紫心甘薯多糖对糖尿病大鼠血糖、血脂代谢的调节作用.docxVIP

紫心甘薯多糖对糖尿病大鼠血糖、血脂代谢的调节作用 糖尿病（m）是最常见的疾病之一。随着人们生活水平的提高, 人口老龄化以及肥胖发生率的增加, 糖尿病的发病率呈逐年上升趋势, 严重威胁人类健康, 因此安全、不良反应小的防治高血糖的纯天然保健食品备受人们青睐。有研究表明, 许多植物多糖具有降血糖、调节免疫、抗肿瘤等多种生物活性, 且无毒性, 已经有临床应用方面的报道。 紫心甘薯多糖 (polysaccharide from purple sweet potato) 是从旋花科植物紫心甘薯Ipomoea batatas(Linn.) Lam. 块茎中提取分离得到的多糖。紫心甘薯多糖的碱提多糖的得率多于水提多糖, 且研究较少。因此, 本实验选择碱提多糖碱进行生物活性研究。《本草纲目》中有“甘薯补虚乏, 益气力, 健脾胃强肾阴”的记载。有关紫心甘薯多糖成分增强免疫、抗肿瘤等作用已有一些研究报道, 但对其降血糖和调血脂作用却鲜见报道。本实验通过建立链脲佐菌素 (STZ) 诱导的大鼠糖尿病模型, 考察不同剂量的紫心甘薯碱提多糖对糖尿病大鼠血糖和血脂水平的影响, 并探讨其作用机制。 1 实验动物及分组 1.1 材料:紫薯 263 由浙江省临安市太阳镇紫心甘薯实验基地提供, 经浙江大学陈伟平副教授鉴定为I.batatas(Linn.) Lam。紫薯碱提多糖 (polysaccharide from purple sweet potato, PPSP, 浙江大学城市学院药理实验室自制, 质量分数为 24.25%) ;盐酸二甲双胍片 (浙江亚太药业股份有限公司) ;STZ (Sigma 公司) ;葡萄糖试剂盒、甘油三酯 (TG) 试剂盒、胆固醇 (TC) 试剂盒、高密度脂蛋白胆固醇 (HDL-C) 试剂盒、糖化血清蛋白 (GSP) 试剂盒、肝糖原试剂盒 (南京建成生物工程研究所, 批号 ;丙二醛 (MDA) 、还原型谷胱甘肽 (GSH) 、总抗氧化物能力 (T-AOC) 试剂盒、考马斯亮蓝 (南京建成生物工程研究所, 批号 ;血糖测定试纸 (美国强生公司) ;乙醇等为国产分析纯。 LifeScan SureStepTM稳步血糖仪 (美国强生公司) , Sunrise-BASIC TECAN 酶标仪 (瑞士 TECAN 公司) , RE—2000 旋转蒸发仪 (上海亚荣生化仪器厂) , TissueLyser Ⅱ高通量组织粉碎机 (德国 Qiagen 公司) 。 清洁级 SD 雄性大鼠, 体质量 (160±10) g, 浙江省医科院动物实验中心提供, 动物合格证号:Scxk (浙) 2008-0033;动物房温度 (23±2) ℃, 湿度 (60±5) %。 1.2 PPSP 的提取分离:将新鲜紫心甘薯去皮晒干后粉碎, 用无水乙醇回流 2 h 脱脂, 用 70 ℃ 水提2次后, 将提取液醇沉、脱蛋白、脱色, 得紫心甘薯水提多糖。残渣在 4 ℃ 用 10% NaOH 碱提, 将提取液透析、醇沉、脱蛋白、丙酮洗涤, 得紫心甘薯碱提多糖 PPSP。 1.3 糖尿病模型的建立、分组及给药:大鼠 66 只, 适应性喂养 1 周后, 随机选 10 只对照, 其余 56 只禁食 24 h 后按 60 mg/kg 体重 ip 1% STZ, 72 h 后禁食 5 h, 测血糖, 血糖值在 11.1 mmol/L 以上的为糖尿病造模动物。将造模成功的 56 只糖尿病大鼠, 随机分为5组:模型组 10 只, 阳性组 10 只, 紫心甘薯多糖低、中、高剂量组各 12 只。各组大鼠均持续 ig 给药 3 周, 其中对照组和模型组给予蒸馏水, 阳性组给予盐酸二甲双胍 (90 mg/kg) , 其余3组分别 ig PPSP 100、200、400 mg/kg。 1.4 PPSP 对 STZ 糖尿病大鼠体质量、饮水量和摄食量的影响:在给药前后3周测大鼠体质量、饮水量和摄食量, 分析其对 STZ 糖尿病大鼠的影响。 1.5 PPSP 对 STZ 糖尿病大鼠血糖、GSP、肝糖原的影响:每周尾静脉取血, 血糖仪测血糖。3周后, 尾静脉取血, 3 000 r/min 离心取血清, 按试剂盒操作方法测定 GSP。处死大鼠, 取肝脏, 称质量, 按照试剂盒的方法, 测定肝糖原。 1.6 PPSP 对 STZ 糖尿病大鼠 TG、TC、HDL-C、MDA、GSH、T-AOC 的影响:尾静脉取血, 3 000 r/min 离心取血清, 按照 TG、TC、HDL-C、MDA、GSH、T-AOC 试剂盒方法操作测定。 1.7 统计学统计:用 SPSS 15.0 统计数据, 结果以xˉ±sxˉ±s表示, 通过单因素方差分析组间差异。 2 结果 2.1 各组大鼠体