《DNA的粗提取和鉴定》实验中的几个常见问题1 - 会议文章.docxVIP

验材料，学生的操作过程大同小异，具体数据可能会有一定的差别，以下是三种不同方法步骤的比较2从实验的效处保存。二苯胺有毒。二苯胺试剂的配制：A液：1.5克二苯胺溶解于100ml

验材料，学生的操作过程大同小异，具体数据可能会有一定的差别，以下是三种不同方法步骤的比较2从实验的效

处保存。二苯胺有毒。二苯胺试剂的配制：A液：1.5克二苯胺溶解于100ml冰乙酸中,在加入1.5ml

克，大约可以制备粘稠状的DNA提取液2000毫升左右，每个学生一般只需要使用5ml左右的凝胶状的DN

。因此，实验应使用新配制试剂，同时使配制好的试剂尽量避免受到强光照射。实验时，可先将试剂A滴加入溶有

陶晓东（江苏省常州市武进高级中学生物组213161）

摘要：中学实验中提取DNA的实验材料的选择问题，几种实验材料各自的优缺点；DNA鉴定过程中易出现的一些常见问题及具体的解决方案。

关键词：鸡血细胞DNA提取液二苯胺试剂

人教版高中生物教材第二册（必修）中的实验十一《DNA的粗提取和鉴定》是一个比较重要的学生实验。该实验比较复杂，在实际操作过程中需要注意的细节问题也非常多，而且往往因为某个环节的操作不当，结果不能观察到明显的实验现象。因此，有必要对实验过程中应当注意的问题做一些探讨。从我个人和学生的实际实验操作过程中，我认为有以下两个问题值得注意。

一、实验材料的选择问题：

虽然各种生物细胞中都含有大量的DNA，但是并不是每一种生物组织都适合做提取DNA的原材料。比较好的实验材料最好应该满足以下几个条件

1．组织中DNA的含量比较丰富,能够适合大量提取。

2．该组织中所含化合物种类应比较单纯,避免由于其他物质化学性质与DNA相近，从而对实验现象产生某些干扰。

3．实验材料的价格适宜，从而能相对的降低实验成本。

4．实验材料在实验过程中的可操作性较强，在相对简单的条件下能大量提取出DNA，便于学生实验操作。

可用于提取DNA的实验材料很多，人教版高中生物第二册教师教学用书中提供了两类可用于提取DNA的实验材料：鸡血和植物组织（新鲜菜花、蒜黄、菠菜等）；另外在《实验教学与仪器》杂志2002年第一期的《探讨“DNA的粗提取与鉴定”的实验改进》一文中提供了另一种可行的实验材料：鱼类的精巢；此外，在高教出版社《生化实验方法和技术》一书中还介绍了一种从动物胸腺中提取DNA的方法，这是一种大学教材上提供的方法。这几种实验材料由于各自性质的差异，实验的操作过程和步骤有很大的差别，以下是四种实验材料特点的粗略比较。

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末端的DNA的量过少的情况，如果溶解于氯化钠溶液中的DNA的量过少的话，与过量的二苯胺试剂共热时，出

末端的DNA的量过少的情况，如果溶解于氯化钠溶液中的DNA的量过少的话，与过量的二苯胺试剂共热时，出

A提取液与鸡血体积比约为5：1，宰杀一只中等大小的活鸡可以获取100毫升左右的鸡血，可制备约500毫

处保存。二苯胺有毒。二苯胺试剂的配制：A液：1.5克二苯胺溶解于100ml冰乙酸中,在加入1.5ml

作为实验材料成本最低，由于鱼类精巢中DNA的含量极为丰富,且精巢细胞内其他生物活性物质较少，在做DN

鸡血细胞

植物组织

鱼类精巢

动物胸腺

实验成本DNA含特殊药品实验仪器实验效果

量配置配置

取材易，价格丰富柠檬酸钠离心机可操作性强，实验

较低效果明显

易取材，价格较丰富SDS常规实验成功率较低，

较低EDTA实验效果与研磨

三羟甲基氨基液关系密切，

甲烷

取材易，价格丰富无组织捣碎机

较低

取材不易，价丰富柠檬酸钠

格高

离心机可操作性较强，适

组织捣碎机宜做定量分析

可操作性强，效果明显，但不易定量控制

注：SDS：十二烷基磺酸钠EDTA：乙二胺四乙酸二钠

根据以上对比可以看出,如果从取材方面来考虑的话,以动物胸腺组织作为实验材料是不经济的,而且还要面临中学实验条件的限制等问题。我没有具体完成过该实验，如果有兴趣的话，该实验的实验方法可查阅相关资料。

使用其余三种物质作为实验材料，学生的操作过程大同小异，具体数据可

能会有一定的差别，以