液相色谱-串联质谱法测定饮用水中的丙烯酰胺.docxVIP

液相色谱-串联质谱法测定饮用水中的丙烯 酰胺 张凌云1刘波1徐荣1 张凌云1刘波1徐荣1卢益新1 谭美凌1赵宇1伍子同2 （1深圳市水务集团水质监测站 深圳 518000; 2武汉理工大学理学院化学系 武汉 430070） 摘要 建立了用液相色谱-串联质谱法测定饮用水中丙烯酰胺的方法。该法使用Cole-Parmer PTFE滤膜过滤 样品，采用Acquity HSS T3（1.8um,2.1X50mm）柱分离，以0.1%甲酸和甲醇为流动相（体积比95： 5）分离。 采用UPLC/MS/MS电喷雾电离正离子模式（ESI+）,多反应检测（MRM）,以外标法定量分析。该方法在0.10 ug?l-1至U 0.60ug?l-1有良好线性范围。最低检测下限（LOD） 0.10ug? 1-1。加标回收率范围为 88.9%-106.7%。相对标准偏差均低于8.2%。方法适用与水中丙烯酰胺的测定，具有灵敏度高、重现性好的 特点，在水质监测中有重要作用。 关键词 质谱,LC/MS/MS,丙烯酰胺,饮用水，外标法。 1引言 丙烯酰胺（Acrylamide）是一种水溶性小分子白色结晶状固体（图1），溶于水，乙醇等 极性有机溶剂，是聚丙烯酰胺的单体。聚丙烯酰胺在水处理中用作絮凝剂，在饮用水的处理 中有助于水的澄清。丙烯酰胺已被国家癌症中心（IARC ）列为IIA类致癌物［1］，它的a，B -不饱和氨基系统非常容易与亲核物质通过迈克尔加成（Michael addition）发生化学反应， 从而影响蛋白质的正常功能而致病［2］。急性毒性实验证明丙烯酰胺有神经毒性［3］、生殖、 发育毒性［4］。动物实验证明丙烯酰胺可导致遗传物质的改变和癌症的发生。由于丙烯酰胺单 体可导致生物遗传物质的改变及引起癌症，并且有神经毒性，世界卫生组织规定饮用水中的 丙烯酰胺最高限量不超过0.5ug?l-1 ［5］.因此，有必要建立一种合适的测定方法以检测饮 用水中的低含量丙烯酰胺。丙烯酰胺极性很强，在常温下易分解［6］。目前，国内外测定痕量 丙烯酰胺的方法主要有高效液相色谱法、气-质联用法及衍生化法［7-9］,但不适用于测定水中 的丙烯酰胺。而测定水中痕量丙烯酰胺有液相色谱-串联质谱联用法［10］、高效液相色谱法 ［7］。但是这些方法测定步骤繁琐、灵敏度低、不能满足大多数实验室的检验要求。 本论文陈述了使用液相色谱-串联质谱法测定饮用水中的丙烯酰胺的方法，该法有前处 理简单、测定周期短、灵敏度高、重现性好等优点。 /H2 分子昆；71.09 \ / 化学为 CHrCHCCHH, / 爆点： H2N 沸点： 图1丙烯酰胺的结构式与化学性质 Fig.1 Chemical structure and properties of acrylamide 2实验部分 2.1实验仪器、试剂与样品 2.1.1仪器 Waters Acquity超高液相色谱仪（配备自动进样器、二元梯度泵）；Acquity HSS T3（1.8 u m,2.1X50mm）色谱柱；Micromass Quattro Premier XE 四级杆串联质谱仪；Barnsted 超纯 水器；AND AF-2000 十万分之一电子天平。 1. 2试剂 纯水制备自Barnsted超纯水器，电导率为18.2MQ,TOC0.2PPM，并去热源；丙烯酰胺固 体标准品购自Cxbio Biotech.；丙烯酰胺液体标准品浓度1000ug?ml-1，溶剂为甲醇，购 自美国百灵威；甲醇（HPLC级，德国Merck公司） 2实验条件 2. 1色谱条件 色谱柱：Waters Acquity HSST3（1.8um,2.1X50mm）;柱温：30°C；流动相：甲醇-水（0.1% 甲酸），体积比5： 95；进样量10ul；流速：0.25ml?min-1。 2.2.2 质谱条件 离子源：ESI+模式；毛细管电压：3.50kV;锥孔电压：20V;二级锥孔电压：5V;源温：120C ; 脱溶剂温度：350C；脱溶剂气流速：400L?h-1；定量方式为多反应检测（MRM）模式，定量 离子为丙烯酰胺（71.654.8），定性离子为丙烯酰胺（71.643.9），碰撞能量均为8eV。 2. 3样品预处理 分析前，样品于4C避光保存。分析时，样品用Cole-Parmer PTFE 0.2um滤膜过滤。 2. 4定性及定量 选择m/z71.654.8作为样品的定量离子，m/z 71.643.9作为样品的定性离子；以m/z 71.654.8的峰面积比对丙烯酰胺的质量浓度作标准曲线。以保留时间和m/z71.643.9的响 应强度比作为定性标准。 3结果与讨论 1实验条件优化 1. 1液相色谱条件的优化 丙烯酰胺有较强的水溶性，因此选择纯水作为主要流动相，为了增加电离效果可