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中草药2024年1月第55卷第2期ChineseTraditionalandHerbalDrugs2024JanuaryVol.55No.2·527·
海藻-甘草含药血清对M22诱导的Nthy-ori-3-1细胞增殖的作用研究
任或娜，刘晓庆，曹灿，李慕云，廖文勇，张淑静，于雪，范盎然，修琳琳*，钟赣生*
北京中医药大学，北京100029
摘要：目的探讨海藻-甘草含药血清对人甲状腺正常细胞Nthy-ori-3-1增殖的作用，为进一步研究海藻与甘草配伍抗甲状腺肿大的作用机制奠定基础。方法体外培养Nthy-ori-3-1细胞，使用不同浓度的促甲状腺激素受体人单克隆抗体M22作用于Nthy-ori-3-1细胞不同时间，观察M22作用的最佳浓度及时间。制备海藻-甘草含药血清，M22刺激细胞24h后，分别给予5%、10%、15%、20%海藻-甘草含药血清干预24h，采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况。流式细胞术检测细胞周期分布和凋亡情况；透射电镜观察细胞形态；免疫荧光检测微管相关蛋白轻链3（microtubule-associatedproteinlightchain3，LC3）表达情况；Westernblotting检测Beclin1蛋白表达。结果M22明显刺激Nthy-ori-3-1细胞增殖，0.125μg/mL的M22作用24h时促增殖作用最佳（P＜0.01）。经海藻-甘草含药血清干预后，细胞增殖明显抑制（P＜0.05、0.01），细胞呈现明显的凋亡形态学变化，G0/G1期细胞比例明显升高（P＜0.01），G2/M期细胞比例无显著性差异，细胞凋亡率明显上升（P＜0.01），LC3平均荧光强度增加，Beclin1蛋白表达水平明显升高（P＜0.01）。结论M22可刺激Nthy-ori-3-1细胞增殖，海藻-甘草含药血清抑制M22诱导的Nthy-ori-3-1细胞增殖，促进其凋亡，可能通过调节自噬来发挥抑制Nthy-ori-3-1细胞增殖的作用，以达到抗甲状腺肿大的疗效。
关键词：海藻-甘草含药血清；甲状腺肿大；Nthy-ori-3-1细胞；细胞自噬；细胞凋亡
中图分类号：R285.5文献标志码：A文章编号：0253-2670(2024)02-0527-07
DOI:10.7501/j.issn.0253-2670.2024.02.018
EffectofSargassum-GlycyrrhizaeRadixetRhizomacontainingserumonproliferationofM22-inducedNthy-ori-3-1cells
RENYuna,LIUXiaoqing,CAOCan,LIMuyun,LIAOWenyong,ZHANGShujing,YUXue,FANAngran,XIULinlin,ZHONGGansheng
BeijingUniversityofChineseMedicine,Beijing100029,China
Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectofHaizao(Sargassum)-Gancao(GlycyrrhizaeRadixetRhizoma)containingserumonproliferationofhumanthyroidcellsNthy-ori-3-1,andlayafoundationforfurtherresearchontheanti-goitermechanismofSargassum-GlycyrrhizaeRadixetRhizomacombination.MethodsNthy-ori-3-1cellswereculturedinvitro,differentconcentrationsofthyroidstimulatinghormonereceptorhumanmonoclonalantibodyM22wereusedtoactonNthy-ori-3-1cellsatdifferenttimes
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