基于网络药理学探究痛泻要方治疗溃疡性结肠炎的作用机制.docxVIP

基于网络药理学探究痛泻要方治疗溃疡性结肠炎的作用机制 　　【摘要】目的：运用网络药理学探讨痛泻要方治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法：通过TCMSP收集痛泻要方中4味中药的化学成分，并通过文献资料加以补充；利用TCMSP以及SwissTargetPrediction数据库获取活性成分的作用靶点；然后从GeneCards、DisGeNET数据库对UC靶点进行检索和筛选，与痛泻要方的活性成分靶点进行交集，将共同靶点作为研究靶点，导入STRING数据库构建PPI网络；通过Cytoscape3.7.2软件构建痛泻要方“单味药-活性成分-作用靶点”网络关系图；运用DAVID数据库对药物-疾病共同靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析，分析其参与的生物功能与代谢通路，预测痛泻要方治疗UC的潜在作用机制。结果：在痛泻要方中，共筛选出53个与UC相关的潜在活性成分，并得到168个潜在作用靶点，其中白芍的芍药苷（paeoniflorin），防风的汉黄芩素（wogonin）可能是痛泻要方治疗UC的关键成分，而靶点环氧化酶-2（PTGS2）与活性成分的关联最多，提示这可能是重要的治疗靶点。GO和 KEGG富集分析结果表明，痛泻要方发挥药效涉及多方面的分子功能与生物过程，可能通过癌症通路、肿瘤坏死因子信号通路、Toll样受体信号通路和磷脂酰肌醇3-激酶信号通路等多条通路协同治疗UC。痛泻要方可显著升高UC大鼠 PPAR-γ（P＜0.05）的表达量，验证了网络药理学的部分预测结果。结论：基于网络药理学分析了痛泻要方治疗溃疡性结肠炎的主要靶点和信号通路，探索痛泻要方是通过多成分、多靶点、多通路发挥治疗作用的，为痛泻要方进一步临床应用和实验研究提供了理论基础。 【关键词】痛泻要方；溃疡性结肠炎；网络药理学；作用机制 前言 　　溃疡性结肠炎（UlcerativeColitis,UC）是一种慢性非特异性炎症性肠病，以结肠和直肠黏膜弥漫性炎症为特征，病变多从直肠开始，可蔓延至回肠。多发于青壮年，无明显性别差异，具有病程长、易反复发作的特点，严重者可导致结肠癌，严重影响了患者的生活质量，已成为当代的疑难杂症之一。UC是北美与欧洲的常见病，本世纪以来，随着我国经济的发展，社会整体生活水平的提高，UC的发病率呈明显逐年上升趋势。现代医学对UC的发病机制尚未明晰，有研究表明肠道炎症和肠黏膜损伤是主要诱因[1-2]，过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR-γ）的表达和NF-κB通路的激活与UC的发病密切相关[3-4]。 　　痛泻要方源自元代朱震亨《丹溪心法》[5]，书中记载：“治痛泻：炒白术三两，炒芍药二两，炒陈皮两半，防风一两。”痛泻要方是治疗脾虚肝郁之痛泻的经典古方，由上述四味中药组成，四药合用可以补脾胜湿止泻，柔肝理气止痛，有补脾泻肝之风。随着对痛泻要方研究的深入，对其治疗UC作用机制的明确将更进一步促进新药开发与临床治疗。　　网络药理是在系统生物学与计算机技术高速发展的基础上发展起来的，通过网络分析，系统综合地观察药物与疾病网络的干预影响，与中医治病的整体观和辩证论治的特点殊途同归[6]。目前，虽有关于痛泻要方治疗UC的作用机制相关的报道，但仍缺少从中医整体观和辩证论治角度对痛泻要方作用机制研究。本文将运用网络药理学的研究策略，筛选出痛泻要方的活性成分，预测痛泻要方治疗UC的潜在作用靶点，以期对痛泻要方的进一步临床应用和药 理研究提供理论基础。 材料 药物 　　购买康美药业股份有限公司生产的炒白术、炒白芍、炒陈皮、防风饮片，经过广东药科大学中药学院马鸿雁副教授鉴定为2015年版《中国药典》正品。 动物 　　SPF级SD大鼠20只雌，20只雄，体重均为（200±20）g，南方医科大学实验动物中心养殖，合格证号SCXK（粤） 2011-0015 。 试剂及仪器 　　 　　 试剂 公司 批号 2 , 4, 6-三硝基苯磺酸（TNBS） 美国Sigma公司 2013-16-2 一抗PPAR-γ 北京博奥森生物工程开发有限公司 SP免疫组化染色试剂盒 北京博奥森生物工程开发有限公司 DAB染色试剂盒 北京博奥森生物工程开发有限公司 柳氮磺胺嘧啶（SASP） 湖北拓楚慷元医药化工有限公司 　　 仪器 公司 美国伯乐Bio-Rad型凝胶成像仪 北京赛百奥科技有限公司 Sigma3K15型通用台式高速离心机 北京博励行仪器有限公司 DW-HL538型中科美菱超低温水箱 合肥美菱股份有限公司 泰盟BI-2000型图像分析系统 成都泰盟软件有限公司 BPN-50CH型CO2培养箱 上海一恒科学仪器有限公司 2.4 数据库 　　 　　 Instrument Company TCMSP /tcmsp.php SwissTargetPrediction h