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……细胞色素c在体内还起到另一个非常重要的功能:抗氧化功能[2-5]。2003年,我们利用呼吸链酶系中细胞色素c的拆合和重组实验,在世界上首次提出了“细胞色素c介导的电子漏旁路途径”这一概念[4],证明了细胞色素C在抗氧化体系中具有的举足轻重的地位。…… 举 例 1. 已有的结论和可靠性 4. 课题的针对性和先进性; 综上所述,本研究具有较强的理论意义和较好的可行性。将蛋白质分子结构、分子进化、细胞内氧化水平和物种的寿命整合在一起,不仅大大拓展了细胞色素C作为单个分子对整体生物学的贡献,也为系统生物学的研究提供了一个新的凡例,有助于揭示生物体在进化过程中的复杂变化。我们认为,该项设想对于人体的疾病和衰老的研究也具有相当的价值。从细胞色素C的有效结构入手,可以重组一系列具有特定活性的小分子,从而探讨延缓衰老、预防老年性退行性疾病以及其他一些重大的生理病理问题。 举 例 6. 参考文献。注意格式。 ……该理论的主要证据早期来自于体外实验,但近期在分子水平也有报道,比如秀丽隐杆线虫(C. elegans)的寿命与体内ROS的水平息息相关[11, 12],对ROS敏感的果蝇突变体可以大幅度降低突变果蝇的寿命[13, 14]等。该理论可以很好的解释寿命长的哺乳动物体内ROS水平较低的事实。Wright等人的实验说明,由线粒体产生的自由基所导致的神经退行是不同物种的寿命不同的主要因素[15]。…… 12. Larsen, P. (1993) Aging and resistance to oxidative damage in Caenorhabditis elegans, Proc Natl Acad Sci USA 90, 8905-8909 13. Helfand, S. and Rogina, B. (2003) Genetics of aging in the fruit fly, Drosophila melanogaster, Annu. Rev. Genet. 37, 329-348 14. Parkes, T., Kirby, K., Phillips, J. et al (1998) Transgenic analysis of the cSOD-null phenotypic syndrome in Drosophila, Genome 41, 642-651 三、课题研究目的和意义 ?课题的焦点:具体; ?应用基础研究:科学意义和应用前景; ?要解决的具体问题,本课题的预定目标。 四、研究方案 研究内容 包括研究的对象、研究的问题。 研究哪几个方面?有哪几个层次?检测哪几个指标?等等…… 举例: 研究内容: (一)线粒体生物合成及融合/分裂动态平衡在高脂膳食诱导大鼠骨骼肌胰岛素抵抗过程中的作用(in vivo): 1. 在高脂膳食诱导大鼠IR进程中,骨骼肌线粒体融合/分裂相关基因表达(mRNA和蛋白)及线粒体网络化结构的变化; 2. 在高脂膳食诱导大鼠IR进程中,骨骼肌线粒体融合/分裂改变与氧化磷酸化功能关系。 (二)有氧运动预防高脂膳食诱导大鼠胰岛素抵抗的线粒体生物合成及融合/分裂动态平衡变化机制(in vivo): 1. 有氧运动干预过程中线粒体融合/分裂相关基因表达(mRNA和蛋白)及线粒体网络化结构的变化; 2. 有氧运动干预过程中骨骼肌线粒体融合/分裂改变与氧化磷酸化功能关系。 四、研究方案 研究方法 通过参考文献,调查实验条件选定适当的设计方案回答“怎样做?” 原则:既具有较高的论证强度,又要切实可行;选择恰当的研究对象;设置合理的对照(对比研究),分组。 举例: 1. 实验动物wistar 雄性大鼠(120 只) 2.实验动物分组 实验动物分为4个组:对照组、高脂组、运动组和高脂运动组。高脂饲料配方采用Research Diet Inc 的高脂饮食配方(热量比为:蛋白质20%,碳水化合物20%,脂肪60%)。有氧运动组采用~70%VO2max负荷运动强度,每天运动60~90min,每周训练5天。 3. 在体(in vivo)研究方法 实验样本:血清、骨骼肌。骨骼肌区分I和II型肌纤维类型:1)股外侧肌和比目鱼肌;2)腓肠肌。 3.1 血液:葡萄糖、游离脂肪酸、胰岛素、糖耐量(胰岛素敏感性)测定 喂养期间每2周监测大鼠体重和血糖。 大鼠处死前,测空腹血糖、空腹血胰岛素和血脂水平,计算胰岛素抵抗指数,同时进行口服葡萄糖耐量测定;大鼠处死后,测内脏脂肪含量. …… 技术路线及实验方案 具体操作程序。按时间和实验顺序来安排,可用
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