多克隆抗体制备课件.pptVIP

.*1．抗原的性质，结构简单、分子小、亲缘关系近易诱发免疫耐受；免疫耐受的机制2．抗原的剂量，高剂量的TI抗原可诱导B细胞产生耐受，低剂量与高剂量的TD抗原均可诱导T细胞产生耐受。抗原剂量过低，不足以激活T及B细胞，不能诱导免疫应答，导致低带耐受。抗原剂量过高，抑制性T细胞被活化抑制免疫应答，导致高带耐受。T细胞较B细胞更易于诱导耐受。低带耐受和高带耐受间的比较见下表。免疫耐受的机制3．抗原注射的途径，抗原经鼻内、口服、静脉注射最易诱导耐受，腹腔注射次之，皮下及肌肉注射不易诱导机体产生耐受。口服耐受是指体外给予抗原，通过肠道刺激外周免疫系统产生免疫耐受。4．抗原在体内的持续时间,抗原持续存在刺激免疫耐受，抗原消失免疫耐受逐渐消退。5．抗原不加佐剂易致耐受*。*三次或以后的抗原注射所产生的应答和二次应答结果相似：抗体的滴度明显增加并且血清中抗体的种类和性质发生了改变，这种改变被称为免疫应答的成熟，具有重要的实际意义。通常在抗原注射4-6周后会产生具有高亲和力的抗体*目前大部分亲和柱介质都是基于琼脂糖（Agarose）或者葡聚糖(Dextran)。由于琼脂糖稳定性好、对蛋白质的非特异性吸附低、适宜活化，因此是制备抗原亲和柱填料的理想材料。单纯的琼脂糖是不能和蛋白质直接相连的，因此需要给它加一个有活性的臂，这就有点类似多肽与载体蛋白的偶联需要一