双串联质谱法测定酱油中3,2-丙二醇.docxVIP

双串联质谱法测定酱油中3,2-丙二醇 随着人们对口感需求的显著增加，近年来油压机的发展趋势发生了很大变化。水解植物蛋白被应用于酱油工业提高了产量,降低了成本,但也引入了有害物质氯丙醇,它会引起肝、肾脏、甲状腺等的癌变、并会影响生育。尽管我国已实行最高残留限量(MRL),但目前没有与其配套的国家标准测定方法。 本文报道调味品中氯丙醇的两种检测方法,衍生化气相色谱/电子捕获检测法(GC/ECD)测定酱油中3-氯-1,2-丙二醇(3-MCPD);气相色谱/双串联质谱法(GC/MS/MS)同时测定酱油中1,3-二氯-2-丙醇、2,3-二氯-1-丙醇和3-氯-1,2-丙二醇。以上两个方法快速、准确、有效,并达到了国内外先进水平。 1 实验部分 1.1 gc-ecd检测方法 1.1.1 冷却、冷却 正己烷、无水乙醚、乙酸乙酯(重蒸馏);正己烷-无水乙醚:9+1;七氟丁酰咪唑(东京化成);无水硫酸钠:650℃灼烧4 h,冷却后存于密封容器中备用;硅藻土:Extrelut;20%氯化钠溶液;3-氯-1,2-丙二醇贮备液:称取3-氯-1,2-丙二醇标准品(Merck,≥99%):0.100 g于100 mL的容量瓶,用乙酸乙酯定容至刻度,摇匀,此溶液含量为1 000 mg/L。除另有规定外,所有试剂为分析纯,实验用水为蒸馏水。 1.1.2 吹氮浓缩器或旋转蒸发仪 HP6890气相色谱仪,带电子捕获检测器;吹氮浓缩器或旋转蒸发仪;混匀器;离心机;玻璃层析柱:20×2.5 cm i.d.,带可调活塞。 1.1.3 标准工作曲线的绘制 (1)试样制备:称取5 g 液体试样(酱油、酸水解植物蛋白调味液、其他调味液等,精确至0.001 g)于100 mL烧杯中,加入5 g 硅藻土,充分搅拌均匀。装入已依次充填1 cm高的无水硫酸钠和5 g硅藻土的玻璃层析柱中,压实,再填入1 cm高的无水硫酸钠;称取5 g 固体试样、半固体试样(酱油粉、酸水解植物蛋白调味粉、其他调味粉、调味酱等,精确至0.001 g)试样于100 mL烧杯中,加入5.0 mL水,搅拌成浆状。以下步骤按液体试样操作。(2)提取:用正己烷-无水乙醚(90+10)80 mL淋洗制备好的试样,淋洗速度约为3 mL/min,弃去最初淋洗液。然后用无水乙醚洗脱,洗脱速度约3 mL/min。收集150 mL洗脱液于250 mL圆底烧瓶中,在40℃下用旋转蒸发器或吹氮浓缩至近干(切勿蒸干),用正己烷移入10 mL具塞比色管中,并定容至5 mL。 (3)衍生: 在上述正已烷溶液中加入50 μL七氟丁酰咪唑,密封、充分振摇1 min,70℃恒温30 min后,冷却至室温。加水3 mL,密封、充分振荡1 min,静置20 min或离心3 min。用移液管将水层吸出后,重复加水3 mL、震荡、静置或离心操作。将上层正己烷溶液移入2 mL样品瓶中,加入约300 mg无水硫酸钠,密封、充分振荡1 min,静置后供气相色谱分析。(4)标准工作溶液:用正己烷将3-氯-1,2-丙二醇贮备液稀释配成浓度为0.00、0.01、0.05、0.10、0.50、1.00、2.00 μg/mL的工作液。各取5 mL于10 mL比色管中按衍生方法操作。(5)色谱测定:HP-PAS-5(30 m×0.32 mm×0.25 μm)色谱柱;柱温:50℃?→??5℃/min100℃(1min)?→???30℃/min280℃(3min)50℃→5℃/min100℃(1min)→30℃/min280℃(3min);进样口温度:260℃;检测器温度:300℃;进样方式:不分流进样;进样体积:1 μL;载气:高纯氮,纯度大于99.99%,3.0 mL/min。 将衍生后的标准系列溶液进样1 μL。以峰面积为纵坐标,标准系列溶液的浓度为横坐标,绘制工作曲线或计算回归方程。待测样液等体积1 μL进样测定。在上述色谱条件下,3-氯-1,2-丙二醇的保留时间为11 min左右。其标准品的气相色谱图见图1。 1.2 氯丙醇的制备 1.2.1主要仪器及试剂Finnigan GCQ气质联用仪;A200S自动进样器;旋转蒸发仪。无水硫酸钠、正己烷、无水乙醚、乙酸乙酯(分析纯); 三氟乙酸酐(东京化成);1,3-二氯-2-丙醇、2,3-二氯-1-丙醇和3-氯-1,2-丙二醇(Merck);Extrelut NT(Merck)。 1.2.2分析步骤 (1)试样制备:同前1.1.3。(2)提取:于20×1.5 cm玻璃层析柱中依次装入1 cm高的无水硫酸钠,8 g Extrelut NT填料。称取2.5 g样品于100 mL烧杯中,加入5 g Extrelut NT填料,搅匀,使之充分吸附,装入柱中,压实,再填入1 cm高的无水硫酸钠,用150 mL正己烷-乙醚(1+