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海水硬骨鱼刺激隐核虫的生活史 刺激隐形虫是一种在海水中产生的全毛虫。1937年日本学者Sikama首次发现了该虫,并对其进行了初步研究。以后陆续有些学者做了少量报道。刺激隐核虫生活史可分为3个阶段:(1)寄生期虫体(滋养体Trophont);(2)包囊期虫体(Tomont);(3)感染期虫体(幼虫Tomite)。对于生活史各阶段的详细描述,尚未见有报道。本文通过对刺激隐核虫生活史各阶段的活体观察,试图发现其中的特点,为合理有效地杀灭该寄生虫提供依据。 感染隐核虫的形态 1.1.成熟的刺激隐核虫滋养体由严重感染的真鲷(Pagrosomus major)苗体上分离获得。 I.2.分离方法利用刺激隐核虫只寄生在活宿主体上这一特点,将患病鱼苗急性处死后,放置在小培养皿中,加数毫升经醋酸纤维薄膜(孔径0.2μm)抽滤的海水,静置2h后,肉眼可见水中有白色点状物运动。镜下观察这些生物体,证实为刺激隐核虫滋养体后,用毛细管将滋养体吸出并放置在干净的凹玻片上,滴加数滴过滤海水。 将凹玻片放入由大培养皿做成的湿房中,20℃下培养,12h更换一次海水,直至感染期幼虫出现。整个实验过程中定时观察并拍照。 Ⅱ.1.滋养体阶段虫体圆形或椭圆形,大小约为250～450μm,体表附有均匀的体纤毛。由于虫体内有大量的泡状物,致使虫体的透明度很低,故活体观察时,很难辨认出虫体的大小核,从正面也很难识别虫体的口器,只是从侧面可看到有纤毛束从位于虫体腹面前部的口区伸出(图版1,封三,后同)。自由状态的滋养体运动比较缓慢。作者在观察时发现:虫体一经到达容器的侧壁或底部,就不再大范围运动(图版2),而开始进一步的发育。自由状态的滋养体一般只能保持数小时。 Ⅱ.2.包囊阶段包囊期是刺激隐核虫离开宿主后生长发育时间最长的阶段,一般为数天。包囊体同滋养体大小相近,外形相同。包囊形成初期,表面光滑,囊壁较薄,镜下观察为多层结构(图版3),有些个体,包囊形成后,虫体与囊壁之间留有空隙(图版4)。数小时后,包囊表面出现较毛糙的结构(图版5),囊壁开始增厚,光镜下即可见囊壁出现多层现象(图版6)。与此同时,包囊内的虫体开始无性分裂,其分裂过程是虫体经过包囊期产生后代的必然过程。分裂的特点在于细胞的不等分裂;第一次分裂形成的两细胞间的凹陷位于包囊体的前或后端的1/3处(图版7),第二次分裂是在第一次分裂后产生的较小细胞团上进行的(图版8)。当包囊内的细胞团通过多次不等分裂达到彼此相近大小时,镜下可见小的细胞在包囊内缓慢运动,这些小细胞即为感染期幼虫(图版9)。在细胞进行无性不等分裂的同时,包囊壁的结构也逐步复杂起来,层数有所增加(图版10),当感染期幼虫完全形成后,囊壁的层数在光镜下就很难分辨清晰(图版11)。成熟的幼虫将从包囊的束缚中摆脱出来,进而感染新的宿主。我们发现:感染期幼虫产生后,幼虫会不停地冲撞着包囊壁,导致囊壁上出现孔洞,并借助这一孔洞脱离包囊进入水中(图版12)。而空的包囊仍保持原来的形态(图版13)。通过对随机抽取的40个包囊进行计数,每个包囊可产生的幼虫数为273±64个。 Ⅱ.3.幼虫阶段这时期虫体从体形到大小与滋养体和包囊体都相差甚远。幼虫呈梨形,前端小,后端大,长约50μm。体表布满均匀的体纤毛(图版14);与滋养体相比,幼虫的透明度要高得多。光镜下可见核区位于虫体的中部,伸缩泡位于后端。但未见有口器结构。游离在水中的幼虫,在体纤毛的快速摆动下,游动极快。虫体表现出较大的柔软性,常可见虫体出现变形现象(图版15)。幼虫阶段的虫体必须在1～2 d内再次侵入到宿主体内,否则就会死亡。 包囊期间的寄生虫和多子小瓜虫的发生情况 作为一种外寄生纤毛虫,刺激隐核虫的生活史与淡水多子小爪虫(Ichthyophthirius multifiliis)极为相似。它们不仅都具有3个形态各异的虫体阶段,而且各阶段的作用也相同。但是从各阶段形态及发育过程和各自的分布范围看,两者之间仍存在着明显差异。多子小瓜虫滋养体在脱离宿主后,很快就形成包囊,并在条件适宜的情况下,1～2d,就可产生出感染期幼虫;相比之下,刺激隐核虫完成一次宿主外的发育短则4～5d,长则需7～8d才能完成(徐润林等,另文发表)。包囊期间,两种寄生虫分裂方式不同,多子小瓜虫幼虫的产生是通过滋养体多次等裂完成的,虽然有时它们呈现不同步现象;而刺激隐核虫幼虫的产生是通过多次不同步的不等分裂完成的。两种寄生虫幼虫形成后,脱离包囊的形式也不尽相同,多子小瓜虫是爆发式,即成熟的幼虫一次性全部从包囊中脱囊而出,其结果使包囊壁彻底瓦解;而刺激隐核虫幼虫则是逐步分批游离包囊进入水体,其结果是包囊壁保持完整。这两种不同的幼虫脱囊方式是由于寄生虫包囊壁结构的差异所致。多子小瓜虫的包囊壁是双层结构,而且每个包囊内的幼虫可达上千个;而刺激