常用pH缓冲液配置方法及注意事项
常用pH缓冲溶液的配制和pH值
序号
溶液名称
配制方法
pH值
1
氯化钾-盐酸
13.0ml0.2mol/LHCl与25.0ml0.2mol/LKCl
1.7
混合均匀后,加水稀释至100ml
2
氨基乙酸-盐酸
在500ml水中溶解氨基乙酸150g,加480ml浓盐
2.3
酸,再加水稀释至1L
3
一氯乙酸-氢氧化钠
在200ml水中溶解2g一氯乙酸后,加40gNaOH,
2.8
溶解完全后再加水稀释至1L
4
邻苯二甲酸氢钾-盐酸
把25.0ml0.2mol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与6.0ml
3.6
0.1mol/LHCl混合均匀,加水稀释至100ml
5
邻苯二甲酸氢钾-氢氧化
钠
把25.0ml0.2mol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与17.5
ml0.1mol/LNaOH混合均匀,加水稀释至100ml
4.8
6
六亚甲基四胺-盐酸
在200ml水中溶解六亚甲基四胺40g,加浓HCl10ml,
5.4
再加水稀释至1L
7
磷酸二氢钾-氢氧化钠
把25.0ml0.2mol/L的磷酸二氢钾与23.6ml0.1
6.8
mol/LNaOH混合均匀,加水稀释至100ml
8
硼酸-氯化钾-氢氧化钠
把25.0ml0.2mol/L的硼酸-氯化钾与4.0ml0.1
8.0
mol/LNaOH混合均匀,加水稀释至100ml
9
氯化铵-氨水
把0.1mol/L氯化铵与0.1mol/L氨水以2:1比例
9.1
混合均匀
10
硼酸-氯化钾-氢氧化钠
把25.0ml0.2mol/L的硼酸-氯化钾与43.9ml0.1
10.0
mol/LNaOH混合均匀,加水稀释至100ml
11
氨基乙酸-氯化钠-氢氧
化钠
把49.0ml0.1mol/L氨基乙酸-氯化钠与51.0ml
0.1mol/LNaOH混合均匀
11.6
12
磷酸氢二钠-氢氧化钠
把50.0ml0.05mol/LNaHPO与26.9ml0.1mol/L
2 4
12.0
NaOH混合均匀,加水稀释至100ml把
NaOH混合均匀,加水稀释至100ml
把25.0ml0.2mol/LKCl与66.0ml0.2mol/LNaOH
13 氯化钾-氢氧化钠 13.0
混合均匀,加水稀释至100ml
(一)溶液配制注意事项
药品要有较好的质量试剂分为优级纯(保证试剂,Guaranteedreagent,G.R.)、分析试
剂(Antalyticalreagent,A.R.)化学纯
(Chemicalpure,C.P.)和实验试剂
(Laboratoryreagent,L.R.)等等。工业用的化学试剂,杂质较多,只在个别情况下应用,如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。2.药品称量要精确。
3.配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏
水,比电阻值在50万欧姆以上,pH在5.5~7.0之间才可应用,在组织培养等特殊用途时应注意此项要求,配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。4.配好后的溶液,应立即除菌处理(如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质),以防杂菌生长。
(二)0.067(1/15)Mol/L磷酸缓冲液
/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制:称取磷
酸二氢钾(KHPO
2
,A.R.)9.08g,用蒸馏水溶
4
解后,倾入1000ml容量瓶内,再稀释至刻度
(1000ml)。
2.1/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制:称取无
水磷酸氢二钠(Na
HPO
2
,A.R.)9.47g(或者
4
NaHPO
2
·2H
4
O11.87g)用蒸馏水溶解后,放入
2
1000ml容量瓶内,再加蒸馏水稀释至刻度
(1000ml)。
3.按附表的比例,配制成不同pH值的缓冲溶液。附表1磷酸盐缓冲液配制法(单位:毫升)
pH
1/15Mol/LNaHPO
1/15Mol/LKHPO
pH
1/15Mol/LNaHPO
1/15Mol/LKHPO
2 4
2 4
2 4
2 4
5.8
8.0
92.0
7.1
66.6
23.4
5.9
9.9
90.1
7.2
72.0
28.0
6.0
12.2
87.8
7.3
76.8
23.2
6.1
15.3
84.7
7.3
80.8
19.2
6.2
18.6
81.4
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