动物产品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌的检测方法.docx

ICS11.220

B41

NY

中华人民共和国农业行业标准

NY/T555—2002

动物产品中大肠菌群、粪大肠菌群

和大肠杆菌的检测方法

Detectionmethodsforcoliformgroup,faecalcoliformgroup,

coliformbacteriainanimalproducts

2002-08-27发布

2002-12-01实施

中华人民共和国农业部发布

NY/T555—2002

前言

大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌是食品卫生的三项重要的卫生指标。当前国际上采用的方法有美国公职分析化学家协会(AOAC)方法及日本人介绍的煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLB)和EC试管发酵法。为满足要求，依照日本采用的BGLB和EC试管发酵法并进行适当改进，建立了本检测方法。本方法用BGLB发酵管检测大肠菌群并计算最大可能数(MPN)值，用EC肉汤发酵管检测粪大肠菌群并计算MPN值，在检测粪大肠菌群的基础上通过生化鉴定检测大肠杆菌并计算MPN值，鉴定中省去了革兰氏染色。这些重要改进缩短了检验时间，简化了操作程序，而且经对比试验证明结果可靠，适合于动物产品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌的检测。

本标准的附录A是规范性附录，附录B是资料性附录。

本标准由农业部畜牧兽医局提出。

本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：天津动植物检疫局。

本标准主要起草人：秦贞奎、张碧波、侯艳梅、杨金良、薛振源。

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NY/T555-2002

动物产品中大肠菌群、粪大肠菌群

和大肠杆菌的检测方法

1范围

本标准规定了动物产品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌的检测方法。

本标准适用于动物产品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌的检测。

2术语和定义

下列术语和定义适用于本标准

2.1

大肠菌群coliforms;coliformgronp

一群能分解乳糖产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。

2.2

粪大肠菌群faecalcoliforms;faecalcoliformsgronp

44.5℃发酵乳糖产气的一群细菌，是用来表示来源于粪便的大肠菌群。

2.3

大肠杆菌escherichiacoli;coliformbacteria

符合大肠菌群和粪大肠菌群定义，用IMViC(靛基质、甲基红、维培和西蒙氏柠檬酸盐)生化试验进一步鉴定，四种生化反应结果依次为++-—和-+—-的细菌。

2.4

最大可能数mostprobablenumber,MPN

采用多次稀释方法所求得的最近似数，是通过概率计算出来的。

2.5IMViC

靛基质试验、甲基红试验、维培(VP)试验和枸橼酸盐利用试验的缩写。

3检测方法

3.1材料准备

3.1.1仪器

吸管，恒温水浴箱，培养箱，匀浆器，100mL、200mL和500mL三角瓶及广口瓶，直径5mm的玻璃珠。

3.1.2培养基及试剂

配制方法见附录A(规范性附录)。

3.1.2.1煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLB),配制方法见第A.1章。

3.1.2.2EC肉汤，配制方法见第A.2章。

3.1.2.3伊红美蓝琼脂(EMB),配制方法见第A.3章。

3.1.2.4甲基红-维培(MR-VP)培养基，配制方法见第A.4章。

3.1.2.5西蒙氏柠檬酸盐培养基，配制方法见第A.5章。

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3.1.2.6靛基质(吲哚)试验培养基，配制方法见第A.6章。

3.1.2.7科瓦克(Kovacs)氏靛基质试剂，配制方法见第A.7章。

3.1.2.8甲基红指示剂，配制方法见第A.8章。

3.1.2.9维培(VP)试剂，配制方法见第A.9章。

3.2检测程序

本标准的检测程序见图1。

样品制备及稀释

大肠菌群测定

粪大肠菌群及大肠杆菌测定

BGLB发酵管

37℃24h

EC肉汤发酵管

44.5℃24h

产气(一)产气(+)产气(一)产气(+)

报告阴性

结果

EMB平板

37℃24h

报告阴性

结果

EMB

37℃

平板

24h

依据典型菌落产气管数