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分子诊断应用于啮齿类实验动物的健康监控;排除(隔离):进入设施前对大小鼠进行筛查
监控:监控啮齿动物健康情况改变
本讲主要关注于监测
-环境,传染性疾病,遗传学,喂养技术和物料
;目录;目标(健康监控能为您做什么?);目录;要求最好符合您需求
–重点关注发生在您设施会影响试验传染性病原
–排除列表过长会危及试验项目;
;目录;重点关注亚临床感染
-若出现临床疾病,需进行调查
权衡哪些项目会影响您工作
-一个标准不能适合用于全部
-一个动物房可能有多重标准
1.免疫正常vs.免疫缺点动物
2.短期研究vs.长久研究
-不一样病原体在不一样时期繁殖速率和影响不一样;从第一只动物感染到检测出来普通会延迟数周至数月
尽可能选择主要病原体进行检测
-显著疾病病原体
-影响研究结果病原体(特定领域)
-官方应排除病原体(认证,发文章);质控程序确认动物是否符合评判标准
组成个别
-样品-
?动物-品系、年纪、样品种类(血清、粪便,等等)、是否暴露?
?环境-位置(静压箱(plenum)、过滤器,等等)
-样品数量?
-检测频率?
-安排、执行及汇报;目录;哨兵鼠选择
敏感种属,雌性,封闭群,每盒最少2只
暴露方法
接触法(最有效,但不实用)
脏垫料法(100%脏垫料,常见)
检测间接并有延迟;大致和显微镜检测(病理)
分离培养
直接检测(PCR)
抗体血清学;目录;运输样本
–血清(用5倍体积PBS稀释)用于检测之前暴露病毒
–粪便、口腔拭子、毛皮拭子,使用PCR方法检测细菌、寄生虫和病毒(当前感染)
–毛皮拭子(扯下或粘下毛发亦可),使用PCR来检测管状线虫属(Syphacia)和皮螨;或者是环境拭子——采自于IVC笼架,能够替换毛皮拭子。
–病变部位用10%中性福尔马林缓冲溶液浸泡,进行组织病理学检验
–鼻咽棉拭子进行PCR检测
活体动物运输检测
;目录;监控普通针对能真正威胁到设施安全微生物,而非一些不常见微生物
大多数设施监控会针对流行病原体最少每季度检一次,对于其它病原体则一年检一次;最通用程序:
–对于常见微生物及该设施已发觉过病原体进行季度检测
–???度检测时检全项
–开放喂养动物房检测房间哨兵鼠(也能够用脏垫料接触哨兵鼠)
检测方法
–血清学适合用于大个别病毒
–肉眼检验或PCR适合用于寄生虫及细菌学检验;1.管理、研究等人员观察
2.数据评定——繁育、研究结果等
3.日常送检筛查以排除微生物感染(主要是临床症状不显著个体)
4.针对一些问题进行深入诊疗性评价(疾病、异常结果等);总结
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