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淀粉酶及其同工酶 分类 血清淀粉酶同工酶分成S(唾液型)型和P(胰型)。 关于淀粉酶同工酶的研究 除了胰腺、腮腺疾病外还有一些疾病如胆囊炎、小肠梗阻、消化道溃疡穿孔、异位妊娠、 恶性肿瘤等也可出现血清淀粉酶活性增高，可能的原因之一就是这些患病组织含有淀粉酶， 在炎症时通过各种途径入血引起血清淀粉酶活性增高。但至今国内外对于各种人体组织淀粉 酶含量的研究报告甚少。我们收集了部分正常人体组织，经匀浆后测出匀浆上清液中的总淀 粉酶(Amy)活性，并用抑制法测定唾液型和胰型淀粉酶同工酶(S-Amy和P-Amy)，从而为探 讨临床上血清淀粉酶增高机制提供了实验依据。 1材料 1.1 仪器 Beckman Clinical System 700型生化分析仪。高速台式离心机，KD-300 组织匀浆器。 1.2试剂 淀粉酶活性测定采用上海长征公司淀粉酶试剂盒(PNPG4法)。淀粉酶抑制 物，为小麦唾液淀粉酶抑制蛋白，由上海长征医院临床酶学研究室^纯化和提供⑴。 1.3材料和样品采集 意外死亡的正常人3名，2名男性分别为25岁、28岁，1名女 性55岁，于死亡后6h内采集样品，取胰腺、腮腺、胃、空肠、回肠、输卵管、子宫、肺、 胆囊、骨骼肌和睾丸组织，各取20 g左右。 2方法 2.1组织匀浆液的制备 每种组织重复取样6次，每次取500 mg，先用生理盐水清洗， 加入pH 7.4的0.01 mol/L Na HPO -NaH PO缓冲液2 ml后置组织匀浆器中进行匀浆。匀浆 2 4 2 4 器转速为15 000 r/min，时间为30 sX4次。将匀浆液3 000 r/min离心10 min。离心完毕后，吸取上清液进行总淀粉酶和淀粉酶同工酶测定。此步可使95%以上的细胞破碎并释放出淀粉酶⑵。 2.2淀粉酶及其同工酶测定3】。 2.2.1测定参数 温度37° C，波长405 nm，延迟时间60 s，测定时间120 s，因数 7000。 2.2.2淀粉酶总活性测定50 p l生理盐水加10 p l匀浆上清液加500 p l底物液， 按上述测定参数测定，如果总淀粉酶活性＞1 000 U/L，则用生理盐水稀释后再进行测定。 2.2.3胰淀粉酶活性(P-Amy) 50 p l抑制剂加10 p l匀浆上清液，37° C温育10 min，再加入500 p l底物液，按上述参数测定，得剩余Amy活性(R-Amy)。结果计算及校正: 总 Amy(U/L)=7000XA A/min。R-Amy(U/L)=7000 X 抑制后△ A/min(U/L)。由于该抑制剂对 S-Amy 的抑制率为 97.5%，对 P-Amy 的交叉抑制率为 20%，故 P-Amy(U/L)=1.29R-Amy —0.0323 X 总 Amy。S-Amy(U/L)=总 Amy — P-Amy。 3结果与讨论 结果见表1与表2。 表1各脏器组织淀粉酶及其同工酶活性(?「±s) 脏 器 总 Amy(U/g) P-Amy(U/g) S-Amy(U/g) P-Amy/总 Amy(%) 胰腺 (2.1 + 0.4) X106 (2.1±0.4) X106 0 100 腮腺 (6.6±0.6) X 106 0 (6.6±0.6) X 106 0  骨骼肌 (6.7± 1.9) X 10-2 0 (6.7+1.9) X 10-2 0 输卵管 (2.5 + 0.7)X102 0 (2.5 + 0.7) X102 0 子宫 (1.7 + 0.5)X102 0 (1.7 + 0.5) X102 0 睾丸 (3.7 + 0.8)X103 (3.7 + 0.8)X103 0 100 空肠 (6.3+1.8)X102 (5.6+1.4)X102 (6.5+1.8) X 10 89.7 + 3.2 回肠 (3.2 + 0.5)X102 (2.4 + 0.5)X102 (7.7 + 0.8)X10 76.0 + 5.6 胃 (8.3+1.5)X102 0 (8.3+1.5) X102 0 胆囊 (4.7+1.2)X102 (2.1 + 0.7) X102 (2.6 + 0.9)X102 42.5 + 8.6 肺 (2.7 + 0.9)X102 0 (2.7 + 0.9)X102 0 血清(U/ml) 0.086 + 0.020 0.027 + 0.065 0.059 + 0.018 33.0 + 6.9 表2人组织相对于血清中淀粉酶的活性倍数 组织 相对倍数 组织 相对倍数 胰腺 2.5X107 腮腺 8.2X107 胃 9.6X103 空肠 7.3X103 胆囊 5.5X103 回肠 3.7X103 睾丸 4.3X104 输卵管 3.1X103 子宫 1.7X103 骨骼肌 0.78 肺 3.1X103 本文测定的