紫外可见分光光度法培训ppt课件.pptxVIP

(UV-VIS spectrometry) 周正雄 第13章 紫外可见分光光度法 目 一、分子光谱概述 二、紫外可见光谱 三、朗伯－比尔定律 四、紫外可见分光光度计 五、无机与有机分析应用 六、仪器操作 七、仪器维护保养 录 物质分子内部三种运动形式 电子相对于原子核的运动 --- 电子能级 (Ee) 原子核在其平衡位置附近的相对振动 --- 振动能级 ( Ev ) 分子本身绕其重心的转动 --- 转动能级 (Er) E＝ Ee+ Ev+ Er ΔΕeΔΕvΔΕr 一、概述 – 分子光谱 3 一、概述 – 分子光谱 E＝ Ee+ Ev+ Er ΔΕeΔΕvΔΕr 电子能级 振动能级 转动能级 4 远红外光谱(分子转动光谱) 红外光谱(分子振动光谱) 紫外—可见光谱(分子的电子光谱) ΔΕr 0.005~0.050eV ΔΕv 0.05~1 eV ΔΕe 1~20eV 一、概述 – 分子光谱 5 g -X-射线 紫外 可见 红外 微波 无线电 电磁波谱 近红外 核磁共振 真空紫外 波长 200 400 800 3200(nm) 波长越短，能量越高 紫外吸收光谱：电子跃迁光谱 吸收光波长范围200~400 nm (近紫外区) ，可用 于结构鉴定和定量分析。 可见吸收光谱：电子跃迁光谱 吸收光波长范围400~780 nm ，主要用于有色物质的定量分析。 二、紫外可见光谱 选择性较好 通用性强 价格低廉 灵敏度高 准确度较好 操作简单 特点 7 吸收曲线与最大吸收波长入max 用不同波长的单色光照射，测吸光度 二、紫外可见吸收光谱 不同浓度的溶液，测吸光度 8 吸收光谱的波长分布是由产生谱带的跃迁能级间 的能量差所决定，反映了分子内部能级分布状况， 是物质定性分析的依据。 同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度 最大处对应的波长称为最大吸收波长 λmax 不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似 λmax不变。而对于不同物质，它们的吸收曲线 形状和λmax则不同。 吸收谱带的强度与该物质分子吸收的光子数成正 比，是物质定量分析的依据。 二、紫外可见吸收光谱 9 分子中外层价电子跃迁的结果(三种)：形成单键 的σ电子、 形成双键的 π电子、 未成键的n电子 分子轨道理论：一个成键轨道必 定有一个相应的反键轨道。通常 外层电子均处于分子轨道的基态， 即成键轨道或非键轨道上。 当外层电子吸收紫外或可见辐射后，就从基态向激发态(反键 轨道)跃迁。主要有四种跃迁，所需能量 Δ Ε大小顺序为： n→ π＊ π→ π＊ n→ σ＊ σ→ σ＊ 有机化合物的紫外—可见吸收光谱 10 . 能量很大 . 吸收光谱在真空紫外区 . 多为饱和烃 *跃迁 125 nm 135 nm 甲烷 乙烷 11 化合物 入max cmax 1480 H2O 167 CH3OH 184 150 CH3Cl (CH3)2O 173 184 200 2520 . 所需能量小于 *跃迁(150-250 nm ) . 若饱和烃中的氢原子被氧、氮、卤素等原子或基团所取代， 由于这些原子中含有n 电子，可以发生n * 跃迁 .摩尔吸光系数比较小，一般在100-3000 L / mol cm n * 跃迁 • * 和 n * 跃迁能量低(200 nm) • 含有不饱和键的有机分子易发生这类跃迁 C=C; C=C ; N=N ; C=O • 有机化合物的紫外-可见吸收光谱分析多以这两 类跃迁为基础 • * 比 n * 跃迁几率大 100-1000 倍 • *跃迁吸收强， ~ 104 • n * 跃迁吸收弱， 500 * 和 n * 跃迁 13 生色团： 从广义来说，所谓生色团，是指分子中可 以吸收光子而产生电子跃迁的原子基团。但是，人 们通常将能吸收紫外、可见光的原子团或结构系统 定义为生色团。 紫外光谱中常用的术语 14 助色团 助色团是指带有非键电子对的基团，如 -OH、 -OR、 -NHR、-SH、-Cl、-Br、-I等，它 们本身不能吸收大于200nm的光， 但是当它们与 生色团相连时，会使生色团的吸收峰向长波方 向移动，并且增加其吸光度。 紫外光谱中常用的术语 15 助色团 ——基团本身无色，但能增强生色团颜色 为含有n电子，且能与 电子作用，产 生n 共轭 苯 184 ( *) 254 2