68紫外-可见吸收光谱定量技术.pptx

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紫外可见光的波长1.紫外光2.可见光200-400nm(含有双键的药物)400-700nm(有颜色的药物)

紫外可见光的吸收曲线当光穿过被测物质溶液时,物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此通过测定物质在不同波长处的吸光度,并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收曲线。

紫外可见光的吸收曲线(1)同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长λmax。(2)不同浓度的同一种物质,其吸收曲线形状相似、λmax不变。而对于不同物质,它们的吸收曲线形状和λmax则不同。(3)吸收曲线可以提供物质的结构信息,并作为物质定性分析的依据之一。①测定最大吸收波长,或同时测定最小吸收波长②规定浓度的供试液在最大吸收波长测定吸光度

紫外可见光的吸收定律①布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于1729年和1760年阐明了光的吸收程度和吸收层厚度的关系。A∝b

紫外可见光的吸收定律②1852年比耳(Beer)又提出了光的吸收程度和吸收物浓度之间也具有类似的关系A∝c二者的结合称为朗伯—比耳定律,其数学表达式为:A=lg(I0/It)=εbc

紫外-可见分光光度计的仪器组成光源单色器样品室检测器信号处理器

紫外-可见分光光度计的仪器组成1.光源在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱,具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。可见光区:钨灯或卤钨灯作为光源紫外区:氢、氘灯

紫外-可见分光光度计的仪器组成2.单色器将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出一任波长单色光的光学系统。色散元件:将复合光分解成单色光。棱镜或光栅

紫外-可见分光光度计的仪器组成3.样品室★紫外区须采用石英池(1cm)★可见区一般用玻璃池(0.5、1、2、3cm)比色皿:石英比色皿和玻璃比色皿

紫外-可见分光光度计的仪器组成4.检测器利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号,常用的有光电池、光电管、光电倍增管(PMT)或光电二极管阵列(PDA)检测器。

紫外-可见分光光度计的仪器组成5.信号处理器检流计、数字显示、微机进行仪器自动控制和结果处理。

紫外可见分光光度法测定药物含量(1)对照品比较法:(2)吸收系数法:(3)比色法:

紫外可见分光光度法测定药物含量(1)对照品比较法:供试品溶液的吸光度对照品溶液的吸光度供试品溶液的浓度对照品溶液的浓度

紫外可见分光光度法测定药物含量(2)吸收系数法:

紫外可见分光光度法测定药物含量(3)比色法:供试品本身在紫外-可见光区没有强吸收,或在紫外光区虽有吸收但为了避免干扰或提高灵敏度,可加入适当的显色剂,使反应产物的最大吸收移至可见光区,这种测定方法称为比色法。

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