大黄素对鼻咽癌cne-1细胞放射增敏及自噬相关基因mrna表达的影响.docxVIP

大黄素对鼻咽癌cne-1细胞放射增敏及自噬相关基因mrna表达的影响 越来越多的研究表明，自食在肿瘤的形成和发展中起着重要作用。肿瘤的放疗和化疗过程可以诱导细胞自发的死亡。例如，feg等人在研究中发现了辐射增强对a549辐射的敏感性和自食能力之间的狭窄关系。本课题前期实验已证实广西产何首乌中无细胞毒作用浓度5 mg·L-1大黄素联合2Gy射线照射对鼻咽癌细胞CNE-1具有明显的放射增敏作用,放射增敏比为1.39,为了研究大黄素在放射增敏过程中是否伴随着自噬的发生及其作用机制,本实验通过电镜观察大黄素在放射增敏过程鼻咽癌细胞CNE-1自噬体形成的超微结构变化,real-time PCR定量检测自噬相关基因的表达,探讨放射增敏与自噬发生的关系。 1 材料表面 1.1 细胞起源 人鼻咽癌高分化CNE-1细胞由广西医科大学实验中心提供。 1.2 各试剂的研制 大黄素由课题组前期从广西何首乌分离获得并经结构鉴定,纯度为99%。实验中加入无细胞毒作用浓度5 mg·L-1。TRIzol REAGENT (Invitrogen公司 ,美国)、异丙醇和三氯甲烷为国产分析纯试剂、DEPC处理水、RevertAidTMFirst Strand cDNA Synthesis Kit (Fermentas公司,美国)、Fast Start Universal SYBR Green Master (Rox)