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生化实验试题参考

生物化学实验

二、填空题：

1.测定蛋白质含量的方法有(双缩脲法)，(紫外吸收法)，

(Folin-酚试剂法（或Lowry法）)和（考马斯亮

蓝G-250染色法）。

2.CAT能把H2O2分解为H2O和O2，其活性大小以（以一定时间

内分解的H2O2量）来表示，当CAT

与H2O2反应结束，再用（碘量法）测定未分解的H2O2。

3.聚丙烯酰胺凝胶电泳是以（聚丙烯酰胺凝胶）作为载体的

一种区带电泳，这种凝胶是由（Acr）和交联剂（Bis）在催化剂作

用下聚合而成。化学聚合法一般用来制备（分离）胶，其自由基的引

发剂是（Ap），催化剂是（TEMED）；光聚合法适于制备大孔径的（浓

缩）胶，催化剂是（核黄素）。

4.层析技术按分离过程所主要依据的物理化学性质进行分类，可

分成以下几种：（吸附层析），（分配层析），（离子交换层析），（凝胶

层析）和（亲和层析）。

5.使用离心机离心样品前，必须使离心管（等重）且对称放入

离心机。

6.米氏常数可近似表示酶和底物亲合力，Km愈小，表示E对S

的亲合力愈（大），Km愈大，表示E对S

的亲合力愈（小）。

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7.分光光度计在使用之前必须预热，注意预热及样品槽空时必

须__（打开）____（打开、合上）样品池翻盖。

8.CAT是植物体内重要的酶促防御系统之一，其活性高低与植

物的（抗逆性）密切相关。

9.纸层析实验中，____________形成固定相，____________流

动相。

10.聚丙烯酰胺凝胶是是由和交联剂在催化剂作用下聚合而

成的，在具有自

由基团体系时，两者就聚合。引发产生自由基的方法有两种：（化

学法）和（光聚合法）。

11.层析技术按按固定相的使用形式进行分类，可分成以下几种：

（柱层析），（纸层析），（薄层层析）和（薄

膜层析）。

参考答案：

生物化学实验

一、名词解释：

1、电泳：指带电粒子在电场中向与其自身所带电荷相反的电极

方向移动的现象。

2、同工酶：指催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结

构组成却有所不同的一组酶。

3、分配层析法：用物质在两种或两种以上不同的混合溶剂中的

分配系数不同，而达到分离目的的一种实验方法。

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4、酶活性：酶催化化学反应的能力，往往以酶促反应的初速度

表示。

5、分光光度法：基于溶液对光吸收的大小来确定被测组份的含

量的分析方法称为分光光度法或吸光光度法。

6、层析技术：是利用被分离的混合物中各组分的理化性质（分

子的形状和大小、分子极性、吸附力、

分子亲和力、分配系数等）的不同，使各组分以不同程度在流动

相和固定相中进行分配，最终达到分离

目的。

7、比活力：即每毫克酶蛋白所含酶的活力单位数。比活力高，

表示酶纯度高。

二、填空题：

9.丙烯酰胺单体（Acr），N，N’-甲叉双丙烯酰胺（Bis）

1、简述4种测定蛋白质含量的方法及其原理。

答：(1)考马斯亮蓝G-250染色法：

考马斯亮蓝G-250结合蛋白质后，形成蓝色CBG-蛋白质结合物，

最大光吸收在595nm。在一定的蛋白质浓度范围内（10-1000ug/ml），

CBG-蛋白质结合物的O.D595nm值与蛋白质含量成正比，故可用分光

光度法进行蛋白质的定量测定。

（2）双缩脲法：

蛋白质含有两个以上的肽键（-CO-NH-）因此，有双缩脲反应，

在碱性溶液中蛋白质与Cu2+形成紫色络合物，其颜色深浅与蛋白质

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含量成正比，而与蛋白质的相对分子质量及aa成分无关，故可以用

来测定蛋白质含量；

（3）Folin-酚试剂法（Lowry法