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生化实验试题参考
生物化学实验
二、填空题:
1.测定蛋白质含量的方法有(双缩脲法),(紫外吸收法),
(Folin-酚试剂法(或Lowry法))和(考马斯亮
蓝G-250染色法)。
2.CAT能把H2O2分解为H2O和O2,其活性大小以(以一定时间
内分解的H2O2量)来表示,当CAT
与H2O2反应结束,再用(碘量法)测定未分解的H2O2。
3.聚丙烯酰胺凝胶电泳是以(聚丙烯酰胺凝胶)作为载体的
一种区带电泳,这种凝胶是由(Acr)和交联剂(Bis)在催化剂作
用下聚合而成。化学聚合法一般用来制备(分离)胶,其自由基的引
发剂是(Ap),催化剂是(TEMED);光聚合法适于制备大孔径的(浓
缩)胶,催化剂是(核黄素)。
4.层析技术按分离过程所主要依据的物理化学性质进行分类,可
分成以下几种:(吸附层析),(分配层析),(离子交换层析),(凝胶
层析)和(亲和层析)。
5.使用离心机离心样品前,必须使离心管(等重)且对称放入
离心机。
6.米氏常数可近似表示酶和底物亲合力,Km愈小,表示E对S
的亲合力愈(大),Km愈大,表示E对S
的亲合力愈(小)。
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7.分光光度计在使用之前必须预热,注意预热及样品槽空时必
须__(打开)____(打开、合上)样品池翻盖。
8.CAT是植物体内重要的酶促防御系统之一,其活性高低与植
物的(抗逆性)密切相关。
9.纸层析实验中,____________形成固定相,____________流
动相。
10.聚丙烯酰胺凝胶是是由和交联剂在催化剂作用下聚合而
成的,在具有自
由基团体系时,两者就聚合。引发产生自由基的方法有两种:(化
学法)和(光聚合法)。
11.层析技术按按固定相的使用形式进行分类,可分成以下几种:
(柱层析),(纸层析),(薄层层析)和(薄
膜层析)。
参考答案:
生物化学实验
一、名词解释:
1、电泳:指带电粒子在电场中向与其自身所带电荷相反的电极
方向移动的现象。
2、同工酶:指催化同一种化学反应,但其酶蛋白本身的分子结
构组成却有所不同的一组酶。
3、分配层析法:用物质在两种或两种以上不同的混合溶剂中的
分配系数不同,而达到分离目的的一种实验方法。
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4、酶活性:酶催化化学反应的能力,往往以酶促反应的初速度
表示。
5、分光光度法:基于溶液对光吸收的大小来确定被测组份的含
量的分析方法称为分光光度法或吸光光度法。
6、层析技术:是利用被分离的混合物中各组分的理化性质(分
子的形状和大小、分子极性、吸附力、
分子亲和力、分配系数等)的不同,使各组分以不同程度在流动
相和固定相中进行分配,最终达到分离
目的。
7、比活力:即每毫克酶蛋白所含酶的活力单位数。比活力高,
表示酶纯度高。
二、填空题:
9.丙烯酰胺单体(Acr),N,N’-甲叉双丙烯酰胺(Bis)
1、简述4种测定蛋白质含量的方法及其原理。
答:(1)考马斯亮蓝G-250染色法:
考马斯亮蓝G-250结合蛋白质后,形成蓝色CBG-蛋白质结合物,
最大光吸收在595nm。在一定的蛋白质浓度范围内(10-1000ug/ml),
CBG-蛋白质结合物的O.D595nm值与蛋白质含量成正比,故可用分光
光度法进行蛋白质的定量测定。
(2)双缩脲法:
蛋白质含有两个以上的肽键(-CO-NH-)因此,有双缩脲反应,
在碱性溶液中蛋白质与Cu2+形成紫色络合物,其颜色深浅与蛋白质
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含量成正比,而与蛋白质的相对分子质量及aa成分无关,故可以用
来测定蛋白质含量;
(3)Folin-酚试剂法(Lowry法
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