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igf-5抑制小鼠腹腔动脉粥样硬化反应的实验研究
麻杆是一种润下的药。由于其补充效应,它经常被用来治疗老年人和身体虚弱的人。然而火麻仁的其它中医功效却被人们所忽视,例如火麻仁去风痹皮顽《本草拾遗》,治关节不通……通血脉《食疗本草》,治跌打损伤,去瘀血生新血《分类草药性》。为此我们用动物实验探讨火麻仁的镇痛、抗炎作用及对血栓形成和凝血功能的影响
火麻仁购自陕西省药材公司南院门中药店,经我所生药研究室鉴定为桑科植物大麻Cannabis sativa L.干燥成熟种仁。将其碾碎,用75%乙醇每天热回流提取8 h,共3次,提取液减压回收乙醇后,在水浴上浓缩成1 g生药/ml,供药理实验用,乙柳酰胺(ethenzamide)系陕西省医药工业研究所产品。阿斯匹林系无锡华瑞制药有限公司产品,角叉菜胶系辽宁省药物研究所产品。依文思蓝系上海新中化学厂产品。华法令(warfarin)系英国Glaxo集团专门销往中国的产品。活化部分凝血酶时间(KPTT)试剂盒系中国医学科学院血液学研究所血栓与止血研究室产品。凝血活酶(兔脑粉)系上海市医学化验所试剂厂产品。BT87—2型实验性体内血栓形成测定仪系包头医学院心血管研究室制造。ICR小鼠由西安医科大学实验动物研究中心提供。SD大鼠由我院动物研究室提供。
2 方法和结果
2.1 血栓形成时间及凝血时间检测
SD大鼠32只,♀♂各半,体重(220±55) g,分为4组,每组8只,分别ig火麻仁3 g/kg、10 g/kg,华法令0.01 g/kg和自来水10 ml/kg,每天1次,连续3d。末次给药后45 min,乌拉担麻醉,切开颈部皮肤,分离左颈总动脉,将BT87—2型实验性体内血栓形成测定仪的刺激电极和温控控头钩挂于颈总动脉,用2.0 mA直流电刺激300 s,温度传感染器监测血管表面温度变化,当动脉内形成血栓时,引起血管远端温度突降时,仪器报警并自动记录时间。从刺激结束到温度突降所需时间即为血栓形成时间。然后剪断右侧颈总动脉取血,测定凝血时间及制备血浆,分别用白陶土法测定大鼠的部分凝血活酶时间(KPTT)及用兔脑粉法测定凝血酶原时间(PT)。血栓形成时间超过700 s者,按700 s计算。凝血酶原时间出现不凝者按80 s计算,用表示各组数据,序值法检验判定组间有否显著性差异。对这4项指标还进行时间延长率计算:即(给药组时间一自来水组时间)÷自来水组时间×100%。结果表明(表1)阳性药华法令都能明显延长这4项指标。火麻仁都无明显作用,仅大剂量组(10 g/kg)有延长血栓形成时间(延长30.1%)和凝血时间(延长37.2%)倾向。
2.2 单次给药后小鼠扭体次数t
ICR小鼠27只,♀♂皆用,体重(19.3±1.6) g,分为3组,每组9只,分别ig火麻仁5、15 g/kg及自来水,1 h后每只小鼠ip 0.7%乙酸10 ml/kg,5 min后开始计算10 min内的扭体反应次数。数据进行组间t检验,并计算抑制率:(自来水组扭体次数一给药组扭体次数)÷自来水组扭体次数×100%。结果自来水对照组的扭体次数为45±16次,火麻仁5、15 g/kg组分别为19±14(P0.01)和27±21(P0.05),抑制率分别为57.8%和40.0%。
2.3 对小鼠扭尾刑期的影响
ICR小鼠40只,♀♂各半,体重(21.1±2.7) g,分为4组,分别ig火麻仁5、15 g/kg、乙柳酰胺0.1 g/kg或自来水。按文献方法测定给药前每只小鼠尾巴在(50±0.5)℃水中发生甩尾反应的潜伏期作为正常痛阈。服药后0.5 h、1h、2h、3h再次测定甩尾潜伏期。对各组小鼠每个时相的潜伏期变化值(即药后与药前痛阈之差值)进行组间t测验。从表2可以看出火麻仁不明显延长热痛刺激甩尾反应潜伏期。
2.4 膨胀值的测定
ICR小鼠40只,♀♂皆用,体重(17.9±1.2) g,分为4组,分别ig火麻仁、阿斯匹林或自来水,每天1次,连续3 d,于末次给药前用千分卡尺测量每只小鼠右耳厚度作为正常值,末次给药后0.5 h,在右耳背上涂20μl二甲苯,并分别于涂后0.5 h、1 h、2 h、3 h、4 h测量右耳厚度。致炎后的厚度减去致炎前的正常值,即为肿胀值。在同一时相进行组间肿胀值的t检验。从表3可以看出火麻仁15 g/kg组的抗二甲苯性耳肿作用稍强于阿斯匹林0.3 g/kg。
2.5 右后足跖厚度的测定
ICR小鼠40只,♀♂皆用,体重(22.4±1.4) g,分为4组,分别ig火麻仁、乙柳酰胺或自来水,每天1次,连续3d,于末次给药后立即在右后足跖SC 1%角叉菜胶50μl。用千分卡尺测量右后足跖的厚度,以致炎后厚度减去致炎前的厚度作为肿胀值,在同一时相进行组间t检验。结果表明火麻仁抗角叉菜胶性小鼠足跖肿胀作用强于乙柳酰胺0
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