人类疾病动物模型课件.pptVIP

被動免疫致敏動物模型造模方法：豚鼠：200～300g豚鼠，第1天和8天，0.5％卵白蛋白溶於生理鹽水10ml加至超聲霧化吸入器，用簡易面罩霧化吸入10min，第16—20天將致敏動物置於密閉的容器內，用1％卵白蛋白氣霧激發，使動物暴露在卵白蛋白氣霧中10～30min，至出現哮喘樣發作。*被動免疫致敏動物模型評價：出現咳嗽、煩躁、口唇和四肢紫紺，呼吸費力。生理記錄儀描記呼吸曲線，出現呼吸頻率加快和呼吸加深。病理檢查發現毛細血管擴張，嗜酸性粒細胞浸潤，腺體分泌活動亢進。該模型是國內外常用的方法，方法簡單，複製性強，且豚鼠是最好的顯示氣道高反應型的特徵動物，其哮喘發作與人表現相似。主要用於哮喘發病機制的研究和治療觀察。*被動免疫致敏動物模型造模方法：2、大鼠：4～6周齡120～180g雄性SD大鼠，腹腔注射卵白蛋白100mg抗原液1ml，滅活百日咳桿菌疫苗5×109個和氫氧化鋁乾粉100mg致敏。2周後用超聲霧化器向箱內噴霧1％卵白蛋白，吸入20min激發。評價：表現呼吸氣促，嚴重者呼吸減慢或節律不齊、輕度紫紺、四肢癱軟、行動遲滯或俯伏不動、反應遲鈍，連續激發後大鼠體重減輕、毛色失去光澤、反應遲鈍。本模型適用於特異性抗原抗體反應的研究，有速發和遲發雙相反應。*鄰苯二甲酸酐(PA)致變應性哮喘模型機制：苯酐是小分子化合物，屬半抗原。由於半抗原不能刺激機體產生免疫反應，需與蛋白結合成全抗原，形成新的抗原決定簇而發揮致敏作用。據此實驗製備了兩種不同載體的苯酐全抗原即苯酐-牛血清白蛋白結合物（PA-Bovinserumalbumin,PA-BSA）和PA-HAS(人血清白蛋白)。用致敏的抗血清給正常動物注射使其致敏，並在相應抗原吸入攻擊下同樣可誘發出哮喘。支氣管哮喘動物模型*方法：2-3月齡250—300g豚鼠。用30mg苯酐以lml丙酮溶解後，加入4℃2％HSA9%碳酸氫鈉溶液中，並攪拌1h形成PA—HSA。同法制備PA—BSA。將製備的抗原與弗氏完全佐劑等量研磨，使之成油包水狀。腹腔或後腿肌肉注射0.2～0.3ml/只(含蛋白4-6mg)。注射3～8周後抗原吸入激發。動物俯臥固定，激發前描記正常的呼吸曲線。用1:1000HSA鹽水溶液霧化後吸入1～3min，觀察記錄0.5h。支氣管哮喘動物模型*模型評價：豚鼠吸入抗原後1-10min內，表現為呼吸頻率加快，由100—120次/min增加到140～160次/min；呼吸幅度增大，同時伴有咳嗽、噴啑，重者呼吸極度費力、掙扎，有短暫窒息甚至死亡。發作一般持續30～50min。PA是確切的職業性致喘物質。苯酐哮喘屬變應性哮喘，患者體內可測出特異性抗體，苯酐抗原吸入激發試驗常呈現陽性。本模型的建立，為進一步研究該哮喘的病理變化提供了條件。支氣管哮喘動物模型*血小板活性因數(PAF)誘發哮喘模型造模機制PAF是目前已知的唯一能引起氣道高反應性炎症介質。PAF引發哮喘發作的原因可能是PAF通過嗜酸性粒細胞的活化趨向、脫顆粒、釋放嗜酸性細胞蛋白X(Epx)、嗜酸性細胞陽離子蛋白(ECP)和鹼性蛋白等細胞毒性物質引起氣道上皮細胞損傷和脫落。另外，啟動的嗜酸性細胞本身又合成和釋放PAF，使這一過程加劇，最終引起氣道高反應性。支氣管哮喘動物模型*方法:300—500g雄性豚鼠，激發實驗當天，採用含0.25%BSA生理鹽水，將PAF稀釋成500ug/ml，按1500ug/kg的劑量霧化吸入，即引起豚鼠哮喘發作。評價:PAF激發豚鼠哮喘發作不需致敏過程，直接利用其特性而引發氣道的高反應性，本模型主要用於研究哮喘病因學和發病機制的研究。支氣管哮喘動物模型*第五節內分泌、營養疾病動物模型糖尿病動物模型模型概述糖尿病動物模型複製方法主要包括5種：1、注射致高血糖因數，如生長激素、胰高糖素、糖皮質激素以及兒茶酚胺類激素等，複製出某些繼發性糖尿病模型。2、注射化學物質引起胰島β細胞的損傷，如鏈脲佐菌素(STZ)、四氧嘧啶、二苯硫代卡肥腙可造成胰島β細胞不可逆損傷；環丙庚呱、天門冬素酶、6—氨基尼克醯胺、2—去氧葡萄糖、甘露庚酮糖可引起β細胞可逆性損傷。*第五節內分泌、營養疾病動物模型糖尿病動物模型3、注射生物及生物製品引起β細胞破壞，如鼠腦炎、心肌炎病毒M型變異可誘發若干品系的成年小鼠糖尿病，IL—1在一定劑量和範圍內對β細胞有選擇性細胞毒作用，導致IDDM。4、手術切除胰腺的大部分或全部，並給予高糖飲食刺激，引起繼發性永久性糖尿病。5、篩選、引種、繁殖遺傳性