4-2酶的活性中心和催化专一性.docx

4-2酶的催化中心与催化专一性

大家好，我是你们的主讲老师王杨，上一节课我们学习了酶的性质，知道了酶是什么以及酶作为生物催化剂对我们生物体的重要意义，那么酶究竟是通过什么机制发挥如此高效的作用的呢？今天我们就来学习酶的作用机理。

上一讲我们学习过酶是一种蛋白质，而且具有三维结构，同样酶也是由许多氨基酸组成的一条或多条多肽链。大量实验研究证明，酶的催化能力仅局限于酶分子的一定区域，也就是多肽链上的一些氨基酸残基，这些氨基酸残基参与底物的结合和催化，我们把这些氨基酸残基组成的空间部位称为酶的活性中心，他具有三维结构。也就是说酶的活性中心=结合部位+催化部位。其中结合部位决定了酶的专一性，而催化部位决定了酶促反应的性质。

人们为了研究酶的活性中心，更好的调控酶，主要有以下几种方法来测定酶的活性中心：（1）切除法：观察酶分子被一定的化学试剂修饰前后酶活性的变化情况。比如大家看，这是卵清溶菌酶的部分多肽链，当使用专一性酶切除1-34位氨基酸残基后，发现酶依然具有活性，而当再切除35位谷氨酸残基时，发现酶活性消失，从而推断35位的谷氨酸是酶活性中心的组成部分。

（2）化学修饰法：碘乙酸容易和含巯基的化合物发生反应，凡是可以被碘乙酸抑制的酶，它们的活性中心必然与含有巯基的半胱氨酸有关。比如木瓜蛋白酶的212位氨基酸为半胱氨酸，它在加入碘乙酸后会失活，因此推断木瓜蛋白酶的212位半胱氨酸为活性中心组成部分。

（3）x射线衍射法：x射线技术类似拍照一样，通过x射线技术我们可以直接观察酶与底物的三维结合情况，并可以得到哪些基团参与了结合，从而推断出酶的活性中心。但是这个方法只适用于结晶蛋白质。

我们刚刚所说的活性中心，也就是酶的结合部位和催化部位，是酶的必需基团，但是除了活性中心的必需基团外，活性中心外还有一些基团也属于必需基团，他们的作用主要是维持酶分子的三位构象。我们成这类基团位酶活性中心外必需基团。就好比起重机要发挥作用，摇臂，抓手和固定底座的装置都是必需的，就是我们说的必需基团，而摇臂和抓手就像结合部位和催化部位是活性中心，而稳定底座的装置就是活性中心外的必需基团。

酶的专一性是基于酶与底物之间精确的相互作用，这种精确性是酶蛋白复杂的三维结构所决定的，根据各种酶表现的专一性程度的差异，酶的底物专一性可以分为以下几类。

（1）结构专一性：包括绝对专一性（只催化一种底物进行一种反应，是最严格的一种）；基团专一性（要求底物有一定的化学键，同时键的某一端所连的基团也有一定要求）；键专一性（只对底物分子中发生反应的化学键有要求，而对两端所连的基团性质没有要求）

第二种是立体异构专一性：是指当底物具有立体异构体时，酶只作用于其中一种立体异构体。比如L-氨基酸氧化酶只作用于L-氨基酸，而对D-氨基酸无效。

为了解释酶作用的专一性，曾提出过不同的假说，为大家简单解释几种，第一种叫锁匙学说：这是德国科学家埃米尔.费希尔于1894年提出的，我们知道一把钥匙开一把锁，费希尔的锁匙学说也是这样，酶和底物之间就像钥匙和锁，以此说明酶与底物结构上的互补性，但是该学说的局限性在于不能解释酶催化的可逆反应。

第二种叫诱导契合学说，这是科什兰于1958年提出的，他把底物看做相对刚性的分子，而酶确是有一定柔性的，当酶分子与底物接近的时候，酶蛋白受底物分子诱导，构象会发生变化，变为与底物结构相匹配的构象，从而使得底物能够顺利的与酶契合。随后的x射线衍射、核磁共振和光谱技术都证实了酶与底物结合时构象确实有变化，有力的支持这一假说。这个假说解释了“锁匙学说”刚性结构难以解释的问题。

最后让我们来总结一下今天学习的内容，今天我们学习了酶的活性和催化专一性。在酶分子中，和酶的催化作用有关的基团称为必需基团，必需基团又分为活性中心和活性中心外的必需基团，活性中心是指在酶催化的过程中的结合部位和催化部位，我们可以通过切除法，化学修饰法和x射线衍射法来测定；而活性中心外的必需基团虽不直接参与酶促反应，但是却有着维持酶分子构象的重要作用，因此也是必须基团。而酶的专一性我们可以分为结构专一性和立体专一性。而为了解释酶作用的专一性，提出了很多假说，我们为大家介绍了锁匙学说和诱导契合学说两种。

这一节的内容主要解释了为什么酶的催化具有专一性，那么是什么原因导致酶具有很高的催化效率呢？我们下节课将为大家讲解，今天的课程到此结束，谢谢大家。