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面粟粒性狼疮32例临床分析 水面上的狼伤口是一种罕见的疾病，容易混淆酒渣性炎和囊虫性炎等疾病。目前，没有具体的治疗方法，病因不明。近年来,对本病的研究又倾向于其发病与T细胞介导的免疫反应有关。但是体液免疫有无参与发病,尚未见报道。CD20主要表达在未成熟的B细胞表面;CD45RA主要表达在B细胞和幼稚型T细胞表面;溶菌酶是一种非特异性免疫因子,在吞噬抗原的同时,可引起各种免疫反应。由于LMF皮损中以淋巴细胞浸润为主,因此考虑这些细胞因子可能参与了病变的过程,笔者应用免疫组化法对32例LMF患者皮损中CD20,CD45RA和溶菌酶进行了检测,现报告如下。 1 材料和方法 1.1 组织病理病例 LMF病例来源于2000年1月～2003年9月本科门诊就诊者,共32例,均经临床和组织病理确诊。其中男21例,女11例,年龄18～65岁,平均 29.78岁;病程1～12个月,平均5.96个月。所有患者近3个月内未接受任何免疫治疗,且均无其他全身性疾病,亦无感染表现。对照组选取本院五官科15例手术患者的健康面部皮肤作为正常对照。 1.2 主试剂 鼠抗人CD20单克隆抗体、鼠抗人CD45RA单克隆抗体、溶菌酶均购自北京中山生物技术有限公司。 1.3 百分率分值 结果评定根据Shimizu法改良而成。阳性细胞染成棕黄色。着色范围以阳性细胞数占总细胞数的百分率记分:2%为0,2%～20% 为1,21%～50% 为2,≥51% 为3;着色强度依据深浅记分:无着色为0,浅着色为1,深着色为2,上述两项相加为着色程度积分:≤1.9为阴性(-),2.0～2.9为弱阳性(+),3.0～3.9为阳性(2+),≥4.0为强阳性(3+)。 1.4 显色温度和显色效率 免疫组化采用SP法,设PBS代替一抗为阴性对照,作为质量控制标准,并严格控制显色时间和温度,以排除因显色时间长短或温度高低而造成的显色程度的不一致性;实验结果按照等级资料的两样本比较进行秩和检验,比较两组间CD20,CD45RA和溶菌酶的分布情况。以P0.05为差异有显著性,P0.01为差异有非常显著性。 2 cd20表达情况 在32例LMF患者中强阳性4例,阳性7例,弱阳性17例,阴性4例。且CD20+淋巴细胞成团块状聚集。在伴有干酪样坏死的皮损中CD20表达率降低,为阴性或弱阳性表达。在正常组中CD20无表达。见表1、图1～3。 在32例LMF患者中强阳性14例,阳性9例,弱阳性7例,阴性2例。且CD45RA+细胞成团块状聚集。在伴有干酪样坏死的皮损中CD45RA的表达率较低,9例阳性表达,5例为弱阳性,2例为阴性,无强阳性表达。在正常组中未检测出CD45RA。见表2、图4～7。 在LMF中溶菌酶强阳性为29例,阳性3例,弱阳性及阴性者均为0例;在正常组织中溶菌酶阳性1例,弱阳性1例,阴性13例。见表3、图8,9。 PBS代替一抗的阴性对照中未见阳性。 3 cd20表达动力学 以前认为LMF与结核感染有关,但多数研究者未检测到结核杆菌。近来有研究表明LMF与T细胞免疫有关,但B细胞有无参与本病发生,尚未见报道。B淋巴细胞具有两种最基本的功能:第一,B细胞可作为免疫效应细胞直接参与免疫应答。第二,它可作为抗原递呈细胞,有选择的捕捉抗原,并将之递呈给T淋巴细胞。CD20主要表达在未成熟的B细胞表面,并且CD20(Ca+通道亚单位)为B细胞活化信号传导途径。B细胞活化后其表面的CD20表达则下调。在本病中,CD20阳性B细胞表达较正常组织增高,说明B细胞也参与了LMF的发病过程。但笔者在本病的HE染色病理片中极少见到浆细胞浸润。有研究报道, 在LMF的晚期皮损中,主要在毛囊周围有大量纤维素坏死,淋巴细胞、组织细胞、嗜中性粒细胞散在分布于纤维坏死区,未见到浆细胞浸润。因此推测B细胞可能在本病的发病过程中仅行使了递呈抗原的 功能。 CD45RA是CD45的一种异构体。LMF中CD45RA阳性细胞可能既包括B细胞,也包括幼稚型T细胞。就其对B细胞产生抗体而言,CD45RA+T细胞的存在可抑制B细胞的活化。这也可能是在本病中仅见幼稚型B细胞的原因之一。 溶菌酶被认为是一种原始的非特异性防御机制,尤其是针对感染因素。针对不同的感染因子,包括寄生虫、深部真菌、分枝杆菌和其他一些微生物,引起细胞免疫和体液免疫,并且形成上皮细胞肉芽肿。实验检测到LMF皮损中溶菌酶强阳性,是否可以说明本病可能是一种由多因素(细菌尤其是分枝杆菌、寄生虫等)引起的炎症性肉芽肿。这进一步提示,LMF的发病可能与多种因素有关,T细胞介导的细胞免疫占有主导地位,为临床治疗的多方面考虑提供了理论基础。 2.1 sd20显示了细胞的乘船和涂层 2.2 cd45ra是细胞的细胞膜和血浆着色 2.3 溶菌酶是细胞的血浆着色 2.4