微生物生长与培养技术—微生物生长规律（药品生物检定课件）.pptx

生长量测定法;计数法;生理指标法;谢谢观看;微生物的生长规律;生长曲线;1.迟缓期;2.对数期指数期的微生物具有整个群体的生理特性较一致、细胞各成分平衡增长和生长速率恒定等优点，是用作代谢、生理等研究的良好材料，是增殖噬菌体的最适宿主，也是发酵工业中用作种子的最佳材料。

;由于营养物质消耗，代谢产物积累和pH等环境变化，逐步不适宜于微生物生长，使微生物细胞的生长速率降低，处于新繁殖的细胞数与衰亡的细胞数相等。此期间活菌数达到最高峰，且保持相对稳定。进入稳定期时，细胞内开始积累糖原、异染颗粒和脂肪等内含物；芽孢杆菌一般在此期间开始形成芽孢；有的微生物在这时开始以初生代谢物作为前体，通过复杂的次生代谢途径合成抗生素等次生代谢产物。在此时期，细胞的4.衰亡期营养物质耗尽和有毒代谢产物的大量积累，微生物细胞死亡速率逐步超过细胞的繁殖速率，躯体中活细胞逐步减少，曲线下滑，标志着衰亡期的到来。该时期微生物有以下几个特点：①细菌出现自溶现象；②菌体细胞形态和大小出现异常，呈畸形；③革兰氏染色结果会发生改变。次级代谢产物大量积累，菌体细胞的总数也达到高峰，稳定期是代谢产物和大量的活菌体的最佳收获期。。生产上常常通过补料，调节pH，调整温度等措施来延长稳定生长期，以积累更多的代谢产物。;4.衰亡期;生长曲线指导意义;谢谢;显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上(又称计菌器)，于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。目前国内外常用的计菌器有：血细胞计数板、Peteroff-Hauser计菌器以及Hawksley计菌器等，它们都可用于酵母、细菌、霉菌孢子等悬液的计数，基本原理相同。后两种计菌器由于盖上盖玻片后，总容积为0.02mm3，而且盖玻片和载波片之间的距离只有0.02mm，因此可用油浸物镜对细菌等较小的细胞进行观察和计数。除了用这些计菌器外，还有在显微镜下直接观察涂片面积与视野面积之比的估算法，此法一般用于牛乳的细菌学检查。显微镜直接计数法的优点是直观、快速、操作简单。但此法的缺??是所测得的结果通常是死菌体和活菌体的总和。目前已有一些方法可以克服这一缺点，如结合活菌染色微室培养（短时间）以及加细胞分裂抑制剂等方法来达到只计数活菌体的目的。

;血球计数板是一块特制的载玻片，其上由四条槽构成三个平台；中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半，每一边的平台上各列有一个方格网，每个方格网共分为九个大方格，中间的大方格即为计数室。计数室的刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格（图）；另一种是一个大方格分成16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格，但无论是哪一种规格的计数板，每一个大方格中的小方格都是400个。每一个大方格边长为lmm，则每一个大方格的面积为lmm2，盖上盖玻片后，盖玻片与载玻片之间的高度为0.lmm，所以计数室的容积为0.lmm3(万分之一毫升)。;血球计数板结构;方法与步骤：;谢谢