《甘蔗赤腐病抗病性鉴定技术规程》.pdfVIP

ICS 65.020 CCS B15 CI 团 体 标 准 T/CIXXX—2023 甘蔗赤腐病抗病性鉴定技术规程 Technicalregulationsfor diseaseresistanceidentification ofsugarcanered rot disease （征求意见稿） 2023-X-X发布 2023-X-X实施 中国国际科技促进会 发 布 I T/CIXXX—2023 甘蔗赤腐病抗病性鉴定技术规程 1 适用范围 本文件规定了甘蔗赤腐病抗病性鉴定的术语和定义、症状及流行特点、材料准备与种植、 接种病原、接种液制备、接种方法、病情调查、抗病性评价。 本文件适用于甘蔗属及其近缘属中的种质资源、甘蔗属种间杂交种对甘蔗赤腐病抗病性 的人工接种鉴定与评价。 2 规范性应用文件 本文件没有规范性引用文件。 3 术语和定义 甘蔗赤腐病sugarcane red rot disease 由镰孢炭疽菌Colletotrichumfalcatum 侵染甘蔗叶片中脉、蔗茎、蔗头引起叶片中脉、 蔗茎、蔗头腐烂坏死的一种流行性真菌病害。 4 症状及流行特点 甘蔗赤腐病的症状及流行特点参见附录A。 5 材料与种植 5.1 材料选择 选择无病的健壮蔗株。 5.2 对照材料 鉴定材料中加入甘蔗品种粤糖93-159、新台糖 1号作感病对照，粤糖86-368、柳城 05-136作抗病对照。 5.3 材料处理 分别切成双芽段，共80 个芽，用70%噻虫嗪水分散剂和50%多菌灵可湿性粉剂 1：800 液浸种5 min～10 min。 5.4 材料种植 种植时间为2 月～3 月，以完全随机区组设计种植，每份材料各种植4 行，4 次重 复，行距1 m、行长5 m，每行20 个芽，共80 个芽，常规栽培管理。 2 T/CIXXX—2024 6 接种病原 在超净台中将带有赤腐病症状叶片于病健相间部位切下长宽5mm 叶组织，用75%酒精 浸泡20 s 消毒，再将其浸泡于0.2%次氯酸钠中，摇动使其充分接触消毒液1min，用无菌水 冲洗3遍，放置于无菌滤纸上吸干表面水分，然后将叶组织平放在加有50mg/mL 氯霉素 PDA 培养基 （马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂粉20g，蒸馏水定容至 1000mL）表面，将 培养皿倒置，放于29℃恒温培养箱内培养2~3d。菌落长出后，用接种针挑取菌落边缘菌丝 接种于 PDA 培养基于28℃恒温培养 10~14 d。 7 接种液制备 取5培养的接种病原加入灭菌双蒸水稀释混匀，用双层纱布过滤，滤液即为孢子悬浮 6 液。搅拌均匀后用血球计数板计数法配制成 1×10 个孢子/mL 用于接种，现配现用。 8 接种方法 8.1接种方法选择 接种方法可选用田间钻孔接种法或可控条件接种法。 8.2 田间钻孔接种 供试材料5~6 月株龄，选择健康蔗株进行田间钻孔接种。用直径8 mm 钻孔器在地面上 第2 或第3 节间中部钻孔 （直径8 mm，深12 mm），用移液枪将100 μL 接种液滴入钻孔中， 取厚湿无菌脱脂棉封孔，再用无菌保鲜膜包裹住，每份