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pc12细胞在dmem+15%胎牛血清中培养传代培养的研究 疼痛是临床康复中常见的问题。尤其是永久性疼痛（如晚期肿瘤疼痛）的治疗。近年来,国内外开始尝试采用同种或微囊化异种肾上腺嗜铬细胞的移植治疗顽固性癌痛,并取得了一定的疗效。由于肾上腺嗜铬细胞来源匮乏及异种移植存在的伦理学问题,从而限制了该方法的临床应用。 本研究通过对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)分泌脑啡肽特性的检测,试图探索一种细胞移植的新途径。以往对该细胞分泌特性的研究着重于测定多巴胺、肾上腺素和去甲肾上腺素的浓度,本研究重点检测传代培养PC12细胞分泌脑啡肽的情况,及采用反转录PCR(RT-PCR)检测其前脑啡肽(PENK)基因的表达,为进一步研究细胞移植镇痛提供基础依据。 1 材料和方法 1.1 实验试剂与仪器 PC12细胞(购自中山大学细胞库),DMEM培养基(美国Gibco公司),胎牛血清(美国Hy Clone公司),M-EK检测试剂盒(购自第二军医大学神经生理室),抑肽酶(购自Boehringer公司),Gene Amp PCR system 2700 PCR扩增仪(美国ABI公司),POWER/PAC 3000电泳仪(美国BIO-RAD公司),凝胶成像分析系统(美国BIO-RAD公司)。 1.2 方法 1.2.1 不同的传代培养 PC12细胞培养在涂有鼠尾胶原的塑料培养瓶中,培养液为DMEM(p H