大肠杆菌基因型.docxVIP

大肠杆菌基因型的表示方法 （Demerec,et,al.1966） 分子克隆中常用的大肠杆菌及其遗传标记按Demerec等1966年提出的命名原则，采用的菌株所有的基因都假定处于野生型状态，除非在基因型上另外注明。 —、一般规则： 1、根据基因产物或其作用产物的英文名称的第一个字母缩写成3个小写斜体字母来表示。 例如：DNAAdenineMethylase^dam。 2、不同的基因座，其中任何一个突变所产生的表型变化可能相同，其表示方法是在3个小写斜体字母后加上一个斜体大写字母来表示区别。例如：Recombination^CA、recBrecCo3、突变位点应通过在突变基因符号后加不同数字表示。如supE44（sup基因座E的44位突变）。如果不知道几个等位基因中哪一/几个发生了功能性突变，则用连字符“-”代替大写字母，如奶p-31。 4、细菌的基因型中应该包含关于其携带的质粒或附加体的的信息。这些符号包括菌株携带的质粒或附加体、质粒或附加体上的突变基因座和突变位点。其基因符号应与基因座的表示符号明显区别，符号的第一个字母大写、不斜体并位于括号内；质粒或附加体上的突变基因座和突变位点的基因符号的表示方法与染色体上突变基因座、突变位点的符号相同。 5、对于携带附加体的菌株的完整基因型描述应包括附加体的状态（游离或整合）。 以F因子为例，F-：F因子缺失；F+：自主性F因子，不携带任何遗传可识别染色体片段；F’：携带有遗传可识别细菌染色体片段的自主性F因子；Hfr：整合到染色体上的F因子（highfrequencyofrecombination）。当这些质粒或噬菌体片段变异或缺失时，用（）”或“7等以区别。例如：/F\traD36.proAB.lacIq、lacZM15]6、某个基因或某个领域缺失时，在其基因型前面加上“”表示。例如：lac-proAB基因缺失时它的基因型表示为（lac-proAB）。 7、由于某种基因的变异导致大肠杆菌可以明显观察到特征变化，有时也用其表现型代替基因型进行表示。例如：某些抗药性的获得或丧失，用如下方式表示：Streptomycin抗性fStr__+或Strr，Ampicillin敏感性^Amp-（第一个字母要大写，+或“r”表示有抗性；“-”表示无抗性或敏感）。-8、根据某些特异性蛋白的变异及其导致的结果变化进行表示。 例如：TH2菌株上有一种基因型表示如下：hsdS20（rB-、mB-），其中S20代表特异性识别蛋白发生变异，（）中的rB-、mB-表示由于S20的变异而导致B株来源的公dR和hsdM的功能缺失。 9、蛋白质的名称与对应的基因或等位基因相同，但不用斜体，且首字母大写，如，UvrA、UvrB。 二、基因符号和意义（见表1）部分基因符号和意义基因符号意义注释A缺失缺失突变用“△”表示，其后的（）中是缺失基因的名称、等位基因号码。如△(lac-proAB)表示lac-proAB基因的缺失。 :断裂表示：前的基因是断裂的。 ::插入“：：”前的基因由于“：：”后的基因插入断裂。 IN倒位倒位在大肠杆菌中很少见，用IN(区域)表示。 TP转座如TP(lacI-purE)33表示lacI和purE间的基因区域(包括这两个基因)被插入到染色体的某个位点。 +显型或抗性如果是表示抗性，+也可用r代替-隐型或敏感、无抗性如果表示对某种抗生素的敏感性，用“-”上标表示。/质粒或附加体的缺失()or[]()或[]中的基因是缺失或变异所在①融合如①(ara-lac)表示ara和lac融合成新基因三、主要的基因型说明1、基因重组相关的基因型recA(Recombination)功能：recA基因表达ATP依赖型DNA重组酶，它在入-噬菌体与基因组DNA的溶原重组时起作用，同时具有对DNA放射性损伤的修复功能。由recA基因的变异所产生的基因型使同源或异源DNA的重组不能进行，保持插入DNA的稳定性，对DNA的转化有利。一个菌株的基因型如果是recA，则说明此菌株的表现型是重组缺陷的。 recB(Recombination)功能：recB基因表达ATP依赖型DNase和核酸外切酶V的一个亚基，对recA的DNA重组酶起辅助和促进作用。DNase催化双链DNA的解旋和解链，核酸外切酶V催化单链DNA的裂解，在DNA的重组和损伤修复中发挥重要作用。recB基因的变异导致其DNA重组和修复功能丧失，保证了外源DNA的稳定，有利于DNA转化。 recC(Recombination)功能:recC基因表达四种酶，即核酸外切酶V，ATP依赖型的核酸内切酶，解旋酶及ATP酶，它们和recA,recB所表达的酶相互协调作用，在DNA的重组及放射性损伤的修复中发挥作用。recC基因的变异导致DNA重组功能缺失，保证外源DNA的