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半滑舌卵巢中卵母细胞发育的形态学观察 半滑动舌型（1873）属于舌型科，属cyoglosnah。渤海半滑舌鳎终年栖息于海湾水域, 洄游距离短, 活动范围小, 食物层次较低, 以底栖虾、蟹类为主要饵料, 在渤海鱼类中, 营养级仅为2.7, 属低级肉食性鱼类。具有生长快、食性温和、市场价值高等特点, 是一种理想的增殖和养殖对象。 我国对半滑舌鳎的繁育生物学研究始于上世纪的80年代末, 并且取得了很大的进展。如杨东莱等对卵子和仔稚鱼形态进行了研究, 姜言伟等对半滑舌鳎的苗种培育进行了研究, 窦硕增等对半滑舌鳎的食性及摄食的季节变化进行了研究, 近几年来针对半滑舌鳎繁殖生物学的研究取得了较大突破, 万瑞景等在半滑舌鳎早期发育形态特征、周丽青等在半滑舌鳎染色体核型分析以及马学坤等在半滑舌鳎性腺的分化等方面均取得较大进展。但有关半滑舌鳎性腺发育的研究尚未见报道。本文就半滑舌鳎性腺发育的组织学和产卵类型等繁殖生物学问题进行了探讨, 以期为半滑舌鳎的人工养殖技术, 以及其物种资源保护等方面提供理论依据和参考资料。 1 大、体长4032. 实验用鱼由唐山普林海珍养殖有限公司和滦南县会达水产养殖有限公司提供。雌、雄鱼共40尾, 雄鱼20尾, 其体长26.5～31.5 cm, 体重85～144 g。雌鱼20尾, 其体长32～39.5 cm, 体重320～395 g, 鱼龄两年。鱼体经测量称重后, 剖开腹部, 取出性腺并用生理盐水洗净备用。取性腺的不同部位切成小块, 用Bouin氏液固定24 h, 各级乙醇冲洗、脱水, 经二甲苯透明, 石蜡包埋, 连续切片, 片厚6～8 μm, 苏木精-伊红染色, 中性树胶封片后置Nikon YS2-H型显微镜下观察、目测微尺量度并拍照。 2 结果 2.1 腹两侧精巢的合并和输注 半滑舌鳎精巢一对位于肾脏的后面, 为一对伸长的器官。前端窄小, 后端逐渐变宽大, 背侧的精巢要比腹侧的稍大一些。属于典型的小叶状 (壶腹型) 精巢。腹背两侧的精巢在后端不合并, 并且分别向后延伸形成各自独立的输精管 (图版1) 。输精管后端通向泄殖孔。 2.2 骨鱼精巢的发育 半滑舌鳎的精巢属于小叶型精巢。观察精巢的切面, 可以看到精巢的内部有许多管状的精小叶分布。精小叶呈管状, 形状及分布不规则。在精小叶内壁分布有许多囊状的结构, 即精小囊。精小囊是由支持细胞围成的囊状结构, 形状不规则, 除精原细胞外的各期生精细胞都位于精小囊中。在一个精小叶中有多个精小囊, 每个精小囊中的生精细胞的发育都是同步的, 处在相同的发育阶段。而不同的精小囊, 其中的生精细胞的发育则不一定同期 (图版3) 。随着生精细胞的增殖和生长, 精小囊的体积明显增大, 精小囊的壁则逐渐变薄。当精小囊中的生精细胞发育成熟, 形成精子时, 精小囊就破裂, 成熟的精子从精小囊释放出来, 进入小叶腔中, 小叶腔扩大, 其中充满精子。根据硬骨鱼精巢中生殖细胞的类型, 把它们分为5类。 精原细胞:精原细胞是由原始的生殖细胞产生的, 多呈圆形或卵圆形, 体积较大。常位于精小叶内靠近基膜的部位, 其直径约为 (8±2) μm。核位于细胞中央, 大而清晰, 核径 (5±2) μm (图版4) 。 初级精母细胞:精原细胞经过分裂形成初级精母细胞。初级精母细胞分布于精原细胞内层, 体积比精原细胞的小。其形态似精原细胞, 呈圆形或椭圆形, 细胞至少, 染色很浅, 细胞直径约为 (6±2) μm。核径约为 (4±1) μm (图版4, 5) 。 次级精母细胞:初级精母细胞经细胞分裂产生次级精母细胞。次级精母细胞呈圆球形, 体积比精母细胞小, 细胞质比初级精母细胞进一步减少, 胞径为 (5±1) μm。核径在 (2±0.5) μm左右。核内结构难以分辨 (图版4, 5) 。 精细胞:次级精母细胞再次分裂形成精细胞, 精细胞的胞径约为 (3±1) μm。核径更小, 在 (1±0.5) μm左右。核内染色之染色更深, 在光镜下仅见其强嗜碱性的核, 而看不到明显的细胞质 (图版5) 。 精子:精细胞经变态发育成为成熟的精子, 并充满小叶腔。成熟精子头部呈圆颗粒状, 直径 (1±0.1) μm嗜碱性极强, 染上深蓝色。在高倍镜下能观察到其核凹的存在, 其尾部只隐约可见成群的精子在小叶腔中呈涡流状分布 (图版5, 6) 。 2.3 卵巢的大小数量 卵巢位于腹腔的后部, 在肾脏的后面, 为成对分布的狭长状器官, 其颜色为淡黄色。卵巢由前往后逐渐增粗。大小略微不同, 通常情况下, 分布在背部的要比在腹部的大。并且, 卵巢的体积一般比同时期精巢要大。同精巢一样, 腹背两侧的卵巢在后端不合并, 并且分别向后延伸形成各自独立的输卵管, 开口于泄殖孔 (图版2) 。 2.4 核仁的形态和发育时期 半滑舌鳎卵巢为有被膜