中药制剂的含量测定.pptx

中药制剂的含量测定;学习目标;第一节含量测定的目的与意义;通过测定制剂中有效成分、毒性成分或某些指标性成分的含量来衡量其制剂工艺的稳定性和中药材的质量优劣，以保证中药制剂的质量，达到临床用药安全、有效和中药制剂进入国际市场的需要。

;第二节常用定量分析方法;

测定：含量较高成分

矿物药制剂中无机成分

如总生物碱类、总酸类、总皂苷及矿物药制剂等。

化学分析法有一定的局限性，其灵敏度低，操作繁琐、耗时长，专属性不高，对于微量成分准确性不理想。;（一）重量分析法;如：①供试品的干燥失重测定；

②水分测定均属挥发法；

③中药制剂分析中灰分及炽灼残渣的测定等。;;;（二）滴定分析法;;;;;

该法是中药及其制剂含量测定的一种常用方法。;;分类;;（一）基本原理

薄层扫描法是指薄层色谱斑点的色谱扫描，薄层色谱扫描是指固定波长，斑点移动，测定A-l或F-l曲线。根据薄层扫描的测定方式分为薄层吸收扫描法和薄层荧光扫描法二种方法。;1、薄层吸收扫描法

基本原理：Kubelka-Munk理论及曲线。由于薄层板存在明显的散射现象，斑点中物质的浓度与吸光度的关系需用Kubelka-Munk理论及曲线来描述。Kubelka-Munk理论以斑点的相对反射率和相对透光率计算薄层色谱斑点的吸光度，说明了固定相的散射参数SX对斑点中物质的浓度与吸光度间关系的影响，获得不同散射参数SX时斑点的A-KX理论曲线，即Kubelka-Munk曲线。

光源：钨灯和氘灯；

灵敏度：在200-800nm波长范围内选择合适波长进行测定，其灵敏度可达ng级；

适用范围：适用于在可见、紫外区有吸收的物质，及通过色谱前或色谱后衍生成上述化合物的样品组分。;2、薄层荧光扫描法

基本原理：F=2.3K’I。ECL或F=KC

光源：氙灯或汞灯。

灵敏度：最低可测到10-50pg。

适用范围：适合于本身具有荧光或经过适当处理后可产生荧光的物质的测定。

Kubelka-Munk理论不适用于薄层荧光扫描，无需进行曲线校直。用薄层荧光扫描进行定量分析时，用斑点荧光强度的积分值（色谱峰峰面积）与斑点中组分的含量代替上式中F与C进行???算。;;;②外标二点法

工作曲线不通过原点时，只能用外标二点法定量，至少需点二种不同浓度的标准溶液（或一种浓度两种点样量），才能决定一直线,其计算公式为：

C=F1A+F2

式中：C、A同前，F1为直线的斜率或比例常数，F2为纵坐标的截距，F1和F2值由仪器自动算出。

外标一点法、二点法只是指用一种或二种浓度的标准溶液对比定量，为减小误差，同一薄板上供试品点样不得少于4个，对照品每一浓度不得少于2个；并调整标淮溶液的浓度或供试品与标准溶液的点样量，使其峰面积相接近；且点样量必须准确，宜用定量毛细管点样。;;特点：

1）在一定点样量范围内，内标法定量准确度与点样量无关。

2）不易找到适宜Rf值的纯品内标物，且溶液配制等操作较麻烦。

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将不同浓度（或不同量）的标准溶液与供试液点在同一块薄层板上，展开、扫描由计算机对所测得的峰面积及相应点样量进行线性或非线性回归直接由回归方程或回归曲线计算供试液含量的方法。

CAMAG系列薄层扫描仪即采用此方法。;;;;薄层扫描操作实例;四、气相色谱法;

气相色谱是根据汽化后的试样被载气带入色谱柱，由于各组分在两相间作用不同，在色谱柱中移动有快慢，经一定柱长后得到分离，依次被载气带入检测器，将各组分浓度或质量变化转换成电信号变化记录成色谱图，利用色谱峰保留值进行定性分析，利用峰面积或峰高进行定量分析的方法。;1、塔板理论

将色谱柱的柱效用理论塔板数n或理论塔板高度H衡量，取决于区域宽度（σ、W1/2、W），其计算公式为;

速率理论研究了色谱过程中各种动力学因素对柱效（峰展宽）的影响，提出了VanDeemeter方程式：

H=A+B/u+Cu

A、B/u、Cu分别为涡流扩散项、分子扩散（纵向扩散）项、传质阻抗项，从而解释了板高随载气流速而改变，且有最佳流速（Hmin）的现象。

速率方程式对于色谱分离条件的选择具有指导意义，它可以说明色谱柱的填充均匀程度、载体粒度、载气种类、柱温和固定液膜厚度对柱效、峰扩张的影响。

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分离度是衡量分离效果的指标，以相邻两色谱峰峰尖距对峰宽均值的倍数表示，其定义式为：;4、系统适用性试验;

在选定的条件下，注入供试品溶液或各品种项下规定的内标物质溶