食品微生物检验基础—普通光学显微镜的使用技术（食品微生物检验课件）.pptx

普通光学显微镜的使用;任务描述

任务完成条件

任务验收标准

操作步骤与标准要求

师生互动

;;1.金黄色葡萄球菌及大肠埃希氏菌的染色标本片；

2.显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸等。;;

显微镜;目镜;目镜与物镜的比较;放大倍数;目镜与物镜的比较;普通生物显微镜;检测显微镜SFC-86;倒置显微镜光路图;显微镜是微生物检验中最常用的精密光学仪器。

显微镜的种类很多，在实验室中常用的有：普通光学显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜和电子显微镜等。

食品微生物检验中最常用的是普通光学显微镜。;用光学显微镜观察微生物形态时，一般遵循先低倍镜观察，后高倍镜观察，再油镜观察。

;（一）显微镜的使用方法;(1)打开显微镜箱,一手握镜臂,一手托镜座,将显微镜取出。

(2)把显微镜放在实验台上自己身体的前方稍偏左，镜座距实验台边沿约10cm，右侧放记录本或绘图纸。

(3)让镜筒向前,镜臂向自己,然后安放好目镜和物镜。;转动转换器,使低倍镜对准通光孔。

转动载物台下的遮光器,选一较大的光圈对准光孔。

左眼注视目镜(右眼也要睁开),转动反光镜,使光线通过通光孔反射到镜筒内,通过目镜,可看到白亮的视野。当光线强时,让平面镜对着光源,光线弱的时候,用凹面镜对着光源。

自带光源的显微镜，可通过电流旋钮来调节光照强弱。;（1）把所要观察的玻片标本放在载物台上，用压片夹压住，标本要正对通光孔的中心。

（2）眼睛从侧边看着物镜头和标本之间，转动粗调焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止。

（3）左眼看目镜内，同时反向缓缓转动粗调焦螺旋，使镜筒上升，直到看到物象为止，再稍稍转动细调焦螺旋，使看到的物象更加清晰。

（4）看不到物像的重复第（2）、（3）两个步骤。;（1）移动装片，在低倍镜下使需要放大的部分移动到视野中央。

（2）转动转换器，移走低倍物镜，换上高倍物镜。

缓缓调节细准焦螺旋，使物象清晰。

（3）调节光圈，使视野亮度适宜。

换上高倍物镜后禁止向下转动粗准焦螺旋，且光线需要增强。;（1）将高倍镜观察到的目标移动至视野中央；

（2）将高倍镜镜头???开，于载玻片上滴一滴香柏油；

（3）将载物台下降或镜筒提升约2cm，再将油镜镜头移动至视野，让油镜镜头浸入香柏油（至油晕不再扩大为止）；

（4）用微调焦螺旋调至清晰。

注意：油镜的操作需要较强的关线，故需将光线调至最强。

（油镜镜筒上通常刻有H.I.OIL或油等标志）;油镜用后的处理：

第一遍：用擦镜纸拭去镜头上的油；

第二遍：用擦镜纸蘸少许二甲苯（香柏油溶于二甲苯）擦去头上残留的油迹；

第三遍：再用干净的擦镜纸擦去残留的二甲苯。;(1)显微镜应放在通风干燥的地方，避免阳光直射或曝晒，避免受潮，避免与酸、碱和易挥发的、具腐蚀性的化学试剂等放在一起。

(2)显微镜应防止震动。搬动时，要左手握持镜臂，右手托镜座，让显微镜直立于胸前，防止目镜从镜筒脱落。镜检时不能随意移动显微镜。

(3)用过油镜的，应先用擦镜纸将镜头上的油擦去，再用擦镜纸蘸着二甲苯擦拭2-3次，最后再用擦镜纸将二甲苯擦去。注意二甲苯用量不能太多。

(4)镜头须保持清洁，用软而没有短绒毛的擦镜纸，不能用手、布或其他物品擦拭。

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(5)显微镜用后，需将物镜转成“八”字形，勿使物镜镜头与集光器相对放置，同时将物镜下降或将载物台提升以缩短物镜和载物台之间的距离，避免因镜筒脱落或操作不小心，损坏物镜和集光器。

(6)镜检时可通过调整凳子高度以便舒适观察，勿将显微镜倾斜。

(7)观察时，应两眼同时睁开，既能同时绘图，又能减少疲劳。

(8)实验中，显微镜发生故障，应立即向指导老师汇报，不得随意更换显微镜。更不得交换显微镜之间的镜头。

(9)不准擅自拆卸显微镜的任何部件,以免损坏。

;五、师生互动;五、师生互动;普通光学显微镜的

结构及工作原理;;;;镜筒;载物台;细调焦

螺旋;;物镜：安装在镜筒前端转换器上，利用光线使被检物体第一次造像。物镜的性能取决于物镜的数值孔径(NA)，每个物镜的数值孔径都标在物镜的外壳上，数值孔径越大，物镜的性能越好。;;;目镜：作用是把物镜放大了的实像再放大一次，并把物像映入观察者的眼中。

目镜的结构较物镜简单，普通光学显微镜的目镜通常由两块透镜组成，上端的一块透镜称“接目镜”，下端的透镜称“场镜”。

上下透镜之间或在两个透镜的下方装有由金属制的环状光阑或叫“视场光阑”，物镜放大后的中间像就落在视场光阑平面处，所以其上可安置目镜测微尺。;B;