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不同剂量肾上腺素对小鼠心肺复苏的影响 近年来，关于大鼠生命恢复（cpr）的实验研究引起了人们的关注，但在cpr实验中，关于最佳药物剂量小鼠血液的作者还没有发表过。本研究应用经食道快速起搏心室的方法诱导小鼠发生室颤、建立小鼠心脏停搏模型,进而比较两种剂量肾上腺素在该模型中的疗效,旨在寻找小鼠CPR中较为合理的肾上腺素剂量。 1 材料和方法 1.1 体外动脉压ld50 选用健康雄性昆明小鼠30只,体质量35～40 g(由广西医科大学实验中心提供)。小鼠经腹腔注射10%水合氯醛(3 mL/kg)麻醉,气管切开并插入18G套管以备接呼吸机用。分离并切开左颈总动脉,借助4倍放大镜插入预充肝素钠的24G静脉留置管,通过压力换能器与BL-420F生物机能实验系统(四川成都泰盟仪器公司)连接以监测动脉压。同时经四肢皮下针头导联记录标准Ⅱ导联心电图。 1.2 室颤的恢复30s 经食道快速起搏心室诱导小鼠发生室颤,建立心脏停搏模型。具体操作参照文献,但略作修改:即将2极5F起搏电极经口插入食道约4 cm,电极近端与BL-420F生物机能实验系统的电生理刺激输出端相连。采用连续快速起搏心室诱发室颤、建立小鼠心脏停搏模型。所需参数为:电压20 V、脉宽10 ms、频率20 Hz。当起搏90 s后暂停起搏并观察1～2 s,如心电图显示起搏诱发出来的室颤自动转律时,应立即再起搏30 s,直到诱发出的室颤持续存在、或出现无脉性电活动、或全心停搏为止。起搏开始后4 min将30只小鼠随机分成三组(n=10):对照组(C组:经动脉注射生理盐水1 mL)、低剂量肾上腺素组(L组:经动脉注射肾上腺素0.04 mg/kg)、高剂量肾上腺素组(H组:经动脉注射肾上腺素0.2 mg/kg)。各组小鼠开始常规CPR的同时均经动脉注射药物(生理盐水、等容量肾上腺素)1次。采用ALV-V9型动物呼吸机(上海奥尔科特生物科技有限公司)行机械通气(室内空气),通气频率70次/min,潮气量为3 mL/kg,自制胸外按压器进行胸外心脏按压,频率200次/min。按压深度为小鼠胸廓前后径1/3,如10 min无效则放弃复苏。自主循环恢复的小鼠连续监测心电和血压60 min。监护1 h后拔除动脉导管并结扎止血,拔除气管导管,检查无活动性出血后将动物放入笼内,观察至动物自主呼吸停止,期间不使用任何药物。 所有小鼠在死亡后常规进行尸检,肉眼观察内脏器官和大血管有无发生与血管穿刺或胸外心脏按压相关的并发症、导管放置位置是否准确。 1.3 自主呼吸及两种呼吸模式 判断诱发心脏停搏的标准为有创血压监测显示平均动脉压10 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),并伴有正常的动脉搏动波消失,且心电图显示室颤波形、或无脉性电活动、或一条直线(全心停搏);判断自主循环恢复(restoration of spontaneous circulation, ROSC)的标准为出现室上性节律(包括窦性、房性或交界性心律)伴有平均动脉压20 mm Hg,持续1 min以上。自主呼吸的出现定义为ROSC后,在机械通气的条件下,小鼠出现自主呼吸≥5次/min;撤离呼吸机标准为小鼠出现自主呼吸≥40次/min,停用呼吸机1 min后血压、心率和呼吸状况稳定或持续好转。生存时间定义为从ROSC到自主呼吸消失、或在机械通气条件下平均动脉压降至≤10 mm Hg。 1.4 统计学处理 数据用均数±标准差(xˉ±s)(xˉ±s)或M(P25,P75)表示,SPSS13.0软件进行统计分析,计数资料用χ2检验,计量资料的比较用t检验、方差分析或Mann-Whitney U Test检验,P0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 血压、舒张压、平均动脉压 在诱发心脏停搏前,三组小鼠的体质量和血流动力学参数(包括体质量、心率、收缩压、舒张压、平均动脉压)比较差异无统计学意义(见表 1);在诱导心脏停搏过程中,三组小鼠需要的电刺激时间(起搏总时间)和达到心脏停搏标准的时间(从电刺激开始到相关指标达到心脏停搏诊断标准的时间)比较差异无统计学意义(见表 2)。 2.2 两组l和h组间比较 肾上腺素治疗组小鼠ROSC率明显高于C组、ROSC时间明显短于对照组,但上述两项指标在L、H组间比较差异无统计学意义(P0.05);L组小鼠的存活时间明显长于C、H组,且L组小鼠1 h生存率明显高于C、H组(见表3)。 2.3 c组小鼠自主呼吸的情况 L、H组小鼠在ROSC后1 h内全部出现自主呼吸,但C组没有一只小鼠出现自主呼吸;在 ROSC后1 h内,L组有5只可撤呼吸机,而H组只有3只可撤呼吸机(见表4)。 2.4 平均动脉压和心率 在CPR期间,H组小鼠的舒张压明显高于C组(从复苏0.5 min开始,P0.001)和L组(从复