RNA的生物合成（转录） PPT.ppt

转录延长动画原核RNA转录合成的终止机制有两种：1．依赖?因子的转录终止2．非依赖?因子的转录终止：（三）原核转录终止●?因子是个同六聚体；●?因子能结合RNA，与polyC的结合力最强；●?因子有ATP酶和解螺旋酶的活性。ρ富含C3′5′RNAρ5′3′+ATPDNA依赖ρ因子的转录终止RNA转录产物形成寡聚U及发夹形的二级结构，引起RNA聚合酶变构及移动停止，导致RNA转录的终止。2．非依赖Rho的转录终止：5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU...3`5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU...3`RNA5?TTGCAGCCTGACAAATCAGGCTGATGGCTGGTGACTTTTTAGTCACCAGCCTTTTT...3?DNAUUUUU...…UUUU...…5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU...3`茎环(stem-loop)/发夹(hairpin)结构茎环结构使转录终止的机理发夹使RNA聚合酶变构，转录停顿；A-U配对最不稳定，使转录复合物趋于解离，RNA产物释放。非依赖ρ的转录终止ρ′pppG5pppG5′第三节真核生物的转录过程TheProcessofTranscriptioninEukaryote生化教研室雷康福610939种类IIIIII转录产物45S-rRNAhnRNA5S-rRNAtRNA,snRNA对鹅膏蕈碱的反应不敏感极敏感中度敏感（mRNA前体）一、真核生物的RNA聚合酶羧基末端结构域(carboxyl-terminaldomain,CTD)RNA聚合酶Ⅱ最大亚基的羧基末端有一段共有序列为Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser重复序列片段这一序列在RNA聚合酶Ⅱ中是独一无二的。所有真核生物的RNA聚合酶Ⅱ都具有CTD，只是共有序列的重复程度不同。磷酸化的CTD在转录起始中发挥作用。二、真核生物的转录过程（一）真核转录起始真核生物的转录起始上游区段比原核生物多样化，转录起始时，真核RNA-pol不直接结合模板，其起始过程比原核生物复杂。可影响自身基因表达的DNA序列统称为顺式作用元件1.真核转录起始前的上游区段（Hogness盒）2.转录因子能直接或间接辨认和结合另一基因的DNA序列，影响其表达的蛋白质，统称为反式作用因子(trans-actingfactors)。反式作用因子中，直接或间接结合RNA聚合酶的，则称为转录因子(trans-criptionalfactors,TF)。参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ 转录因子亚基和(或)分子量（kDa）功能TFⅡDTBP，38结合TATA盒TAF辅助TBP-DNA结合TFⅡA12，19，35稳定ⅡD-DNA复合物TFⅡB33促进RNA-polⅡ结合TFⅡF30，74解螺旋酶TFⅡE57(?)，34(β)ATPaseTFⅡH蛋白激酶，使CTD磷酸化3.转录起始前复合物(pre-initiationcomplex,PIC)真核生物RNA-pol不能直接与DNA分子结合，而需依靠众多的转录因子。RNA-polⅡTFⅡFTATAⅡAⅡB由RNA-PolⅡ催化转录的PICⅡHⅡE首先，TFⅡD的TBP亚基在另一亚基TAF辅助下，由TFⅡA和B促进及配合，结合在DNA分子的TATA上，形成TFⅡD-ⅡA-ⅡB-DNA复合物TFⅡDTAFTBP最后TFⅡH进入，PIC组装完成，TFⅡH使CTD磷酸化。CTD-PTFⅡB作为桥梁并提供表面，促进已与TFⅡF结合的RNA－polⅡ进入启动子的核心区TATA。接着TFⅡE进入，靠ATPase活性协同RNA－polⅡ解开DNA双链局部。真核转录起始与原核生物大致相似，但因有核膜相隔，转录与翻译不同步。转录延长过程中可以观察到核小体解聚和移位现象。（二）真核转录延长转录延长中的核小体移位核小体转录方向RNA-pol核小体核小体RNA-polRNA-polRNA－pol前移将遇到核小体原来绕在组蛋白上的DNA解聚及弯曲一个区段