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（优选）基因工程细胞工程胚胎工程 本文档共40页；当前第1页；编辑于星期二\12点30分 基因工程相关知识整合 概述基因工程和蛋白质工程基本操作过 程，并思考下列问题。 答案 基因工程基本操作过程：获取目的基因→构建 基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因 的检测与鉴定。 蛋白质工程基本操作过程：蛋白质预期功能→蛋白质 的三维结构 氨基酸序列的多肽链 基因（DNA） 分子 设计 DNA合成 本文档共40页；当前第2页；编辑于星期二\12点30分 （2）基因工程的基本操作步骤中哪几处用到了限制酶，其特性和来源是什么？又有哪几处涉及碱基互补配对？ 答案 限制酶在第1、2步中用到而且要求同一种，目的是产生相同的黏性末端；限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，它能识别DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且切割两个核苷酸之间的磷酸二酯键，产生的末端有黏性末端和平末端；只有第三步将目的基因导入受体细胞不需碱基互补配对，其余三个步骤都涉及碱基互补配对。 本文档共40页；当前第3页；编辑于星期二\12点30分 （3）基因表达载体如何构建？ 答案 本文档共40页；当前第4页；编辑于星期二\12点30分 （4）将目的基因导入受体细胞的常用方法？ 答案 植物细胞：农杆菌转化法；动物细胞：显微注射法；微生物：Ca2+处理法。 （5）目的基因的导入与表达如何进行检测与鉴定？ 答案 ①分子水平检测 a.插入检测：DNA分子杂交技术，即使用放射性同位素标记的含目的基因的DNA片段作探针检测。 b.表达检测 ②个体生物学水平鉴定：对转基因生物进行抗虫或抗病的接种实验。 转录检测：分子杂交法，即目的基因作 探针与mRNA杂交 翻译检测：抗原—抗体杂交法 本文档共40页；当前第5页；编辑于星期二\12点30分 （沈阳质检）转基因植物油是由转基因植物通过压榨或浸出法加工制得的，因其出油率高而被广泛采用。我国是植物油消费大国，每年都从国外进口大量的转基因植物油。 （1）在培育转基因油料植物的过程中，基因操作需要的工具酶是 。在基因表达载体中，目的基因的首端必须含有 ，它是 识别和结合位点。 （2）请写出一种将目的基因导入油料植物细胞可以采用的方法： 。若受体细胞为植物体细胞，可采用 技术获得转基因植物体，该技术所依据的原理是 。 限制性核酸内切酶和DNA连接酶 启动子 RNA聚合酶 农杆菌转化（或基因枪、花粉管通 道）法 植物组 织培养 植物细胞全能性 本文档共40页；当前第6页；编辑于星期二\12点30分 （3）若要检测（2）中获得的植物细胞染色体上是否含有目的基因，可采用 技术。而想要得知上述植物是否真的出油率高，应如何做？ 。 （4）若利用蛋白质工程继续提高油料植物的出油率，其设计流程应从预期的 出发，设计预期的 结构，推测出应有的 序列，然后找到相对应的 序列，再用转基因技术改变其现有性状。 DNA分子杂交 将该植物制出植物油与同等质量的非转基因植物制出 的植物油称重比较 蛋白质功能 蛋白质 氨基酸 脱氧核苷酸 本文档共40页；当前第7页；编辑于星期二\12点30分 植物组织培养和植物体细胞杂交 图示植物组织培养和植物体细胞杂交过程， 并思考下列问题。 本文档共40页；当前第8页；编辑于星期二\12点30分 （1）上述两过程依据的原理是什么？ 答案 植物组织培养：细胞全能性；植物体细胞杂交：细胞膜的流动性和细胞的全能性。 （2）在植物体细胞杂交过程中，原生质体经诱导剂处理后，会有几种细胞类型？ 答案 5种：甲、乙、甲甲、乙乙、甲乙 本文档共40页；当前第9页；编辑于星期二\12点30分 野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能食用。俄、德、芬兰专家共同做实验研究，用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强的杂交系马铃薯。据图分析回答问题： 本文档共40页；当前第10页；编辑于星期二\12点30分 （1）②过程可用聚乙二醇（PEG），其目的是 。 （2）请用文字和箭头表示出④⑤技术过程的实验流程： 。由此过程 可以看出植物细胞有形成完整个体的可能性，这是 。 （3）在培养基上培养一段时间后，原生质体会再生出细 胞壁。可以取样，通过 实验来鉴别细胞壁是否已经再生。 诱导原 生