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土壤有效磷测定方法的研究 氮、磷、钾、钙等许多因素是植物生长发育不可或缺的。这些物质对植物的生长发育有显著的需求，不能替代它们。过多地使用某种营养元素, 不仅会对作物产生毒害, 还会妨碍作物对其它营养元素的吸收, 引起缺素症。例如磷过多会降低钙、锌、硼的有效性。土壤有效磷的测定, 不仅可了解近期磷素供应水平状况, 而且是植物合理施肥的依据之一。因此, 推广测土配方施肥, 大力宣传植物所需营养元素的重要性及测定土壤营养元素的含量迫在眉睫。现就土壤有效磷的测定方法介绍如下: 1 碳酸氢钠的提取 碳酸氢钠提取采取钼锑抗比色法。石灰性土壤中的有效磷, 多以磷酸一钙和磷酸二钙状态存在, 可用p H值8.50, 浓度0.05mol/L的碳酸氢钠提取到溶液中。磷酸一钙可直接溶于碳酸氢钠水溶液中, 而磷酸二钙与碳酸氢钠反应成为磷酸钠而溶解, 钙则成为碳酸钙的沉淀而析出。其反应式为: 土壤被浸提出的磷量与土液比、液温、振荡时间及方式有关。测定时土液比为1:20, 浸提液温度为25℃, 振荡提取时间为30min。浸出液中的磷采取钼锑抗比色法测定, 用紫外可见分光度计测定。该方法适用于测定含碳酸盐土壤的有效磷含量, 也可用于测定中性土壤的有效磷含量。 2 振荡机红柳河 (1) 紫外可见分光光度计; (2) 恒温振荡机或往返式振荡机; (3) 带盖塑料瓶; (4) 酸度计; (5) 具塞; (6) 比色管25m L; (7) 150m L试剂三角瓶, 3 相关试剂的制定 3.1 碳酸氢钠的制备 将活性炭粉先用1:1盐酸浸泡24h, 然后移至平板, 抽气过滤, 用水淋洗4～5次, 再用浸提剂浸泡24h, 在平板漏斗上抽气过滤, 用水洗尽碳酸氢钠, 并至无磷为止, 烘干备用。 3.20. ph和溶液配制 称取42g碳酸氢钠溶于约950m L水中, 用10%氢氧化钠溶液调节p H至8.50 (用酸度计测定) , 用水稀释至1L。贮存于聚乙烯或玻璃瓶中备用。如贮存期超过20d, 使用时须重新校正p H值。 3.30. 30%酒石酸锑钾水溶液 称取0.30g酒石酸锑钾 (k Sb OC4H4O6·1/2H2O) 溶于水中, 稀释至100m L。 3.4 浓硫酸水剂。在水中最 称取10g钼酸铵[ (NH4)6Mo7O24.4H2O]溶于300m L约60℃的水中, 冷却。另取181m L浓硫酸 (密度1.84) , 缓缓注入约800m L水中, 搅匀, 冷却。然后将稀硫酸注入钼酸铵溶液中, 搅匀, 冷却。再加入100m L 0.30%酒石酸锑钾溶液, 最后用水稀释至2L, 盛于棕色瓶中备用。 3.5 鳌锑贮备液样品 称取0.50g抗坏血酸 (左旋, 旋光度+21～22°) , 溶于100m L钼锑贮备液中。此试剂有效期在室温下为24h, 在2～8℃冰箱中可贮存7d。 3.61 标准溶液的配制 准确称取经105℃烘干2h的磷酸二氢钾 (优级纯) 0.4390g, 用水溶解后, 加入5m L浓硫酸, 转入1L容量瓶中, 用水定容, 即为100ug/ml磷标准贮备液, 在冰箱中可以长期保存。 3.75 ug？标准溶液 吸取5m L磷标准贮备液放入100m L容量瓶中, 加水定容即为5ug/m L磷标准溶液, 此溶液不宜久存。 4 试验步骤和标准曲线的绘制 4.1 络合式振荡 称取通过2mm孔径筛的风干试样2.50g (精确至0.01g) , 置于150m L带盖塑料瓶中, 加入约1g无磷活性炭, 加入25±1℃的浸提剂50m L, 在25±1℃的室温下, 于恒温往复式振荡机上用160～200r/min的频率振荡30min, 立即用无磷滤纸和干燥的漏斗过滤于干燥的150m L具塞三角瓶中。吸取滤液10m L于25m L比色管中, 加入显色剂5m L (小心慢加, 慢慢摇动, 防止产生的CO2喷出瓶口) 。等CO2充分放出后, 再以水稀释至刻度, 充分摇动, 加水定容。在室温高于20℃处放置30min, 同时作空白试验 (以10m L浸提剂代替土壤浸提液同上处理) 为参比, 用1cm光比色皿在波长700nm比色, 以空白试验调零点, 上机测定, 读取吸光度值和浓度值。 4.2 标准系列溶液的制备 分别吸取5ug/m L磷标准溶液0m L, 0.50m L, 1m L, 1.50m L, 2m L, 2.50m L, 3.00m L于25ml比色管中, 加入浸提剂10m L, 显色剂5m L, 慢慢摇动, 使CO2逸出, 再以水稀释至刻度, 充分摇动, 逐尽CO2, 定容, 既为含磷0.00, 0.10, 0.20, 0.30, 0.40, 0.50, 0.60 ug/m L磷的标准系列溶液。在室温高于20℃处放置30min后, 进行比色, 测量吸光度值和浓度值, 绘制标