基因工程的基本操作程序.ppt

基因工程的基本操作程序;;;;基因工程的基本操作程序;目前被较广泛提取使用的目的基因有：苏云金杆菌抗虫基因、人胰岛素基因、人干扰素基因、种子贮藏蛋白基因、植物抗病基因等。;一、目的基因的获取;(1)从基因文库中获取目的基因;将具有某种生物不一样基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别具有这种生物的不一样基因，称为基因文库。;基因组文库:

基因文库中包括了一种生物所有的基因,这种基因文库叫做基因组文库.

部分基因文库:

基因文库中包括了一种生物的一部分基因,这种基因文库叫做部分基因文库.;;基因文库的构建;基因组DNA文库;真核生物转录过程;;村长,为何要构建基因文库？直接从具有目的基因的生物中提取不行吗？？？;（3）怎样从基因文库中得到所需要的基因？;1、构建基因组DNA文库时，首先应分离细胞的

A、染色体DNA??B、线粒体DNA

C、总mRNA??D、tRNA;（2）运用PCR技术扩增目的基因;PCR技术;一对引物：;PCR扩增仪;过程;PCR仪;一次性

吸液枪头;运用PCR技术扩增目的基因;;1、在遗传工程中，若有一种控制有利性状的DNA分子片段为ATGTG／TACAC，要使其数量增多，可用PCR技术进行人工复制，复制时应予以的条件是

①双链DNA分子为模板②ATGTG或TACAC模板链③四种脱氧核苷酸④四种核苷酸⑤DNA聚合酶⑥热稳定DNA聚合酶⑦引物⑧温度变化⑨恒温

A．①③④⑦⑨B．①④⑥⑦⑧

C．②⑤⑥⑦⑨D．①③⑥⑦⑧;（3）人工合成;目的基因的mRNA

反转录

单链DNA

(互补DNA）

DNA聚合酶

双链DNA，即目的基因;1、在已知序列信息的状况下，获取目的基因的最以便措施是

A、化学合成法??B、基因组文库法

C、cDNA文库法??D、聚合酶链反应;3、目的基因重要是指_______________的构造基因。获得目的基因的常见措施有三种：（1）从基因文库中获取目的基因，根据基因的_________序列，基因在________上的位置，基因的________产物mRNA，基因的_______产物蛋白质等获取目的基因。（2）运用PCR技术扩增目的基因，该技术是一项在________完毕的核酸合成技术，前提条件是有一段已知目的基因的________序列，以便于合成_________。（3）假如基因较小且核苷酸序列已知，可以通过____________措施。;为何要有“体现载体的构建”这一步？;二、基因体现载体的构建——关键;;2、基因表达载体的作用;不可以。由于目的基因在体现载体中得到体现并发挥作用，还需要有其他控制元件，如启动子、终止子和标识基因等。必须构建上述元件的重要理由是：

（1）生物之间进行基因交流，只有使用受体生物自身基因的启动子才能比较有助于基因的体现；

（2）通过cDNA文库获得的目的基因没有启动子，只将编码序列导入受体生物中无法转录；

（3）目的基因与否导入受体生物中需要有筛选标识；

（4）为了增强目的基因的体现水平，往往还要增长某些其他调控元件，如增强子等；

（5）有时需要确定目的基因体现的产物存在于细胞的什么部位，往往要加上可以标识存在部位的基因（或做成目的基因与标识基因的融合基因），如绿色荧光蛋白基因等。;3、基因体现载体的构成：;3.基因体现载体的构成：;1、（多选）一种基因体现载体的构建应包括

A．目的基因B．启动子C．终止子D．标识基因;常用的受体细胞：;1、将目的基因导入植物细胞;（2）基因枪法;（3）花粉通道法;2、将目的基因导入动物细胞;3、将目的基因导入微生物细胞;1、植物细胞培育转基因植物时，受体细胞可以是体细胞和受精卵，由于植物细胞具有全能性。;1、基因工程中科学家常用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞，原因是

A．构造简朴、操作以便B．繁殖速度快

C．遗传物质含量少、简朴D．性状稳定、变异少

2、基因工程常用的受体细胞有

①大肠杆菌②枯草杆菌③支原体④动植物细胞

A．①②③④B．①②③C．②③④D．①②④;4.采用基因工程的措施培育抗虫棉，下列导入目的基因的做法对的的是

①将毒素蛋白质注射到棉受精卵中②将编码毒素蛋白的DNA序列注射到棉受精卵中③将编码毒素蛋白的DNA序列与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵中④将编码毒素蛋白的DNA序列与质粒重组，导入细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养

A．①②B．②③C．③④D．①④;(四)目的基因的