药材的量),先将麦麸撒入热锅内,麦麸立即冒烟,用中火加热,倒入干姜片,反炒至表面深黄色,取出,筛去麦麸,平铺在搪瓷盘上,放凉备用。 2.1.4 热锅内砂均制备 取净干姜片约100 g,按《中国药典》(2010年版)附录ⅡD方法,先将净砂置热锅内(砂的用量以能掩盖所加药物为度),用武火加热,炒至滑利容易翻动时,将干姜片倒入不断翻炒至鼓起,表面棕褐色或焦黑色,内部焦黄或焦褐色,取出,筛去砂,平铺在搪瓷盘上,晾凉备用。 2.26 -姜酚含量测定 2.2.1 梯度洗脱过程 色谱柱为Scienhome Kromasil C18(4.6 mm×200 mm,5 μm)及预柱,流动相为乙腈(A)-水(B),梯度洗脱过程(A梯度)0～6 min 45%～50%,6～13 min 50%～55%,13～28 min 55%～90%。检测波长280 nm,柱温30 ℃,流速1.0 mL·min-1,理论板数以6-姜酚计不低于3 000。精密吸取2.2.2项下对照品溶液10 μL,供试品溶液各20 μL进行色谱分析,记录色谱图。结果见图1。 2.2.2 对照品储备液的制备 精密称取6-姜酚对照品10.65 mg,置500 mL量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得对照品储备液(每1 mL含6-姜酚0.234 3 mg)。 2.2.3 超声处理法 取干姜片用粉碎机粉碎,精密称定约0.5 g,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25 mL,密塞,摇匀,称定质量,超声处理60 min,放冷,再称定质量,用甲醇补足减失的质量,摇匀,滤过,取续滤液,用微孔滤膜 (0.45 μm)滤过,备用。 2.2.4 标准曲线的绘制 精密吸取对照品储备溶液配置一系列浓度分别为0.021 3,0.063 9,0.106 5,0.149 1,0.191 7,0.234 3 g·L-1,依次进样,进样量10 μL,测定峰面积,以峰面积(Y)为纵坐标,6-姜酚量(X)为横坐标,绘制标准曲线,计算得回归方程为Y=502 929X-16 177(r=1),结果表明6-姜酚在0.213～2.343 μg呈良好的线性关系。 2.