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草莓组织培养快繁技术研究 草莓是蔷薇科的一种多年生草本植物。它是世界上第二个水果。在中国，草莓的种植面积也呈逐年增加的趋势，种草的种植品种也不断增加。在传统生产过程中, 草莓采用匍匐茎进行繁殖, 但长期营养繁殖和连作, 会导致植株体内各种病毒积累, 造成植株矮化、果实变化、畸形果比例增加, 严重影响草莓产量和品质。利用组织培养快速技术获得大量脱毒苗是解决这一问题的有效途径, 目前对于草莓组织培养的研究较多, 但大都只是针对某一个草莓品种建立组织培养快繁体系, 而目前草莓品种更新换代较快, 不同基因型草莓品种, 其组培快繁体系也会存在差异。因此, 有必要对目前广泛栽培的优质草莓品种进行组织培养快繁研究, 以期为优质草莓的工厂化种苗生产提供理论依据。 1 材料和方法 1.1 姬’tochicome,u 供试草莓品种为‘丰香’ (‘Toyonoka’) 、‘章姬’ (‘Tochiotome’) 、‘甜查理’ (‘Sweet Charlie’) 、‘红颜’ (‘Benihoppe’) 和‘卡姆罗莎’ (‘Camarosa’) 。 1.2 测试方法 1.2.1 培养基的诱导培养 以5个优质草莓的茎尖培养获得无菌试管苗, 经病毒检测确认为脱毒苗后, 在MS+KT 1.0mg/L+IBA 0.5mg/L的培养基上继代, 从苗龄25d左右的试管苗上切取带有生长点的幼苗, 接种到添加不同浓度的6-BA和NAA的培养基上进行诱导培养, 具体配比详见表1, 30d后统计增殖情况。 1.2.2 生根壮苗的培养 将高2cm的不定芽分切下来, 转入分别附加NAA (浓度为0.5、1.0、1.5mg/L) 和IBA (浓度为0.5、1.0、1.5mg/L) 的1/2MS生根壮苗培养基中, 以1/2MS培养基为对照, 45d后观察统计结果。 1.2.3 活性炭naa的制备 将2cm左右的草莓幼苗分别接种到附加0、0.1%、0.3%、0.5%、0.7%活性炭和1.0mg/L NAA的1/2MS培养基上。45d后观察添加活性炭对草莓生根的影响。 1.2.4 幼苗移植 2 结果与分析 2.1 其它优质草莓的增殖 由表1和图1可知, 不同激素浓度和配比对草莓的丛生芽增殖具有显著影响, ‘丰香’在MS+0.8mg/L6-BA+0.5 mg/L NAA培养基上, 其增殖系数达到16.7, 而在其它培养基上的最低增殖系数仅为6.4。不同的6-BA和NAA配比对其它4个优质草莓的增殖也具有显著影响:‘章姬’的最佳增殖培养基为:MS+1.2mg/L 6-BA+0.8mg/L NAA, 增殖系数达12.5;‘甜查理’的最佳增殖培养基为:MS+0.8mg/L 6-BA+0.8mg/L NAA, 增殖系数为11.8;‘红颜’最佳增殖培养基与‘丰香’相同, 增殖系数为13.2;而‘卡姆罗莎’的最佳增殖培养基为MS+1.2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA, 增殖系数为9.4。通过不同基因型草莓之间比较发现:在相同培养基上, 不同基因型的草莓其增殖系数存在较大差异, 如在MS+0.8mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA培养基上, 5个品种草莓的增殖系数分别为16.7、8.8、10.2、13.2和7.9, 说明不同基因型对草莓的增殖培养具有显著影响。 2.2 ‘甜法理”和‘甜法理 由表2可知, 45d后5个基因型草莓的幼苗在不添加任何激素的1/2MS培养基上, 生根效果较差, 其中, ‘章姬’和‘甜查理’没有产生任何根系。添加IBA或NAA激素后, 5个基因型草莓的生根数显著提高, ‘丰香’、‘甜查理’和‘红颜’的最佳生根培养基为:1/2MS+1.0mg/L NAA, 平均生根数分别达到6.5、5.8和6.8, ‘章姬’和‘卡姆罗莎’的最佳生根培养基为:1/2MS+1.0mg/L IBA, 平均生根数分别为5.4和6.0。 2.3 活性炭对草莓生根的影响 由表3可知, 添加活性炭对草莓的生根具有较明显影响, 随着活性炭浓度的提高, 5个不同基因型草莓的生根数相应增加, 在活性炭浓度为0.5%时, 草莓的生根效果最好, 当浓度达0.7%时, 生根数开始降低。同时发现, 添加活性炭后, 草莓的根系更加粗壮, 并可有效减轻草莓的玻璃化现象, 使草莓叶色浓绿, 植株生长健壮。 2.4 草炭土珍珠岩苗床移植 草莓试管苗移栽前必须进行较严格的练苗驯化, 按照1.2.4所述方法进行练苗后, 移栽到草炭土∶珍珠岩=1∶1的苗床上, 移栽前应对苗床进行消毒。移栽后注意保湿遮阴, 并每周喷施叶面肥。通过以上措施, 草莓试管苗的移栽成活率可达95%以上。 3 最佳增殖培养基的确定 该研究采用的6-BA和NAA激素组合对草莓的丛生芽诱导具有较好的作用, 但不同基因型的草莓品种, 其最佳的诱导